1. На главную
  2. Электронные версии
  3. Биоорганическая химия
  4. T. 46, № 2, 2020

Биоорганическая химия, 2020, T. 46, № 2, стр. 115-123

Исследование растительных кумаринов. 18. Конъюгаты кумаринов с лупановыми тритерпеноидами и 1,2,3-триазолами: синтез и противовоспалительная активность

А. В. Липеева 2, М. П. Долгих 1, Т. Г. Толстикова 1, Э. Э. Шульц 1, 2

1 Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения РАН
630090, Новосибирск, пр. Лаврентьева, 9, Россия

2 Новосибирский государственный университет
630090, Новосибирск, ул. Пирогова, 1, Россия

Поступила в редакцию 18.07.2019
После доработки 23.08.2019
Принята к публикации 19.09.2019

Полный текст (PDF)

Аннотация

Реакцией кумарина пеурутеницина с α,ω-дибромалканами синтезированы соответствующие 7-(ω-бромалкилокси)кумарины, взаимодействием которых с азидом натрия получены 7-(ω-азидоалкил)-замещенные производные пеурутеницина, проявившие высокую активность в Cu(I)-катализируемой реакции Хьюзгена с пропаргиловым эфиром бетулоновой кислоты. В результате реакции синтезированы 28-O-(хроменоалкил-триазолилметил)лупеноны. Взаимодействие пропаргилата бетулоновой кислоты с 2-азидоореозелонами в присутствии водного сульфата меди и аскорбата натрия приводит к соответствующим (фурохромен-триазолил)-20(29)-лупеноатам. У вновь синтезированного гибридного соединения тритерпеноидфурокумарина, содержащего триазольный линкер, выявлены противовоспалительные свойства на модели гистаминового воспаления.

Ключевые слова: тритерпеноиды, бетулин, кумарины, фурокумарины, азиды, 1,3-диполярное циклоприсоединение

ВВЕДЕНИЕ

Бетулин (I) и бетулоновая кислота (II), получаемая из бетулина, обладают комплексом важных биологических свойств и представляют интерес для создания фармакологически перспективных агентов [2, 3]. Так, химические модификации бетулина и бетулоновой кислоты по положению С28 привели к получению противовоспалительных, гепатопротекторных, антипаразитарных, противовирусных и противоопухолевых агентов [3–7]. Существенный интерес для создания селективных лекарственных агентов представляет синтез гибридных соединений, объединяющих в своей структуре две или более фармакофорные субъединицы. При этом биологически активные фрагменты комбинируются, образуя соединение лидер, имеющее более высокий аффинитет.

Недавние исследования показали, что введение в состав гибридных молекул фрагмента бетулоновой кислоты, приводит к созданию эффективных агентов, обладающих минимальными побочными эффектами. Так, в качестве перспективных противовоспалительных агентов известны тритерпеноиды лупанового ряда, содержащие фрагменты 1,3,4-оксадиазолов и оксадиазол-2-оксидов. [7]. Описана интересная библиотека анти-ВИЧ-агентов, включающих фрагменты бетулина (или бетулиновой кислоты), соединенные триазольным линкером с 3-азидо-26,3'-дезокситимидином (AZT) [8]. Синтезированы конъюгаты лупановых тритерпеноидов с аскорбиновой кислотой, обладающие противовирусной активностью в отношении вируса гриппа H1N1 [9]. Реакцией азид-алкинового циклоприсоединения алкиниламидов бетулоновой кислоты с алифатическими и ароматическими азидами синтезированы производные, проявляющие антиоксидантную и противовоспалительную активности [10]. Описаны триазолы 28-O-пропаргилового эфира бетулина, для которых выявлена противоопухолевая и антимикробная активность [11, 12].

Потенциал Сu-катализируемой реакции азид-алкинового циклоприсоединения (CuAAC-реакции) с участием производных лупановых тритерпеноидов в качестве одного из фармакофорных фрагментов обсужден в обзорах [13, 14]. Следует отметить, что гибридные соединения типа кумарин-тритерпеноид ранее не были синтезированы. Однако синтез таких соединений весьма перспективен, поскольку описанные нами ранее 7-триазолилзамещенные кумарины и 2-триазолилфурокумарины, проявляют антикоагулянтную [15], противоопухолевую [16] и антибактериальную [17] активности. Известны также противовоспалительные агенты, содержащие 1,2,3-триазольный фрагмент в качестве линкера [18, 19]. Целью настоящей работы является синтез гибридных соединений, сочетающих фрагменты бетулоновой кислоты и кумаринов (фурокумаринов), конъюгированные через алкилтриазольный линкер, а также оценка противовоспалительной активности тритерпеновых производных новых типов.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

В качестве исходного соединения использовали пропаргиловый эфир бетулоновой кислоты (III), синтезированный по методике [20]. Новые производные кумаринов – 7-(ω- азидоалкилокси)-6-метоксикабронилкумарины (IVa–в) получали из растительного кумарина пеурутеницина (V) [21]. Взаимодействие (V) с дибромалканами (VIa–в) в присутствии K2CO3 в DMF гладко приводило к соответствующим 7-(ω-бромалкилокси)кумаринам (VIIа-в) (выход 75–92%). Реакцией кумаринов (VIIа–в) с азидом натрия синтезировали азиды (IVа–в) (выход 86–88%) (cхема 1). Реакцию терминального алкина (III) с азидами (IVа–в) проводили в присутствии СuSO4 (5 мол. %) и аскорбата натрия (15 мол. %) в системе CH2Cl2–вода, 1 : 1 (в условиях работы [22]). После перекристаллизации выделяли соответствующие 1,4-дизамещенные 1,2,3-триазолы (VIIIa–b) (выход 72–75%).

Схема 1 . Синтез гибридных соединений (VIIIa–в).

Для получения тритерпеноид-фурокумариновых гибридов изучили взаимодействие пропаргилового эфира бетулоновой кислоты (III) c 2-азидоореозелоном (IXa) и 2-азидо-9-(N-метилпиперазинометил)ореозелоном (IXб) (схема 2 ), синтез которых описан нами ранее [16]. Полная конверсия исходных соединений достигалась при проведении CuAAC-реакции при нагревании в течение 12 ч. Выход гибридных соединений (Xа,б) составляет 78–82%.

Схема 2 . Синтез гибридных соединений (Xa,б).

Cостав и строение новых соединений устанавливали по данным спектроскопии ИК, ЯМР 1Н и 13C и элементного анализа. Спектры ЯМР 1Н и 13C синтезированных гибридных соединений (VIIIa–в), (Xа,б) содержат характерный набор сигналов тритерпенового, кумаринового фрагментов и триазольного цикла. Протону 1,2,3-триазольного цикла в спектрах ЯМР 1H отвечает синглет, расположенный в области 7.88–7.99 м.д. Атомам углерода этого гетероцикла в спектрах ЯМР 13C соответствуют сигналы при 122.26–125.49 (дублет атома С5 в спектрах записанных в режиме J-MOD) и 139.01–143.06 м.д. (синглет атома С4). Эти данные подтверждают образование 1,4-дизамещенных 1H-1,2,3-триазолов в результате СuAAС-реакции [23]. Характерной особенностью спектров ЯМР 1Н и 13С соединений (Xа,б) является удвоение сигналов метильных групп изопропильной группы в положении С-2' фурокумаринового заместителя, что свидетельствует об образовании гибридных соединений в виде смеси 2(R)- и 2(S)-диастереомеров.

ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ

Изучение противовоспалительной активности гибридных соединений (VIIIa–в), (Xa,б), бетулоновой кислоты (II), пеурутеницина (III) и препарата сравнения индометацина проводили на белых беспородных мышах массой 18–20 г (56 особей обоего пола) на гистаминовой модели воспаления. Результаты исследования приведены в табл. 1. Значительной противовоспалительной активностью обладало соединение (Xa) – конъюгат лупанового тритерпеноида с фурокумарином ореозелоном. Указанное соединение статистически значимо снижало отек лапы, вызванный введением гистамина. Введение дополнительного заместителя в положение С9 фурокумарина ореозелона приводило к потере противовоспалительной активности [соединение (Xб)]. Из гибридов бетулоновой кислоты с кумарином пеурутеницином слабый противовоспалительный эффект проявило соединение (VIIIa), содержащее линкерный алкилтриазольный фрагмент, с короткой трехзвенной алкильной цепочкой. Это соединение статистически значимо снижало отек, вызванный гистамином; его эффект был вдвое меньше эффекта конъюгата (Xa). Удлинение алкильной цепи линкера приводило к потере противовоспалительной активности [соединения VIIIб,в)].

Таблица 1.  

Сравнительная противовоспалительная (ПВ) активность соединений (VIIIa–в), (Xa,б), бетулоновой кислоты (II), пеурутеницина (III) и препарата индометацина

Соединение Доза,
мг/кг 		Индекс отека*, % Размер отека относительно контроля, % ПВ-активность, %
Контроль (Н2О + гистамин) – 37.9 ± 0.27 100 0
(II) 50 32.1 ± 0.12 84 16
(III) 50 31.8 ± 0.08a 83 17
(VIIIa) 50 31.4 ± 0.05а 82 18
(VIIIб) 50 36.8 ± 0.28 97 3
(VIIIв) 50 35.7 ± 0.12 94 6
(Xa) 50 24.5 ± 0.013b 64 36
(Xб) 50 35.9 ± 0.67 95 5
Индометацин 20 22.4 ± 0.72c 59 41

aP < 0.05; b P < 0.005 относительно препарата сравнения; cP < 0.05 относительно контроля. * Индекс отека – это процент воспаления по отношению к здоровой лапе (см. экспериментальную часть). 100% -ный отек: Это отек лапы в группе животных без введения препарата (вводятся физ. раствор, затем гистамин).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, Cu(I)-катализируемой реакцией азид-алкинового циклоприсоединения азидов кумаринов с пропаргиловым эфиром бетулоновой кислоты синтезированы гибридные соединения, сочетающие фрагменты бетулоновой кислоты и кумаринов или фурокумаринов, соединенные триазольным ланкером с дополнительной алифатической цепочкой. Для конъюгата бетулоновой кислоты с растительным фурокумарином ореозелоном, выявлена достоверная противовоспалительная активность, сравнимая с эффектом нестероидного противовоспалительного препарата индометацина на модели гистаминового воспаления.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Спектры ЯМР 1H и 13С растворов соединений в CDCl3 зарегистрированы на спектрометрах Bruker AV-400 (400 и 100 МГц соответственно). Химические сдвиги (δ, м.д.) приведены с использованием в качестве внутреннего стандарта сигналов хлороформа (H – δ 7.24, С – δ 76.90 м.д.). Отнесение сигналов в спектрах соединений выполнено на основе анализа спектров ЯМР 1Н и 13С (JMOD) с привлечением литературных данных для бетулоновой кислоты (II) [24]. Масс-спектры высокого разрешения записаны на масс-спектрометре DFS ThermoScientific, США (температура испарителя 200°С, ионизация ЭУ, 70 эВ). Величины удельного вращения [α]D измерены на поляриметре PolAAr 3005 (Великобритания).

Температура плавления измерена в термосистеме Mettler Toledo FP900 (CША). ИК-спектры (ν, см–1) сняты на Фурье-спектрометре Vector-22 в таблетках c KВr. УФ-спектры поглощения (λмакс, нм (lgε)) получены на спектрометре HР 8453 UV-Vis в растворе EtOH. Элементный анализ проведен на приборе Elemental Analyzer EA3000 (Германия). Контроль за ходом реакций осуществлен методом ТСХ на пластинах Silufol UV-254 с использованием систем: хлороформ, хлороформ–этанол, 10 : 1. Проявление в йодной камере и в УФ-свете.

Анализ чистоты веществ (Xa,б) проведен методом ВЭЖХ на приборе NexeraX2 (неподвижная фаза – сорбент Nucleosil 100-C18, 3 мкм, длина колонки 250 мм, внутренний диаметр – 2.1 мм; детекция пиков с помощью диодно-матричного детектора с диапазоном 190–700 нм). Бетулоновая кислота (II) [24], пропаргиловый эфир бетулоновой кислоты (III) [20], пеурутеницин (V) [21] и 2-азидоореозелоны (IXа,б) [16] синтезированы по известным методикам. Используемые в работе реагенты: аскорбат натрия, дибромалканы (IVа–в), азид натрия, медный купорос приобретены у фирмы “Alfa Aesar”. Растворители (хлористый метилен, DMF) очищены по стандартным методикам.

Химический синтез и характеристика соединений

Метил-7-(ω-бромалкилокси)-2-оксо-2Н-хромен-6-карбоксилатов (VIIа–в). К раствору 0.5 г (2.27 ммоль) пеурутеницина (V) в 50 мл DMF добавили 1.1 экв (2.5 ммоль) соответствующего дибромалкана (IVа–в) и 0.46 г (3.3 ммоль, 1.5 экв) K2CO3. Реакционную смесь перемешивали 12 ч при комнатной температуре. По окончании реакции отфильтровали осадок, раствор вылили на чашку Петри для свободного испарения. Сухой остаток кипятили в хлористом метилене (20 мл) в течение 20 мин, нерастворившийся осадок отфильтровали, раствор упарили в вакууме и высушили с азотной ловушкой.

Метил-7-(3-бромпропокси)-2-оксо-2Н-хромен-6-карбоксилат (VIIа). Получен из 0.5 г пеурутеницина (V), 0.25 мл 1,3-дибромпропана и 0.46 г K2CO3. Выход 0.58 г (75%). Желтое масло. Найдено, %: С 49.76; Н 4.04; Br 23.55. С14H13BrO5.. Вычислено, %: С 49.29; Н 3.84; Br 23.42. 1Н-ЯМР: 2.34 (м, 2Н, Н2'), 3.64 (м, 2Н, Н3'), 3.84 (c, 3Н, ОCH3), 4.17 (м, 2Н, Н1'), 6.22 (д, 1Н, J 9.8, Н3), 6.80 (с, 1Н, Н8), 7.59 (д, 1H, J 9.8, H4), 7.95 (с, 1Н, Н5). 13C-ЯМР: 29.23, 29.62 (C2',C3'), 52.12 (OCH3), 68.35 (C1'), 100.80 (C8), 111.52 (C4a), 111.65 (C3), 113.97 (C6), 132.02 (C5), 142.91 (C4), 157.98 (C8a), 160.14 (C2), 161.47 (C7), 165.10 (C=O). ИК-спектр: 3074, 3056, 2946, 2921, 2852, 1739, 1699, 1623, 1444, 1382, 1282, 1257, 1228, 1216, 1207, 1155, 1132, 1076, 829, 750. УФ-спектр: 213 (4.36), 242 (4.2), 270 (3.79), 322 (4.12).

Метил-7-(4-бромбутокси)-2-оксо-2Н-хромен-6-карбоксилат (VIIб). Получен из 0.5 г пеурутеницина, 0.3 мл 1,4-дибромбутана и 0.46 г K2CO3. Выход 0.72 г (90%). Т. пл. 103–104°С (эфир). Найдено, %: С 50.74; Н 4.16; Br 22.87. С15H15BrO5. Вычислено, %: С 50.72 ; Н 4.26; Br 22.50. Масс спектр: m/z 354.00972 [M]+. Рассчитана M 354.0097 (С15H15BrO5). 1Н-ЯМР: 2.00–2.10 (м, 4Н, Н2',H3'), 3.49 (м, 2Н, Н4'), 3.86 (c, 3Н, ОСН3), 4.08 (м, 2Н, Н1'), 6.23 (д, 1Н, J 9.8, Н3), 6.77 (с, 1Н, Н8), 7.60 (д, 1H, J 9.8, H4), 7.95 (с, 1Н, Н5). 13C-ЯМР: 27.37, 29.23, 33.15 (C2',C3',C4'), 52.12 (OCH3), 68.35 (C1'), 100.65 (C8), 111.65 (C4a), 111.68 (C3), 113.97 (C6), 132.02 (C5), 142.91 (C4), 157.79 (C8a), 160.07 (C2), 161.23 (C7), 165.10 (C=O). ИК-спектр: 3457, 3083, 3062, 2950, 2927, 2852, 1733, 1702, 1621, 1444, 1380, 1288, 1280, 1220, 1205, 1153, 1132, 1106, 1076, 823, 750. УФ-спектр: 212 (4.35), 243 (4.18), 268 (3.8), 323 (4.12).

Метил-7-(6-бромгексилокси)-2-оксо-2Н-хромен-6-карбоксилат (VIIв). Получен из 0.5 г пеурутеницина, 0.375 мл 1,6-дибромгексана и 0.46 г K2CO3. Выход 0.79 г (92%). Т. пл. 114–115°С (эфир). Найдено, %: С 53.12; Н 4.94; Br 20.88. С17H19BrO5. Вычислено, %: С 53.28; Н 5.00; Br 20.85. 1Н-ЯМР: 1.52–1.85 (м, 8Н, H2', H3', H4', H5', 4 × × CH2), 3.39 (м, 2Н, Н6'), 3.86 (c, 3Н, ОCH3), 4.04 (м, 2Н, Н1'), 6.23 (д, 1Н, J 9.8, Н3), 6.78 (c, 1Н, Н8), 7.60 (д, 1H, J 9.8, H4), 7.94 (с, 1Н, Н5). 13C-ЯМР: 27.21, 27.65, 28.56, 32.52, 33.50 (C2',3',4',5',6'), 52.07 (OCH3), 69.18 (C1'), 100.68 (C8), 111.53 (C4a), 111.62 (C3), 113.88 (C6), 131.96 (C5), 142.94 (C4), 157.83 (C8a), 160.13 (C2), 161.49 (C7), 165.13 (C=O). ИК-спектр: 3118, 3081, 2929, 2854, 1741, 1702, 1623, 1442, 1500, 1382, 1288, 1278, 1222, 1207, 1155, 1132, 1108, 825, 750. УФ-спектр: 213 (4.35), 243 (4.18), 268 (3.78), 323 (4.13).

Метил-7-(ω-азидоалкилокси)-2-оксо-2Н-хромен-6-карбоксилатов (IVа–в).

К раствору 1 ммоль бромида (VIIa–в) в 50 мл DMF добавили 1.1 экв. азида натрия. Смесь нагревали при 70°С 10 ч, затем вылили на чашку Петри для свободного испарения. Сухой остаток растворили в 20 мл CH2Cl2, промыли насыщенным раствором соли, высушили над MgSO4 и упарили. После перекристаллизации из эфира получили азиды (IVа–в).

Метил-7-(3-азидопропокси)-2-оксо-2Н-хромен-6-карбоксилат (IVа). Выход 86% (0.59 г). Т. пл. 62–65°С (эфир). Найдено, %: С 55.72; Н 4.12; N 13.77. С14H13N3O5. Вычислено, %: С 55.45; Н 4.32; N 13.86. 1Н-ЯМР: 2.02 (м, 2Н, Н2′), 3.52 (м, 2Н, Н3'), 3.78 (c, 3Н, ОСН3), 4.06 (м, 2Н, Н1'), 6.16 (д, 1Н, J 9.8, Н3), 6.73 (c, 1Н, Н8), 7.55 (д, 1H, J 9.8, H4), 7.89 (с, 1Н, Н5). 13C-ЯМР: 29.16 (C2'), 51.58 (C3'), 68.28 (C1'), 52.04 (OСН3), 101.16 (C8), 111.44 (C4a), 111.59 (C3), 113.82 (C6), 131.87 (C5), 142.83 (C4), 157.91 (C8a), 160.05 (C2), 161.40 (C7), 165.02 (C=О). ИК-спектр: 2948, 2929, 2850, 2100, 1726, 1666, 1621, 1442, 1380, 1286, 1257, 1218, 1207, 1153, 1105, 1076, 825, 750.

Метил-7-(4-азидобутокси)-2-оксо-2Н-хромен-6-карбоксилат (IVб). Выход 0.63 г (88%). Т. пл. 98–99°С (эфир). Найдено, %: С 56.87; Н 4.85; N 13.12. С15H15N3O5. Вычислено, %: С 56.78; Н 4.77; N 13.24. 1Н-ЯМР: 1.79-1.91 (м, 4Н, Н2', H3'), 3.34 (м, 2Н, Н4'), 3.82 (c, 3Н, ОСH3), 4.04 (м, 2Н, Н1'), 6.19 (д, 1Н, J 9.8 Н3), 6.74 (c, 1Н, Н8), 7.57 (д, 1H, J 9.8, H4), 7.91 (с, 1Н, Н5). 13C-ЯМР: 27.63, 29.49 (C2',3'), 50.15 (C4'), 52.37 (OCH3), 68.61 (C1') 100.91 (C8), 111.91 (C4a), 114.23 (C3), 117.52 (C6), 132.28 (C5), 143.16 (C4), 158.41 (C8a), 160.32 (C2), 161.13 (C7), 165.07 (C=O). ИК-спектр: 3087, 2946, 2867, 2100, 1724, 1621, 1467, 1375, 1282, 1201, 1153, 1132, 1106, 1076, 825, 750.

Метил-7-(6-азидогексилокси)-2-оксо-2Н-хромен-6-карбоксилат (IVв). Выход 0.67 г (86%). Т. пл. 104–105°С (эфир). Найдено, %: С 58.76; Н 5.32; N 12.19. С17H19N3O5. Вычислено, %: С 59.12; Н 5.55; N 12.17. 1Н-ЯМР: 1.52-1.92 (м, 8Н, Н2', H3', H4', H5', 4 × CH2), 3.35 (м, 2Н, Н6'), 3.95 (c, 3Н, ОCH3), 4.12 (м, 2Н, Н1'), 6.30 (д, 1Н, J 9.8, Н3), 6.85 (c, 1Н, Н8), 7.71 (д, 1H, J 9.8, H4), 8.01 (с, 1Н, Н5). 13C-ЯМР: 24.97, 25.84, 28.25 (C2',3',4',5'), 50.78 (C6'), 68.77 (C1'), 51.70 (OCH3), 100.16 (C8), 111.10 (C4a), 113.17 (C3), 116.73 (C6), 131.65 (C5), 143.01 (C4), 157.31 (C8a), 160.16 (C2), 161.11 (C7), 164.85 (C=O). ИК-спектр: 3066, 2939, 2860, 2096, 1731, 1702, 1621, 1456, 1444, 1380, 1288, 1278, 1218, 1205, 1153, 1132, 1105, 825, 750.

(1-{3-[6-(Метоксикарбонил)-2-оксо-2H-хромен-7-илокси]алкил}-1H-1,2,3-триазол-4-илметил)-3-оксо-луп-20(29)ен-28-оаты (VIIIa–в). К раствору 0.8 ммоль азида (IVa–в) в 10 мл хлористого метилена прибавили предварительно растворенные в 10 мл воды 15 мол. % аскорбата натрия и 5 мол. % СuSO4 ⋅ 5H2O. В последнюю очередь добавили 0.4 г (0.8 ммоль) пропаргилата бетулоновой кислоты (III). Реакционную смесь перемешивали 3 ч при 20°C и 1 ч при 40°С. Смесь обработали 10 мл воды, слои разделили, дополнительно продукт извлекли хлористым метиленом (4 × 5 мл), объединенные экстракты промыли водой, сушили MgSO4, осушитель отфильтровали, растворитель упарили. После обработки эфиром выделили соединения (VIIIa–в).

(1-{3-[6-(Метоксикарбонил)-2-оксо-2H-хромен-7-илокси]пропил}-1H-1,2,3-триазол-4-илметил)-3-оксо-луп-20(29)ен-28-оат (VIIIa) получен из 250 мг (0.8 ммоль) азида (IVа), 400 мг (0.8 ммоль) пропаргилата бетулоновой кислоты (III) в присутствии 25 мг (0.12 ммоль, 15 мол. %) аскорбата натрия, 10 мг (5 мол. %, 0.04 ммоль) СuSO4 ⋅ 5H2O. Выход 0.46 г (72%). Т. пл. 174–175°С (диэтиловый эфир). [α]D + 13.6 (с 1.00, CHCl3). Найдено, %: С 70.68; Н 7.46; N 5.03. С47H61N3O8. Вычислено, %: С 70.92; Н 7.72; N 5.28. 1Н-ЯМР: 0.88, 0.93, 0.95, 0.98, 1.03 (все с, 15Н, H25, H24, H26, H27, H23, 5 × СН3), 1.10–1.13 (м, 2Н, Н5, H9), 1.22–1.38 (м, 15Н, СН, СН2), 1.65 (с, 3Н, Н30), 1.69 (1H, м, Н12), 1.80–1.89 (4Н, м, Н1, H21, H22, H16), 2.25 (м, 1Н, Н13), 2.37 (м, 2Н, Н2'''), 2.42–2.46 (2Н, м, Н2, H19), 3.69 (м, 2Н, Н3'''), 3.87 (c, 3Н, ОCH3), 4.21 (м, 2Н, Н1'''), 4.59 (уш.с, 1H, H29), 4.65 (м, 2Н, Н6''), 4.70 (уш.c, 1H, H29), 6.26 (д, 1Н, J 9.4, Н3'), 6.84 (с, 1Н, Н8'), 7.62 (д, 1H, J 9.4, H4'), 7.96 (с, 1Н, Н5'), 7.99 (с, 1Н, Н5′′). 13C-ЯМР: 14.56 (C27), 15.87 (C26), 15.90 (C25), 19.31 (C30), 19.34 (C6), 20.95 (C24), 21.31 (C11), 25.43 (C12), 26.54 (C23), 29.61 (C21), 29.63 (C2'''), 30.65 (C15), 31.72 (C3'''), 31.74 (C16), 34.06 (C7), 36.82 (C2), 36.83 (C22), 38.24 (C10), 39.57 (C13), 40.66 (C1), 42.38 (C8), 42.43 (C14), 46.73 (C19), 46.90 (C4), 49.32 (C9), 49.83 (C18), 51.28 (C6''), 52.16 (OСН3), 54.85 (C5), 56.46 (C17), 66.44 (C1'''), 100.83 (C8'), 109.68 (C29), 111.80 (C4'a), 114.15 (C3'), 116.98 (C6'), 125.26 (C5''), 132.20 (C5'), 141.42 (C4''), 142.94 (C4'), 150.26 (C20), 157.96 (C8'a), 160.25 (C2'), 161.54 (C7'), 165.17 (C=0), 175.07 (C28), 211.11 (C3). ИК-спектр: 3077, 2948, 2931, 2869, 1729, 1621, 1461, 1454, 1444, 1378, 1286, 1257, 1207, 1153, 1132, 1105, 1076, 825, 786, 750. УФ-спектр: 242 (4.39), 268 (3.94), 322 (4.31).

(1-{3-[6-(Метоксикарбонил)-2-оксо-2H-хромен-7-илокси]бутил}-1H-1,2,3-триазол-4-илметил)-3-оксо-луп-20(29)ен-28-оат (VIIIб) получен из 255 мг (0.8 ммоль) азида (IVб) и 400 мг (0.8 ммоль) (III) в присутствии 25 мг аскорбата натрия и 10 мг СuSO4 ⋅ 5H2O. Выход 0.5 г (77%). Т. пл. 181–182°С (эфир). [α]D + 14.4 (с 1.00, CHCl3). Найдено, %: С 71.26; Н 8.17; N 5.25. С48H63N3O8. Вычислено, %: С 71.17; Н 7.84; N 5.19. 1Н-ЯМР: 0.89, 0.93, 0.95, 0.99, 1.04 (все с, 15Н, H25, H24, H26, H27, H23, 5 ×СН3), 1.09–1.13 (м, 2Н, Н5, H9), 1.22–1.45 (м, 15Н, СН, СН2), 1.59 (1H, м, Н12), 1.66 (с, 3Н, Н30), 1.78–1.91 (4Н, м, Н1, H21, H22, H16), 2.03 (м, 2Н, Н3'''), 2.15 (м, 2Н, Н2'''), 2.25 (м, 1Н, Н13), 2.38–2.46 (2Н, м, Н2, H19), 3.48–3.53 (м, 2Н, Н4'''), 3.89 (c, 3Н, ОСH3), 4.10 (м, 2Н, Н1'''), 4.59 (уш.с, 1H, H29), 4.65 (м, 2Н, Н6''), 4.71 (уш.c, 1H, Н29), 6.27 (д, 1Н, J 9.4, Н3'), 6.81 (с, 1Н, Н8'), 7.62 (д, 1H, J 9.4, H4'), 7.96 (с, 1Н, Н5'), 7.98 (с, 1Н, Н5''). 13C-ЯМР: 14.68 (C27), 15.75 (C26), 15.80 (C25), 19.49 (C30), 19.57 (C6), 20.96 (C24), 21.33 (C11), 25.45 (C12), 26.55 (C23), 27.37, 29.25 (C2'',3''), 29.28 (C21), 30.40 (C15), 31.81 (C16), 33.30 (C4'''), 34.09 (C7), 36.70 (C2), 36.84 (C22), 38.26 (C10), 39.56 (C13), 40.66 (C1), 42.38 (C8), 42.40 (C14), 46.75 (C19), 47.28 (C4), 49.33 (C9), 49.83 (C18), 51.31 (C6''), 52.26 (ОCH3OССР3Щ3 ), 54.87 (C5), 56.48 (C17), 68.27 (C1'''), 100.65 (C8'), 109.68 (C29), 111.67 (C4'a), 112.95 (C3'), 114.05 (C6'), 122.26 (C5''), 132.16 (C5'), 141.11 (C4''), 143.02 (C4'), 150.29 (C20), 157.84 (C8'a), 160.24 (C2'), 161.21 (C7′), 165.17 (C=O), 175.10 (C28), 218.25 (C3). ИК-спектр: 3143, 3075, 2947, 2868, 1728, 1620, 1579, 1455, 1444, 1378, 1287, 1256, 1219, 1205, 1152, 1130, 1105, 1075, 964, 823, 784, 749. УФ-спектр: 242 (4.45), 302 (4.31), 323 (4.39).

(1-{3-[6-(Метоксикарбонил)-2-оксо-2H-хромен-7-илокси]гексил}-1H-1,2,3-триазол-4-илметил)-3-оксо-луп-20(29)ен-28-оат (VIIIв) получен из 250 мг (0.72 ммоль) азида (IVв) и 350 г (0.72 ммоль) (III) в присутствии 21 мг аскорбата натрия (15 мол. %) и 9 мг (5 мол%) СuSO4 ⋅ 5H2O. Выход 0.45 г (75%). Т.пл. 188–189°С (эфир). [α]D + 23.02 (с 1.00, CHCl3). Найдено, %: С 71.31; Н 8.30; N 5.12. С50H67N3O8. Вычислено, %: С 71.66; Н 8.06; N 5.01. 1Н-ЯМР: 0.89, 0.93, 0.95, 0.99, 1.04 (все с, 15Н, H25, H24, H26, H27, H23, 5×СН3), 1.09-1.13 (м, 2Н, Н5, H9), 1.22–1.42 (м, 15Н, СН, СН2), 1.53 (м, 4Н, Н3''', H4'''), 1.60–1.63 (1H, м, Н12), 1.66 (с, 3Н, Н30), 1.79–1.93 (8Н, м, Н1, H21, H22, H16, 2 Н2''', 2 H5'''), 2.21–2.27 (м, 1Н, Н13), 2.37–2.48 (2Н, м, Н2, H19), 3.39–3.45 (м, 2Н, Н6'''), 3.88 (c, 3Н, ОCH3), 4.06 (м, 2Н, Н1'''), 4.58 (уш.с, 1H, H29), 4.65 (м, 2Н, Н6''), 4.71 (уш.c, 1H, Н29), 6.25 (д, 1Н, J 9.8, Н3'), 6.81 (c, 1Н, Н8'), 7.61 (д, 1H, J 9.8, H4'), 7.94 (с, 1Н, Н5′), 7.97 (с, 1Н, Н5''). 13C-ЯМР: 15.68 (C27), 15.91 (C26), 15.93 (C25), 19.34 (C30), 19.38 (C6), 20.98 (C24), 21.34 (C11), 25.05 (C12), 26.11 (C23), 27.53, 27.70 (C3''', 4'''), 28.59 (C5'''), 28.86 (C21), 30.12 (C15), 31.82 (C16), 32.54 (C2'''), 33.64 (C6'''), 34.09 (C7), 36.83 (C2), 36.85 (C22), 38.26 (C10), 39.69 (C13), 40.69 (C1), 42.33 (C8), 42.38 (C14), 47.25 (C19), 47.28 (C4), 49.35 (C9), 49.50 (C18), 51.31 (C6''), 52.07 (OCH3), 54.89 (C5), 56.49 (C17), 69.16 (C1'''), 100.67 (C8'), 109.72 (C29), 113.91 (C4'a), 113.94 (C3'), 117.21 (C6'), 125.49 (C5''), 132.07 (C5''), 139.01 (C4''), 143.03 (C4′), 150.26 (C20), 157.96 (C8'a), 160.25 (C2'), 161.54 (C7′), 165.17 (C=O), 175.07 (C28), 211.11 (C3). ИК-спектр: 3147, 3081, 2928, 1731, 1620, 1579, 1461, 1456, 1378, 1287, 1256, 1218, 1205, 1151, 1129, 1105, 1075, 1012, 967, 824, 785, 749. УФ спектр, λмакс, нм (lgε): 242 (4.32), 268 (3.91), 323 (4.27).

{[1-(2-Изопропил-3,7-диоксо-3,7-дигидро-2H-фуро[3,2-g]хромен-2-ил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]-метил}-3-оксо-20(29)-лупен-28-оат (Xa). Смесь 350 мг (1 ммоль) 2-азидоореозелона (IXa), 492 мг (1 ммоль) пропаргилата бетулоновой кислоты (III), 13 мг (0.5 ммоль) CuSO4 ⋅ 5H2O и 40 мг (2 ммоль) аскорбата натрия в растворе CH2Cl2/H2O (в соотношении 2 : 1) перемешивали при 40°С 12 ч. Реакционную смесь охлаждали и разбавляли небольшим количеством H2O, продукт экстрагировали CH2Cl2 (4 × 10 мл). Объединеный экстракт сушили над MgSO4, растворитель удаляли в вакууме, полученное вещество подвергали сушке в вакууме масляного насоса. Выход: 0.647 г (82%). Чистота по ВЭЖХ 95%. Т. пл. 245–246°С (эфир). Найдено, %: С 72.21; Н 7.87; N 5.21. С47H59N3O7. Вычислено, %: С 72.56; Н 7.64; N 5.40. 1Н-ЯМР: 0.71, 0.85, 0.90, 0.97, 0.99 (все с, 15Н, 5 × СН3), 0.86 (м, 1Н, СН5), 0.99, 1.01 (оба д, 6Н, J 7.0, 2 × СН3, i-Pr), 1.02–1.05 (м, 1Н, СН9), 1.19–1.39 (м, 15Н, СН, СН2), 1.51–1.55 (2H, м, Н1,H12), 1.62 (с, 3Н, Н30), 1.77–1.89 (3Н, м, Н21, H22, H16), 2.14-2.21 (м, 1Н, Н13), 2.30–2.48 (2Н, м, Н2, H19), 3.17 (м, 1Н, Н-iPr), 4.55 (уш.с, 1H, H29), 4.65 (уш.с, 2Н, Н6''), 4.72 (уш.c, 1H, Н29), 6.39 (д, 1Н, J 9.7, Н6'), 7.09 (c, 1Н, Н9′), 7.70 (д, 1H, J 9.7, H5'), 7.80 (с, 1Н, Н4'), 7.88 (с, 1Н, Н5''). 13C ЯМР: 14.50 (C27), 15.36 (C26), 15.51, 15.68 (2 × СH3, i-Pr), 15.90 (C25), 19.21 (C11), 19.50 (C6), 20.99 (C24), 21.02 (C6), 25.33 (CH), 25.37 (C12), 25.89 (C23), 29.44 (C21), 30.33 (C15), 31.76 (C16), 33.93 (C7), 36.78 (C2), 37.25 (C22), 39.02 (C10), 39.52 (C13), 40.47 (C1), 42.33 (C8), 42.36 (C14), 46.80 (C19), 47.25 (C4), 49.13 (C9), 49.76 (C18), 51.32 (C6''), 54.87 (C-5), 56.45 (C17), 98.43 (C2'), 101.17 (C9'), 109.73 (C29), 115.70 (C3'a), 115.79 (C4'a), 116.45 (C6'), 123.87 (C5''), 125.74 (C4'), 142.83 (C5'), 143.06 (C4''), 150.13 (C20), 158.53 (C9'a), 161.78 (C8'a), 171.58 (C7'), 175.99 (C28), 191.42 (C3'), 217.87 (C3). ИК спектр, ν, см–1: 3083, 3060, 3023, 2956, 2925, 2869, 2854, 1733, 1675, 1629, 1579, 1490, 1444, 1432, 1394, 1342, 1299, 1236, 1213, 1141, 1108, 1076, 948. УФ спектр, λмакс, нм (lg ε): 220 (4.11), 225 (4.09), 245 (4.31), 287 (3.97), 305 (3.92), 323 (4.01).

2-[1-(2-Изопропил-9-[(4-метилпиперазин-1-ил)метил]-3,7-диоксо-3,7-дигидро-2H-фуро[3,2-g]хромен-2-ил}-1H-1,2,3-триазол-4-ил)метил]-3-оксо-20(29)-лупен-28-оат (Xб). Смесь 350 мг (0.9 ммоль) 2-азидо-9-замещенного ореозелона (IXб), 443 мг (0.9 ммоль) пропаргилата бетулоновой кислоты (III), 11 мг (0.045 моль) CuSO4 ⋅ ⋅ 5H2O и 2.7 мг (0.14 моль) аскорбата натрия в смеси CH2Cl2–H2O (2 : 1, v/v) перемешивали при 40°С 12 ч. Реакционную смесь охлаждали и разбавляли небольшим количеством H2O, продукт экстрагировали CH2Cl2 (4 × 10 мл). Экстракт сушили над MgSO4, растворитель удаляли в вакууме, полученное вещество подвергали сушке в вакууме масляного насоса. Выход: 0.54 г (78%). Чистота по ВЭЖХ 94%. Т. пл. 184–185°С (эфир). Найдено, %: С 71.11; Н 8.94; N 7.92. С53H71N5O7. Вычислено, %: С 71.51; Н 8.04; N 7.87. 1Н-ЯМР: 0.88, 0.90, 0.92, 0.96, 0.98 (все с, 15Н, 5СН3), 0.84–0.93 (м, 1Н, Н5), 1.15, 1.09 (оба д, 6Н, J 7.0, 2 × СН3, i-Pr), 1.04–1.10 (м, 1Н, Н9), 1.28–1.45 (м, 15Н, СН, СН2), 1.53–1.69 (2H, м, Н1, Н12), 1.65 (с, 3Н, Н30), 1.75–1.92 (м, 7Н, 3Н, СН2-16,21,22 и 4Н, пиперазино), 2.21 (с, 3Н, СH3), 2.16–2.41 (м, 5Н, Н13 и 4Н, пиперазино), 2.32–2.49 (м, 2Н, Н2, H19), 3.26–3.36 (м, 1Н, СН), 4.57 (уш.с, 1H, H29), 4.61 (уш.с, 2Н, Н6''), 4.66 (уш.с, 2Н, СН2-при С9'), 4.70 (уш.c, 1H, Н29), 6.65 (уш.д, 1Н, J 9.7, Н6'), 7.61 (уш.д, 1H, J 9.7, H5′), 7.72 (с, 1Н, Н4'), 7.99 (с, 1Н, Н5''). 13C-ЯМР: 14.44 (C27), 15.30 (C26), 15.85 (CH3), 15.88 (CH3), 15.91 (C25), 19.42 (C30), 19.44 (C6), 20.93 (C24), 21.20 (C11), 25.31 (CH), 25.40 (C12), 26.14 (C23), 29.38 (C21), 30.27 (C15), 31.70 (C16), 33.87 (C7), 36.73 (C2), 37.28 (C22), 39.18 (C10), 39.46 (C13), 40.42 (C1), 42.12 (C8), 42.27, 46.07 (4С, пиперазино), 42.36 (C14), 46.68 (C19), 47.23 (C4), 47.38 (CH2 при С9'), 49.07 (C9), 49.70 (C18), 51.21 (C6''), 54.17 (NMe), 54.65 (C5), 56.39 (C17), 98.43 (C2'), 101.11 (C9'), 110.42 (C29), 115.64 (C3'a), 116.32 (C4'a), 116.39 (C6'), 125.14 (C5''), 125.26 (C4'), 142.77 (C5'), 143.00 (C4''), 150.07 (C20), 158.47 (C9'a), 161.72 (C8'a), 169.50 (C7'), 175.00 (C28), 193.03 (C3'), 216.68 (C3). ИК-спектр: 3103, 3060, 3013, 2946, 2908, 2875, 2814, 1733, 1677, 1629, 1576, 1487, 1442, 1419, 1394, 1342, 1218, 1206, 1203, 1141, 1105, 1006, 945. УФ-спектр: 220 (4.30), 255 (4.18), 294 (3.99), 306 (3.85).

Изучение противовоспалительной активности

Животные. Животных (белых беспородных мышей) для исследования, полученных из вивария ФИЦ института цитотологии и генетики СО РАН, содержали в стандартных условиях со свободным доступом к пище и воде.

Противовоспалительную активность изучали на модели гистаминового отека [25]. Животных делили на группы по 8 особей в каждой. Исследуемые соединения вводили однократно в желудок в водно-твиновой суспензии. Через 1 ч после введения исследуемых веществ вводили 0.1% раствор гистамина (0.05 мл) под апоневроз левой задней лапы. По прошествии 5 ч после введения флогогена животных умерщвляли, отрезали задние лапы по линии запястного сустава и измеряли их массу. Противовоспалительную активность представляли в виде среднего для каждой группы значения процента воспаления. Процент воспаления (индекс отека) рассчитывали для каждой мыши по следующей формуле: ИО = [(MВЛ – MКЛ) : MКЛ] × 100%, где MВЛ – масса воспаленной лапы, MКЛ – масса не воспаленной лапы [25].

Рис. 1.

Структуры лупановых тритерпеноидов.

Список литературы

  1. Захаров Д.О., Липеева А.В., Гатилов Ю.В., Макаров A.Г., Шульц Э.Э. // Журнал орган. химии. 2019. Т. 55. Вып. 10. С. 1567–1576.

  2. Толстиков Г.А., Флехтер О.Б., Шульц Э.Э., Балтина Л.А., Толстиков А.Г. // Химия в интересах устойчивого развития. 2005. Т. 13. С. 1–30.

  3. Шинтяпина А.В., Шульц Э.Э., Петренко Н.И., Узенкова Н.В., Толстиков Г.А., Пронкина Н.В., Кожевников В.С., Покровский А.Г. // Биоорганическая химия. 2007. Т. 33. Вып. 6. С. 579–583.

  4. Антимонова А.Н., Петренко Н.И., Шульц Э.Э., Полиенко Ю.Ф., Шакиров M.М., Иртегова И.Г., Покровский М.А., Шерман К.М., Григорьев И.А., Покровский А.Г., Толстиков Г.А. // Биоорганическая химия. 2013. Т. 39. Вып. 2. С. 206–211.

  5. Сорокина И.В., Баев Д.С., Жукова Н.А., Толстикова Т.Г., Антимонова А.Н., Петренко Н.И., Шульц Э.Э., Григорьев И.А. // Биоорганическая химия. 2013. Т. 39. Вып. 6. С. 749–752. [Russ. J. Bioorg. Chem. 2013. V. 39. P. 668–670].

  6. Eignerova B., Tichy M., Krasulova J., Kvasnica M., Rarova L., Christova R., Urban M., Bednarczyk-Cwynar B., Hajduch M., Sarek J. // Eur. J. Med. Chem. 2017. V. 140. P. 403–420.

  7. Popov S.A., Semenova M.D., Baev D.S., Sorokina I.V., Zhukova N.A., Frolova T.S., Tolstikova T.G., Shults E.E., Turks M. // Steroids. 2019 (принята в печать) https://doi.org/10.1016/j.steroids.2019.108443

  8. Bori I.D., Hung H.-Y., Qian K., Chen C.-H., Morris-Natschke S.L., Lee K.-H. // Tetrahedron Lett. 2012. V. 53. P. 1987−1989.

  9. Wang H., Xu R., Shi Y., Si L., Jiao P., Fan Z., Han X., Wu X., Zhou X., Yu F., Zhang Y., Zhang L., Zhang L., Zhou D., Xiao S. // Eur. J. Med. Chem. 2016. V. 110. P. 376–388.

  10. Vasilevsky S.F., Govdi A.I., Sorokina I.V., Tolstikova T.G., Baev D.S., Tolstikov G.A., Mamatuyk V.I., Alabugin I.V. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2011. V. 21. P. 62–65.

  11. Khan I., Guru S.K., Rath S.K., Chinthakindi P.K., Singh B., Koul S., Bhushan S., Sangwan P.L. // Eur. J. Med. Chem. 2016. V. 108. P. 104–116

  12. Bebenek E., Jastrzebska M., Kadela-Tomanek M., Chrobak E., Orzechowska B., Zwolińska R., Latocha M., Mertas A., Czuba Z., Boryczka S. // Molecules. 2017. V. 22. P. 1876/1–1876/16.

  13. Kacprzak K., Skiera I., Piasecka M., Paryzek Z. // Chem. Rev. 2016. V. 116. P. 5689–5743.

  14. Czuk R., Deigner H.-P. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2019. V. 29. P. 949–958.

  15. Lipeeva A.V., Khvostov M.V., Baev D.S., Shakirov M.M., Tolstikova T.G., Shults E.E. // Med. Chem. 2016. V. 12. P. 674–683.

  16. Lipeeva A.V., Pokrovsky M.A., Baev D.S., Shakirov M.M, Bagryanskaya I.Y., Tolstikova T.G., Pokrovsky A.G., Shults E.E. // Eur. J. Med. Chem. 2015. V. 100. P. 119–128.

  17. Lipeeva A.V., Zakharov D.O., Burova L.G., Frolova T.S., Baev D.S., Shirokikh I.V., Evstropov A.N., Sinitsyna O.I., Tolstikova T.G., Shults E.E. // Molecules. 2019. V. 24. P. 21 261–212 623.

  18. Haider S., Alam M.S., Hamid H., Shafi S., Nargotra A., Mahajan P., Nazreen S., Kalle A.M., Kharbanda C., Ali Y., Alam A., Panda A.K. // Eur. J. Med. Chem. 2013. V. 70. P. 579–588.

  19. Reddy A.L.V.K., Kathale N.E. // Orient. J. Chem. 2017. V. 33. P. 2930–2936.

  20. Govdi A.I., Vasilevsky S.F., Sokolova N.V., Sorokina I.V., Tolstikova T.G., Nenajdenko V.G. // Mendeleev Commun. 2013. V. 23. P. 260–261.

  21. Осадчий С.А., Шульц Э.Э., Шакиров М.М., Толстиков Г.А. // Изв. РАН. Серия хим. 2006. С. 362–366. [Osadchii S.A., Shul’ts E.E.,; Shakirov M.M., Tolstikov G.A. // Russ. Chem. Bull. (Int. Ed.), 2006, 55, 375–379].

  22. Lipeeva A.V., Shults E.E. // Chem. Heterocycl. Compd. 2017. V. 53. P. 1302-1309.

  23. Creary X., Anderson A., Brophy C., Crowell F., Funk Z. // J. Org. Chem. 2012. V. 77. P. 8756–8759.

  24. 24. Petrenko N.I., Elantseva N.V., Petukhova V.Z., Shakirov M.M., Shul’ts E.E., Tolstikov G.A. // Chem. Nat. Compd. 2002. V. 38. P. 331–339.

  25. Winter C.A., Risley E.A., Nuss G.W. // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1963. V. 141. P. 369–376.

Дополнительные материалы отсутствуют.

Инструменты

следующая статья выпуска содержание выпуска

Биоорганическая химия

Архивы выпусков Информация о журнале Отправить рукопись в журнал