ЖУРНАЛ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ, 2019, том 55, № 9, с. 1406-1414
УДК 547.853.1 + 547.789.1
СИНТЕЗ ЗАМЕЩЕННЫХ АМИНОПИРИМИДИНОВ -
НОВЫХ ПЕРСПЕКТИВНЫХ ИНГИБИТОРОВ
ТИРОЗИНОВЫХ КИНАЗ
© 2019 г. Н. В. Столповская*, А. А. Кружилин, А. В. Зорина, Х. С. Шихалиев,
И. В. Леденева, Е. А. Кошелева, Д. Ю. Вандышев
ФГБОУ ВО «Воронежский государственный университет», 394018, Россия, г. Воронеж, Университетская пл. 1
*e-mail: stolpovskaya@chem.vsu.ru
Поступила в редакцию 25 февраля 2019 г.
После доработки 18 апреля 2019 г.
Принята к публикации 22 апреля 2019 г.
Предложен способ получения ряда N-(4-R1-5-R2-пиримидин-2-ил)-N-(4-R3-5-R4-тиазол-2-ил)-аминов и N-
(4-R-5-R’-пиримидин-2-ил)-тиомочевин реакцией этоксиметиленпроизводных малоновой и
ацетоуксусной кислот с тиазол-2-илгуанидинами и амидинотиомочевиной соответственно. Первичный
биоскрининг показал высокое ингибирующее действие в отношении различных протеинкиназ
полученных таким образом этилового эфира 4-метил-2-тиоуреидопиримидин-5-карбоновой кислоты и
этилового эфира 6-оксо-2-тиоуреидо-1,6-дигидропиримидин-5-карбоновой кислоты.
Ключевые слова: пиримидины, тиазолы, ингибиторы пртоеинкиназ, тирозинкиназа EGFR,
амидинотиомочевина.
DOI: 10.1134/S051474921909009X
Одним из важнейших направлений синтеза
лить реакции гуанидинов с метиленактивными
новых органических структур на сегодняшний
производными дикарбонильных соединений. В
день является разработка средств для лечения
большинстве случаев данные реакции протекают
онкологических заболеваний. Основные успехи в
по одному принципиальному механизму: на первой
этой области в последние годы связаны с
стадии происходит замещение этоксильной группы
созданием таргетных ингибиторов киназ
-
на аминогруппу гуанидина. На второй стадии
препаратов направленного патогенетического
происходит циклизация с участием одной из
действия. При этом наблюдается тенденция к
карбонильных групп и иминогруппы субстрата
использованию низкомолекулярных органических
(схема 1). В результате получают пиримидины,
соединений в качестве ингибиторов киназ.
содержащие различные заместители в положениях
4, 5, 6 [3-6].
Так, в структуру применяемых на настоящий
момент ингибиторов тирозинкиназы EGFR
-
Помимо алкоксиметиленпроизводных
1,3-
эрлотиниба и гефитиниба
- входит фрагмент
дикарбонильных соединений высоким синтети-
аминопиримидина
[1,
2], в связи с этим
ческим потенциалом обладают их арилиденпроиз-
представляет интерес поиск новых ингибиторов
водные. Изучены особенности их взаимодействия с
данной киназы среди производных этой гетеро-
ацетамидином, бензамидином, гуанидином и 1,1-
циклической системы. В данной работе представ-
диметилгуанидином [7-9] с образованием 4,5,6-
лен синтез соединений ряда пиримидин-2-илтио-
тризамещенных пиримидинов. При этом в разных
мочевин, а также результаты их первичного
источниках упоминаются различные условия
биологического скрининга в отношении ряда
проведения такого взаимодействия, вплоть до
тирозинкиназ.
достаточно мягких, таких как перемешивание при
комнатной температуре (схема 2).
Среди всевозможных способов циклизации
производных гуанидина для построения пирими-
Для производных тиомочевины изучены анало-
динового цикла в отдельную группу стоит выде-
гичные превращения с участием этоксиметилен-
1406
СИНТЕЗ ЗАМЕЩЕННЫХ АМИНОПИРИМИДИНОВ
1407
Схема 1.
C2H5O
C2H5O
O O
NH
O
R1
H
O
R2
N
+
HN
OC2H5
R1
NH2
O
HN
OC2H5
O
C2H5
R2
R1
N R2
OC
2H5
O
1a, b
2a, b
3*a_c
4a_c
R1 = CH3 (a), C2H5 (b). R2 = CH3 (a), H (b).
R1 = CH3, R2 = H (a);
R1 = R2 = CH3 (b);
R1 = C2H5, R2 = H (c).
производных малоновой кислоты. Так авторами
уксусного эфира
13, малонодинитрила
20 для
обзорной статьи [10] на примере тиомочевины и ее
получения пиримидинсодержащих производных
замещенных описаны различные реакции с
тиомочевины и изучения их ингибирующего
метиленактивными соединениями, в том числе и
действия в отношении ряда тирозинкиназ.
этоксиметиленпроизводными малоновой кислоты.
Ожидаемо, взаимодействие протекало с
В ходе подобных превращений образуются пири-
участием амидинового фрагмента молекулы амидино-
мидинтионы с различными заместителями в
тиомочевины. Вероятно, как и в случае некоторых
положениях 4, 5, 6 гетероцикла. При этом указы-
гуанидинов [11] реализуется двухстадийный процесс,
вается, что атом серы не участвует в превра-
где первая стадия
- замещение этоксильной
щениях, реакция протекает по амидиновому
группы под действием нуклеофильной амино-
фрагменту (схема 3).
группы гуанидинового фрагмента амидинотиомо-
Целью настоящего исследования было изучение
чевины, вторая
- внутримолекулярное нуклео-
взаимодействия амидинотиомочевины 19 с этокси-
фильное присоединение аминогруппы к электро-
метиленпроизводными диэтилмалоната 11, ацето-
фильному атому углерода интермедиата (схема 4).
Схема 2.
OH
O
O
N
OR2
N
OR2
R1
N
p-TSA, reflux
R1
N
O
O
H
H
NH
R2O
CH3
8
9a_e
+
R1
NH2
O
O
N
5a_d
6a_b
N
OR2
R1
N
R1 = CH3 (a), C6H5 (b), NH2 (c), N(CH3)2
(d);
R1
N
H
R2 = Et (a), t-Bu (b).
7
9'a_e
R1 = CH3, R2 = Et (a);
R1 = CH3, R2 = t-Bu (b);
R1 = C6H5, R2 = Et (c);
R1 = NH2, R2 = Et (d);
R1 = N(CH3)2, R2 = Et (e).
ЖУРНАЛ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ том 55 № 9 2019
1408
СТОЛПОВСКАЯ и др.
Схема 3.
S
N
O
11
X = Y = COOC2H
HN
OC2H5
5
R1
O
15
R1 = H, Me, Et.
R
12
S
N O
X = COOC2H5, Y = COR2
HN
R2
S
R1
O
C
C2H5O
X
16
H2N
NH
+
R1 = H, R2 = Me, Ph.
R
R1
Y
10
R
13
S
N NH
X = Y = CN
R = H, alkyl, cycloalkyl, aryl.
HN
N
R1
17
R1 = H, Me, Et.
R
R
14
S
N
O
S
N
NH
X = CN, Y = COOC2H5
+
HN
HN
OC2H5
N
R1
O
R1
18
18'
R1 = H, Me, Et.
Подобные реакции были изучены и для тиазол-
щенных тиомочевин
10 и этоксиметиленпроиз-
2-илгуанидинов 25, 29, полученных по известным
водных β-кетоэфиров 12 в спирте в присутствии
методикам [12]. Установлено, что при кипячении
алкоголята натрия. Заявлено, что в данных усло-
реагентов в о-ксилоле в течение 5-6 ч происходит
виях циклизация на второй стадии протекает с
циклизация по амидиновому фрагменту тиазол-2-
участием карбэтоксильного фрагмента с образо-
илгуанидинов. В результате образуются различные
ванием пиримидинонов 16. Нами установлено, что
(тиазол-2-ил)-(пиримидин-2-ил)-амины, содержа-
при кипячении амидинтиомочевины 19 и этокси-
щие карбэтоксильные фрагменты в положении 5
метиленацетоуксусного эфира 20 в смеси диоксан-
пиримидинового цикла 26-27, 30-31 (схемы 5, 6).
ДМФА, в реакции участвует карбонильная группа,
что подтверждается наличием в спектрах ЯМР 1H
Стоит заметить, что при циклизации исходных
полученных соединений
21,
26 и
31 сигналов
соединений с этоксиметиленацетоуксусным эфиром
протонов карбэтоксигруппы, а также согласуется с
20 нуклеофильное присоединение на второй стадии
литературными данными [11].
может протекать с участием атома углерода как
кетонного, так и сложноэфирного фрагментов. Так,
Этиловый эфир
4-метил-2-(4-фенилтиазол-2-
авторами
[10] описано взаимодействие заме-
иламино)пиримидин-5-карбоновой кислоты 26 и
ЖУРНАЛ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ том 55 № 9 2019
СИНТЕЗ ЗАМЕЩЕННЫХ АМИНОПИРИМИДИНОВ
1409
Схема 4.
O O
O
OC2H5
OC2H5
S
N
OC2H5
20
C
H2N
N
N
H
O O
21
C2H5O
OC2H5
O
O
S
NH
OC2H5
diox, DMF, reflux
11
C
S
HN
OC2H5
H2N
N
NH2
H
C
H2N
N
N
H
19
22
N
N
NH2
N
OC2H5
S
N
13
C
H2N
N
N
H
23
Схема 5.
O
O
OC2H
O
5
C2H5O
S
N
OC2H5
20
N
N N
xylene
HN
H
O
diox, 7 h,
5_6 h,
S
reflux
NH2
reflux
26
O O
19
+
NH
Br
N
C2H5O
OC2H5
O
O
C2H5O
24
25
11
S HN
OC2H5
N
N N
H
27
Схема 6.
O
O
OC2H5
O
O
C2H5O
C2H5O
20
S
N
OC2H5
xylene
N
N N
O
H
OC2H5
5_6 h,
diox, 7 h,
HN
reflux
reflux
O
C2H5O
30
19
+
S
NH2
Cl
O O
NH
O
O
O
O
N
C2H5O
OC2H5
C2H5O
C2H5O
28
29
S HN
OC2H5
11
N
N N
H
31
ЖУРНАЛ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ том 55 № 9 2019
1410
СТОЛПОВСКАЯ и др.
Схема 7.
O
O
S
N
OC2H5
S
N
OC2H5
O
C
N N N
H2N
N
N
H
H
Br
21
26
24
O O
O O
diox, 5_6 h,
reflux
S
HN
OC2H5
S HN
OC2H5
C
H2N
N
N
N N
N
H
H
22
27
этиловый эфир 6-оксо-2-(4-фенилтиазол-2-илами-
Тиомочевины 21-22 и синтезированные на их
но)-1,6-дигидропиримидин-5-карбоновой кислоты
основе аминотиазолильные производные
30,
31
27 были получены в том числе встречным
были исследованы на ингибирование киназ анаплас-
синтезом реакцией тиомочевин 21, 22 с фенацил-
тической лимфомы (ALK, NPM1-ALK), мутантных
бромидом 24. Реакцию проводили при кипячении
форм эпидермального фактора роста (EGFR
исходных соединений в диоксане в течение 5-6 ч
[L858R], EGFR T790M/L858R), сигнальных транс-
(схема 7). Спектры ЯМР 1H полученных соеди-
дьюсеров и активаторов белков транскрипции
нений содержат наборы сигналов, соответствую-
(Янус-киназы JAK2, JAK3). Выбор данной панели
щие ранее полученным соединениям, что допол-
тирозиновых протеинкиназ был обусловлен нали-
нительно подтверждает участие именно амиди-
чием в структуре многих их ингибиторов аминопи-
нового фрагмента молекулы амидинотиомочевины в
римидинового фрагмента
[15-17]. Иммунофер-
реакциях с этоксиметиленпроизводными 11, 13, 20.
ментный анализ (ELISA) проводился в два этапа:
Степень ингибирующей активности соединений 21, 22, 31 в отношении тирозинкиназ.
Тирозиновая протеинкиназа, степень ингибирования, %
Структура
NPM1-ALK
ALK
EGFR [L858R] [T790]
EGFR [L858R]
O
S
N
OC2H5
35
70
62
89
C
H2N
N
N
H
21
O O
S
HN
OC2H5
36
70
76
86
C
H2N
N
N
H
22
O
O
O
C2H5O
S HN
OC2H5
-
-
11
10
N N
N
H
31
ЖУРНАЛ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ том 55 № 9 2019
СИНТЕЗ ЗАМЕЩЕННЫХ АМИНОПИРИМИДИНОВ
1411
предварительный скрининг в одном повторе и пере-
Амидинотиомочевина
(19) является коммер-
проверка его результатов в двух повторах (если инги-
ческим препаратом, доступным в компании
бирование в предварительном скрининге составляло
«Alinda Chemical».
более 50%) с определением концентрации полуинги-
2-Хлорацетоуксусный эфир (28) является ком-
бирования IC50 в двух повторах (см. таблицу).
мерческим препаратом, доступным в компании
В отношении выбранной панели протеинкиназ
«Sigma Aldrich».
ингибирующая активность соединения 31 отсутст-
Этоксиметиленпроизводные малоновой и
вовала или оказалась незначительной. Наибольшее
ацетоуксусных кислот
20,
11,
13,
30 были
ингибирующее действие было отмечено для
получены по известной методике [14].
тиомочевины
21 против тирозинкиназы EGFR
[L858R] (IC50 1.52 мкМ).
Реакцию по определению киназной активности
проводили в полипропиленовых планшетах (Costar,
Таким образом, впервые обнаружено ингиби-
3363) в реакционном буфере (20 мМ HEPES, pH
рующее действие соединений ряда 4,5-R,R’-пири-
7.5, 15 мМ MgCl2, 2 мМ DTT, 0.2 мМ Na3VO4,
мидин-2-илтиомочевин в отношении различных
0.005% Triton Х-100) в течение 60 мин при 30°С и
протеинкиназ. В дальнейшем планируется опти-
интенсивном перемешивании. Конечная концент-
мизация структур полученных производных пири-
рация компонентов реакции: 0.05 мкг/мл соот-
мидина для расширения числа веществ, перс-
ветствующей киназы, 5 нМ биотинилированный
пективных для использования в качестве
субстрат Histon Н3 (1-21) (Anaspec, 61702), 150 мкМ
ингибиторов протеинкиназ, а также для синтеза
ATP (Sigma, А6419),
10 мкМ анализируемое
гибридных молекул с различной физиологической
соединение, 5% ДМСО. Ферментативную реакцию
активностью, в том числе антикоагулянтной.
останавливали буфером, содержащим
20 мМ
HEPES (Sigma, Н4034), pH 7.5 и 150 мМ EDTA
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
(Sigma, Е5513).
Спектры ЯМР 1Н и 13С зарегистрированы на
Далее для детекции фосфорилированного
приборе Bruker DRX500 (рабочие частоты 500 и
субстрата реакционную смесь переносили в
125 МГц соответственно) в ДМСО-d6 при 30°С. В
заранее подготовленные планшеты (Nunc, 468667),
качестве внутреннего стандарта использованы сиг-
покрытые нейтравидином (1 нг/лунку; Pierce, 31000)
налы протонов ТМС. Анализ методом ВЭЖХ-МС
и обработанные бычьим сывороточным альбумином
проведен на жидкостном хроматографе Agilent
(BSA) для блокирования мест неспецифического
Infinity
1260 с масс-селективным детектором
связывания. Инкубацию проводили в течение часа
Agilent 6230 TOF. Условия разделения: подвижная
при комнатной температуре. После трехкратной
фаза 0.1% муравьиная кислота в MeCN (элюент
отмывки планшетов фосфатно-солевым буфером
А)/0.1% муравьиная кислота в воде (элюент В),
(PBS) с Tween-20 последовательно проводили
градиент 0-100%: А, 3.5 мин, 50%; А, 1.5 мин, 50-
инкубацию с anti-phospho-Histon Н3 антителами
100%; В,
3.5 мин,
50%; В,
1.5 мин,
50-0%;
(0.3 нг/мкл; Millipore, 04-746) и со специфическими
поток 0.4 мл/мин, колонка - Poroshell 120 EC-C18
антителами, конъюгированными ферментом-
(4.6×50 мм, 2.7 мкм), термостат 28°С, ионизация
меткой (пероксидаза) Anti-rabbit IgG, HRP-linked
электрораспылением (капилляр -3.5 кВ; фрагмен-
Antibody (титр 1/5000; Cell Signaling, 7074). После
тор +191 В; OctRF +66 В - положительная поляр-
завершения каждой стадии инкубации (60 минут
ность). ИК спектры регистрировали при помощи
при комнатной температуре и постоянном переме-
ИК фурье-спектрометра «Vertex-70». Отнесение сиг-
шивании) платы трижды отмывали от несвязав-
налов в спектрах осуществлено на основе справоч-
шихся молекул антител раствором PBS с Tween-20
ных данных. Температуры плавления определены
и добавляли по 100 мкл субстрата ТМБ (Sigma,
на приборе Stuart SMP30. Контроль за индивидуа-
Т8768), приготовленного по инструкции произ-
льностью реагентов и полученных веществ, а также
водителя.
за ходом протекания реакции осуществляли мето-
дом ТСХ на пластинках Silufol UV-254. В качестве
Перед измерением оптической плотности
элюента использовали хлороформ, метанол и их
проводили остановку реакции с помощью 0.5 М
смеси в различных соотношенях; проявление хрома-
H2SO4. Оптическую плотность раствора опреде-
тограмм осуществлялось в УФ-свете и парах иода.
ляли при λ 450 нм с использованием планшетного
ЖУРНАЛ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ том 55 № 9 2019
1412
СТОЛПОВСКАЯ и др.
спектрофотометра (TECAN Safire). Полученные
малонодинитрила 13 в смеси 10 мл диоксана и 2 мл
данные обрабатывали и импортировали в
диметилформамида в течение 5-6 ч. Выливали
программу HTSCalc.
реакционную массу в 100 мл воды, выпавший
осадок отфильтровали, к осадку добавляли ацетон,
Этиловый эфир 4-метил-2-тиоуреидопирими-
кипятили и отфильтровывали горячим. Получен-
дин-5-карбоновой кислоты
(21). Смесь 0.35 г
ный осадок высушивали. Выход 0.34 г (58%),
(3 ммоль) амидинотиомочевины 19 и 0.59 г (3 ммоль)
желтые кристаллы, т.пл. 290-292°C. ИК спектр, ν,
этоксиметиленацетоуксусного эфира 20 кипятили в
см-1: 2229 (CN), 1573 (пиримид.), 1521 (NH2), 1280
смеси 10 мл диоксана и 2 мл диметилформамида в
(NHCSN), 1014 (пиримид.), 792 (пиримид.), 605
течение 5-6 ч. Выливали реакционную массу в
(NHCSNH). Cпектр ЯМР 1Н, δ, м.д.: 7.95 уш.с (2H,
100 мл воды, выпавший осадок отфильтровали, к
NH2), 8.49 c (1H, CH), 9.25 уш.с (1H, NH), 10.20
осадку добавляли ацетон, кипятили и отфильтро-
уш.с (1Н, NH), 12.85 уш.с (1H, NH). Спектр ЯМР
вывали горячим. Полученный осадок высушивали.
13С δ, м.д.: 115.50 (CN), 155.40 (Cпиримид), 157.74
Выход 0.53 г (74%), белые кристаллы, т.пл. 232-
(Cпиримид), 161.98 (Cпиримид), 162.50 (Cпиримид), 180.70
234°C. ИК спектр, ν, см-1: 1716 (C=O),
1568
(NH2CS). Найдено 195.0451 [M + H]+. C6H6N6S.
(пиримид.), 1519 (NH2), 1280 (NCSN), 1228 (COEt),
Вычислено M + H 195.0448.
1012 (пиримид.), 798 (пиримид.), 576 (NCSN). Спектр
ЯМР 1Н, δ, м.д.: 1.33 т (3Н, OCH2СН3, J 7.1 Гц),
4-Фенилтиазол-2-илгуанидин (25). Получен по
2.69 с (3Н, СН3), 4.30 к (2Н, OCH2CH3, J 7.1 Гц),
известной методике [12]. Выход 88%, т.пл. 225-
8.95 с (1Н, CH), 9.32 уш.с (1Н, NH), 10.23 уш.с (1Н,
227°C. Cпектр ЯМР 1Н, δ, м.д.: 6.90 уш.с (4Н,
NH), 10.88 уш.с (1Н, NH). Спектр ЯМР 13С, δ, м.д.:
4NH), 7.15 с (1Н, СНтизольн), 7.27 т (1Н, СНаром, J
13.93 (OCH2CH3), 24.02 (CH3), 60.95 (OCH2CH3),
7.3 Гц), 7.38 т (2Н, 2СНаром, J 7.7 Гц), 7.83 д (2Н,
116.99 (Cпиримид), 157.66 (Cпиримид), 159.97 (Cпиримид),
2СНаром, J 7.2 Гц). Найдено 219.0703 [M + H]+.
163.82 (Cпиримид),
169.79 (COOCH2CH3),
180.82
C10H10N4S. Вычислено M + H 219.0699.
(NH2CS). Найдено 241.0759 [M + H]+. C9H12N4O2S.
Этиловый эфир 4-метил-2-(4-фенилтиазол-2-
Вычислено [M + H] 241.0754.
иламино)-пиримидин-5-карбоновой кислоты
Этиловый эфир
6-оксо-2-тиоуреидо-1,6-
(26). Смесь 0.65 г (3 ммоль) 4-фенилтиазол-2-
дигидропиримидин-5-карбоновой кислоты (22).
илгуанидина 25 и 0.56 г (1 ммоль) этоксиметилен-
Смесь 0.35 г (3 ммоль) амидинотиомочевины 19 и
ацетоуксусного эфира 20 кипятили в 15 мл ксилола
0.65 г (3 ммоль) этоксиметилендиэтилмалоната 11
в течение 5-6 ч. Образовавшийся осадок отфильт-
кипятили в смеси 10 мл диоксана и 2 мл диметил-
ровывали, перекристаллизовывали из толуола.
формамида в течение 5-6 ч. Выливали реакцион-
Выход 0.76 г (75%), белые кристаллы, т.пл. 266-
ную массу в
100 мл воды, выпавший осадок
267°C. ИК спектр, ν, см-1: 1716 (C=O), 1591 (аром.),
отфильтровали, к осадку добавляли ацетон, кипя-
1568 (пиримид.), 1519 (NH2), 1440 (аром.), 1280
тили и отфильтровывали горячим. Полученный
(NCSN),
1228 (COEt),
1012 (пиримид.),
798
осадок высушивали. Выход 0.46 г (64%), белые
(пиримид.), 576 (NCSN). Cпектр ЯМР 1Н, δ, м.д.:
кристаллы, т.пл. 254-256°C. ИК спектр, ν, см-1:
1.34 т (3Н, ОСН2СН3, J 6.9 Гц), 2.75 с (3Н, СН3),
1699 (C=O), 1633 (пиримид.), 1498 (пиримид.),
4.32 м (2Н, ОСН2СН3), 7.32 т (1Н, СНаром, J 7.1 Гц),
1244 (COEt), 1186 (NHCSNH), 1037 (пиримид.),
7.43 т (2Н, 2СНаром, J 7.5 Гц), 7.60 с (1Н, СНтиаз),
808 (пиримид.). Cпектр ЯМР 1Н, δ, м.д.: 1.25 т (3H,
7.93 д (2Н, 2СНаром, J 7.6 Гц), 8.97 с (1Н, СНпиримид),
OCH2CH3, J 7.1 Гц), 4.20 к (2H, OCH2CH3, J 7.1 Гц),
12.20 с (1Н, NH). Спектр ЯМР 13С, δ, м.д.: 14.55
8.45 c (1H, CH), 9.55 уш.с (1H, NH), 9.90 уш.с (1H,
(OCH2CH3), 24.21 (CH3), 61.18 (OCH2CH3), 108.61
NH), 11.80 уш.с (1H, NH), 12.80 уш.с (1H, NH).
(Cпиримид), 116.23 (Cтиазол), 126.36 (С2, Саром), 128.10
Спектр ЯМР13С, δ, м.д.: 14.05 (OCH2CH3), 60.07
(С
4аром),
129.05 (С3, С
5аром),
135.26 (С
1аром),
150.07
(OCH2CH3),
109.54 (Cпиримид),
152.93 (Cпиримид),
(C
4тиазол),
158.17 (Cпиримид), 159.53 (Cпиримид), 160.65
155.36 (C6пиримид),
158.77 (C2пиримид),
162.94
(Cпиримид),
164.91 (C
2тиазол),
170.05 (COOCH2CH3).
(COOCH2CH3), 180.09 (NH2CS). Найдено 243.0552
Найдено 341.1071 [M + H]+. C17H16N4O2S. Вычис-
[M + H]+. C8H10N4O3S. Вычислено M + H 243.0547.
лено M + H 341.1067.
1-(4-Амино-5-цианопиримидин-2-ил)-тиомо-
Этиловый эфир
6-оксо-2-(4-фенилтиазол-2-
чевина (23). Смесь 0.35 г (1 ммоль) амидинотио-
иламино)-1,6-дигидропиримидин-5-карбоновой
мочевины 19 и 0.37 г (1 ммоль) этоксиметилен-
кислоты (27). Смесь 0.65 г (3 ммоль) 4-фенил-
ЖУРНАЛ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ том 55 № 9 2019
СИНТЕЗ ЗАМЕЩЕННЫХ АМИНОПИРИМИДИНОВ
1413
тиазол-2-илгуанидина 25 и 0.65 г (3 ммоль) этокси-
малоната 11 кипятили в 15 мл ксилола в течение
метилендиэтилмалоната
11 кипятили в
15 мл
5-6 ч. Образовавшийся осадок отфильтровывали,
ксилола в течение 5-6 ч. Образовавшийся осадок
перекристаллизовывали из толуола. Выход 0.63 г
отфильтровывали, перекристаллизовывали из толуола.
(60%), белые кристаллы, т.пл.
292-294°C. ИК
Выход 0.72 г (70%), белые кристаллы, т.пл. > 300°C.
спектр, ν, см-1: 1703 (C=O), 1666 (COOEt), 1523
ИК спектр, ν, см-1: 1689 (C=O), 1654 (COOR), 1633
(пиримид.), 1365 (COOEt), 1263 (COOEt),
1095
(пиримид.), 1566 (аром.), 1517 (пирид.), 1423 (аром.),
(пиримид.), 605 (пиримид.). Cпектр ЯМР 1Н, δ,
1280 (COOEt), 1186 (NHCSNH), 1012 (пиримид.),
м.д.: 1.20-1.30 м (6Н, 2ОСН2СН3), 2.51 с (3Н,
719 (пиримид.). Cпектр ЯМР 1Н, δ, м.д.: 1.27 т (3Н,
СН3тиазол), 4.16-4.29 м (4Н, ОСН2СН3), 8.52 с (1Н,
ОСН2СН3, J 7.1 Гц), 4.22 м (2Н, ОСН2СН3), 7.36 т
СНпиримид), 12.20 уш.с (2Н, 2NH). Найдено 353.0918
(1Н, СНаром, J 7.4 Гц), 7.45 т (2Н, 2СНаром, J 7.7 Гц),
[M + H]+. C14H16N4O5S. Вычислено M + H 353.0915.
7.61 с (1Н, СНтиаз), 7.89 д (2Н, 2СНаром, J 7.7 Гц),
8.50 с
(1Н, СHпиримид),
12.00 уш.с
(2Н,
2NH).
ФОНДОВАЯ ПОДДЕРЖКА
Найдено 343.0854 [M + H]+. C16H14N4O3S. Вычисле-
но M + H 343.0860.
Исследование выполнено при финансовой
поддержке Российского научного фонда (проект №
5-Карбэтокси-4-метилтиазол-2-илгуанидин
18-74-10097).
(29). Получен по известной методике [12]. Выход
60%, т.пл. 271-273°C. Cпектр ЯМР 1Н, δ, м.д.: 1.22
КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ
т (3Н, ОСН2СН3, J 7.1 Гц), 2.46 c (3Н, СН3), 4.17 м
(2Н, ОСН2СН3), 7.20 уш.с (4Н, 4NH). Найдено
Авторы заявляют об отсутствии конфликта
229.0758 [M + H]+. C8H12N4O2S. Вычислено M + H
интересов.
229.0754.
Этиловый эфир
2-(5-этоксикарбонил-4-
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
метилтиазол-2-иламино)-4-метилпиримидин-5-
карбоновой кислоты (30). Смесь 0.68 г (3 ммоль)
1. Dowell J., Minna J. D., Kirkpatrick P. Nat. Rev. Drug
5-карбэтокси-4-метилтиазол-2-илгуанидина
29 и
Discov. 2005, 4, 13. doi 10.1038/nrd1612
0.56 г
(3 ммоль) этоксиметиленацетоуксусного
2. Culy C.R., Faulds D. Drugs. 2002, 62, 2237. doi
эфира 20 кипятили в 15 мл ксилола в течение 5-6 ч.
10.2165/00003495-200262150-00008
Образовавшийся осадок отфильтровывали,
3. Lorente A., Vaquerizo L., Martín A., Gómez-Sal P.
перекристаллизовывали из толуола. Выход 0.68 г.
Heterocycles. 1995, 1, 71. doi 10.3987/com-94-6877
(65%), белые кристаллы, т.пл.
233-235°C. ИК
4. Atwal K.S., O'reilly B.C., Gougoutas J.Z., Malley M.F.
спектр, ν, см-1: 1704 (C=O), 1568 (пиримид.), 1519
Heterocycles. 1987, 26, 1189. doi 10.3987/r-1987-05-
(NH2), 1440 (аром.), 1280 (NCSN), 1228 (COEt),
1189
1012 (пиримид.),
798 (пиримид.),
576 (NCSN).
5. El-Kerdawy M.M., Eisa H.M., El-Emam A.A.,
Cпектр ЯМР
1Н, δ, м.д.: 1.27-1.36 м
(6Н,
2
Massoud M.A., Nasr M.N. Arch. Pharm. Res. 1990, 13,
ОСН2СН3),
2.52 с
(3Н, СН3тиазол),
2.73 с
(3Н,
142. doi 10.1007/bf02857791
СН3пирим), 4.23-4.35 м (4Н, 2 ОСН2СН3), 9.00 с (1Н,
6. Mitter P.C., Bardhan J.C. J. Chem. Soc., Trans. 1923,
СНпирим), 12.40 уш.с (1Н, NH). Спектр ЯМР 13С, δ,
123, 2179. doi 10.1039/ct9232302179
м.д.: 14.50 (OCH2CH3), 14.73 (OCH2CH3),
17.48
7. Cho H., Shima K., Hayashimatsu M., Ohnaka Y.,
(CH3), 60.73 (OCH2CH3), 61.33 (OCH2CH3), 115.12
Mizuno A., Takeuchi Y. J. Org. Chem. 1985, 50, 4227.
(C
116.94 (Cпиримид), 156.88 (Стиазол),
157.73
doi 10.1021/jo00222a009
5тиазол),
(Спиримид), 160.55 (С
4тиазол),
161.39 (Спиримид), 162.80
8. Weis A.L., Frolow F. J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1.
(Спиримид), 164.74 (COOCH2CH3), 170.18 (COOCH2·
1986, 83. doi:10.1039/p19860000083
CH3). Найдено 351.1117 [M + H]+. C15H18N4O4S.
9. Прядеина М.В., Бургарт Ю.В., Кодесс М.И.,
Салоутин В.И., Чупахин О.Н. Изв. АН. Сер. Хим.
Вычислено M + H 351.1122.
2004,
53,
1210.
[Pryadeina, M.V., Burgart, Y.V.,
Этиловый эфир
2-(5-карбэтокси-4-метил-
Kodess, M.I., Saloutin, V.I., Chupakhin, O.N. Russ.
тиазол-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропирими-
Chem. Bull.
2004,
53,
1261.] doi
10.1023/
дин-5-карбоновой кислоты (31). Смесь 0.68 г
b:rucb.0000042284.03940.41
(3 ммоль) 5-карбэтокси-4-метилтиазол-2-илгуани-
10. 10.Abdel Megid M., Elmahdy K. M., Rashad A.E.
дина 29 и 0.65 г (3 ммоль) этоксиметилендиэтил-
Glob. J. Sci. Fron. Res. Chem. 2013, 13, 7.
ЖУРНАЛ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ том 55 № 9 2019
1414
СТОЛПОВСКАЯ и др.
11. Крыльский Д.В., Шихалиев, Х.С., Ковыгин, Ю.А.,
15. Hatcher J.M., Gray N.S. Top. Med. Chem. 2017, 28,
Потапов, А.Ю. Гетероциклические системы на
435. doi 10.1007/7355_2017_18
основе производных гуанидина и его структурных
16. Chen L., Fu W., Zheng L., Liu Zh., Liang G. J. Med. Chem.
аналогов. Воронеж: Воронеж. Гос. Универ., 2006, 71.
2018, 61, 4290. doi 10.1021/acs.jmedchem.7b01310
12. Beyer H., Hantschel H. Chem. Ber. 1962, 95, 893. doi
17. Ott G.R., Cheng M., Learn K.S., Wagner J.,
10.1002/cber.19620950413
Gingrich D.E., Lisko J.G., Curry M., Mesaros E.F.,
13. Han C., Wan L., Ji, H., Ding K., Huang Z., Lai Y.,
Ghose A.K., Quail M.R., Wan W., Lu L.,
Peng S., Zhang Y. Eur. J. Med. Chem. 2014, 77, 75. doi
Dobrzanski P., Albom M.S., Angeles T.S., Wells-
10.1016/j.ejmech.2014.02.032
Knecht K., Huang Z., Aimone L.D., Bruckheimer E.,
14. Межерицкий В.В., Олехнович Е.П., Лукьянов С.М.,
Anderson N., Friedman J., Fernandez S.V., Ator M.A.,
Дорофенко Г.Н. Ортоэфиры в органическом
Ruggeri B.A., Dorsey B.D. J. Med. Chem. 2016, 59,
синтезе. Ростов: Изд. Ростов. Универ., 1976, 176.
7478. doi 10.1021/acs.jmedchem.6b00487
Synthesis of Substituted Aminopyrimidines - New Perspective
Thyrosin Kinase Inhibitors
N. V. Stolpovskaya*, А. А. Kruzhilin, А. V. Zorina, K. S. Shikhaliev, I. V. Ledeneva,
Y. A. Kosheleva, and D. Yu. Vandyshev
Voronezh State University, 394018, Russia, Voronezh, Universitetskaya pl. 1
*e-mail: stolpovskaya@chem.vsu.ru
Received February 25, 2019; revised April 18, 2019; accepted April 22, 2019
A method has been proposed for obtaining a number of N-(4-R1-5-R2-pyrimidin-2-yl)-N-(4-R3-5-R4-thiazol-2-
yl)-amines and N-(4-R-5-R'-pyrimidin-2-yl)thioureas by the reaction of ethoxymethylene derivatives of malonic
and acetoacetic acids with thiazol-2-ylguanidines and amidinothiourea respectively. Primary bioscreening
showed a high inhibitory effect on various protein kinases in the obtained ethyl
4-methyl-2-
thioureidopyrimidine-5-carboxylate and ethyl 6-oxo-2-thioureido-1,6-dihydropyrimidine-5-carboxylate.
Keywords: pyrimidines, thiazoles, proteinkinase inhibitors, EGFR tyrosine kinase, amidinothiourea
ЖУРНАЛ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ том 55 № 9 2019
