Российская сельскохозяйственная наука, 2020, № 4

УДК 615.371

DOI:10.31857/S250026272004016X

РЕЗУЛЬТАТЫ РАЗРАБОТКИ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ

САЛЬМОНЕЛЛЕЗНОГО АБОРТА ЛОШАДЕЙ

М.П. Неустроев, доктор ветеринарных наук,

С.Г. Петрова, кандидат ветеринарных наук

Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства имени М.Г. Сафронова,

677001, Якутск, ул. Бестужева-Марлинского,23/1

E-mail: mneyc@mail.ru

В целях специфической профилактики сальмонеллезного аборта лошадей разработана инактивированная вакцина из

штамма Sal. abortus equi БН-12 c фугатом штамма Bac. Subtilis ТНП-3 в качестве иммуномодулятора. Доклинические

испытания проведены на лабораторных белых мышах, клинические - на лошадях. Установлено отсутствие токсично-

сти препарата. Иммуногенность на белых мышах составила 90%, на кобылах - 100%. Производственные испытания

вакцины показали, что после иммунизации деловой выход жеребят повышается на 13,8%. Экономическая эффектив-

ность использования вакцины c фугатом штамма Bac. Subtilis ТНП-3 на 1 руб. затрат составила 14,1 руб., что выше в

1,8 раза по сравнению с применением вакцины с полирибонатом. Установлено, что введение инактивированной вакци-

ны со штаммом бактерий Bac. subtilis ТНП-3 является эффективным методом профилактики инфекционных абортов.

По результатам исследований разработана научно-техническая документация и представлена для рассмотрения в

Россельхознадзор. Утверждена Инструкция по применению вакцины и выдано Регистрационное удостоверение (71-1-

10.19-4495№ПВР-1-1.6/01631, от 10 июня 2019 г.).

HORSE SALMONELLA ABORTION VACCINE

DEVELOPMENT RESULTS

Neustroev М.P., Petrova S.G.

Yakut Scientific Research Institute of Agriculture named after Safronov M.G.,

677001, Yakutsk, ul. Bestuzheva-Marlinskovo, 23/1

E-mail: mneyc@mail.ru

In order to specifically prevent salmonella abortion in horses, an inactivated vaccine from Sal. abortus equi BN-12 strain has been

developed. with a fugate of strain Bac. Subtilis TNP-3 as an immunomodulator. Preclinical trials were performed on white mice

and clinical trials - on horses. The absence of toxicity in white mice and mares was established. Immunogenicity on laboratory

white mice was 90%, and on mares 100%. In the controlled experience after immunization, the business output increases by

13.8%. Production tests confirmed the results of laboratory and scientific experiments. Economic efficiency per 1 ruble of expenses

amounted to 14.1 ruble or is 1.8 times higher compared to the vaccine with polyribonate. According to the results of preclinical trials

on white mice and production tests, it was found that the introduction of an inactivated vaccine against salmonella abortion with

a strain of bacteria Bac. subtilis TNP-3 is an effective method of preventing infectious abortion. Based on the research, scientific

and technical documentation was developed and submitted for consideration to the Rosselkhoznadzor. At present, the Instructions

for the use of the vaccine have been approved and a Registration Certificate (71-1-10.19-4495№PVR-1-1.6/01631, dated June 10,

2019) has been issued.

Ключевые слова: сальмонеллезный аборт, вакцина,

Key words: salmonella abortion, vaccine, toxicity,

токсичность, иммуногенность

immunogenicity

Сальмонеллезный аборт лошадей преимуществен-

В табунном коневодстве России применяется инак-

но распространен в азиатских и африканских странах,

тивированная вакцина против сальмонеллезного аборта

единично выявляется в странах Европы, США и Арген-

лошадей, разработанная Якутским НИИСХ совместно

тине [1-4]. Высокую смертность жеребят от кишечной

с отделом вирусологии ВИЭВ [15]. Однако ее высокая

инфекции, вызванной Sal. abortus equi, отмечали в Ита-

цена, обусловленная иммуномодулятором полирибонат,

лии [5]. Особой тяжестью отличаются вирусно-бакте-

сдерживает широкое использование вакцины. Более

риальные аборты, вызванные вирусом ринопневмонии

того, истек срок регистрации полирибоната. Необходи-

и возбудителем сальмонеллезного аборта кобыл [6].

мость разработки средств специфической профилакти-

Смешанные инфекции особенно тяжело протекают у

ки сальмонеллезного аборта лошадей возрастает в пе-

молодняка лошадей, при которых летальность может

риод распространения новых вирусных болезней, в том

достигать до 22% [7]. Доказано носительство возбуди-

числе COVID-19. Появилось сообщение о распростра-

теля сальмонеллеза здоровыми животными [8-9].

нении коронавирусной болезни среди лошадей в штате

Наиболее эффективным методом профилактики

Коларадо (США) с клиническими признаками, сходны-

сальмонеллеза лошадей является иммунизация вакци-

ми с сальмонеллезным абортом [16].

нами. Б.А. Матвиенко с соавторами [10] разработана су-

Целью исследований была разработка и испытания

хая живая вакцина из штамма ТРЕ-841 АЗВИ, которая

экологически безвредного и эффективного вакцинного

эффективно применялась в условиях Казахстана. Пред-

препарата для специфической профилактики сальмо-

ложена комплексная иммунизация ринопневмонии и

неллезного аборта лошадей.

сальмонеллезного аборта живыми вакцинами [11-13]. В

Методика. Работа проведена в лаборатории ветери-

настоящее время в Казахстане ТОО «КазНИВИ» произ-

нарной биотехнологии ЯНИИСХ, ООО НПЦ Хоту-Бакт

водит вакцину против сальмонеллезного аборта кобыл

и коневодческих хозяйствах Республики Саха (Якутия).

из аттенуированного штамма В-0147 Sal. abortus equi

Для приготовления вакцины против сальмонеллез-

841 [14].

ного аборта лошадей использовали штамм бактерий

Российская сельскохозяйственная наука, 2020, № 4

Sal. abortus equi БН-12, который депонирован во Все-

шился, шерстный покров оставался гладким, консистен-

российском государственном научно-исследователь-

ция кала не изменялась. К концу опыта прирост массы

ском институте контроля, стандартизации и сертифи-

тела мышей 1 группы составил 2,01 г, 2 группы - 2,6 г,

кации ветеринарных препаратов. В составе вакцины

3 группы - 1,4 г.

применяли культуральную жидкость (КЖ или фугат)

При патологоанатомическом исследовании трупов

штамма бактерий Bac. subtilis ТНП-3, депонированно-

белых мышей опытных и контрольной групп патологи-

го в ВГНКИ ветеринарных препаратов (06.02.2001 г.).

ческих изменений органов и тканей не выявлено, струк-

Изучение токсичности вакцины при однократном

тура органов не нарушена. По результатам гистологи-

внутрижелудочном введении белым беспородным мы-

ческого исследования установлены острый венозный

шам проведены согласно «Санитарным правилам СП

застой в паренхиматозных органах и отек легких. Кар-

3.3.2.561-96» (утв. Постановлением Госсанэпиднадзора

тина изменений характерна для посмертного изменения

РФ от 31.10.96 г., №33). Для опыта были сформирова-

при асфиксии. Изменения в слизистой оболочке желуд-

ны по принципу аналогов три группы мышей массой

ка у опытных мышей характерны для гастрита, возник-

11-18 г. Животным 1 группы вводили культуральную

шего в ответ на введение препаратов. Гистоструктура

жидкость из штамма бактерий Bacillus subtilis ТНП-3; 2

паренхиматозных органов не изменена.

группы - вакцину; 3 группы (контрольной) - дистилли-

Результаты наблюдения иммунизированных кобыл

рованную воду. Препараты вводили в дозе 1 мл внутри-

показали, что на месте введения препарата иногда от-

желудочно, утром натощак. В течение последующих 7

мечалась припухлость тестоватой консистенции, ко-

дней вели клиническое наблюдение, после чего живот-

торая проходила в течение 2-4 суток. За весь период

ных умертвили спирт-эфиром для патологоанатомиче-

наблюдений не выявлено отказа от корма, признаков

ских исследований. Патоморфологические исследова-

угнетенности.

ния проведены по общепринятым методикам.

После заражения вирулентной культурой в 1 группе

Для изучения токсичноcти кобылам (по 4 головы)

иммунизированных белых мышей погибло 2 головы,

вводили вакцину внутримышечно в область шеи в дозе

во 2 - 4, в 3 (контрольной) - 18.

2, 3 и 6 мл. Затем за животными вели клиническое на-

У вакцинированных кобыл 1 и 2 групп после зара-

блюдение в течение 1 месяца.

жения аборты не наблюдались. Невакцинированные

В целях изучения напряженности иммунитета сфор-

кобылы 3 группы после заражения абортировали. От

мировали три группы белых мышей по 20 голов в ка-

абортированных плодов выделен патогенный возбуди-

ждой. 1 группу иммунизировали инактивированной

тель Sal. аbortus equi.

вакциной с культуральной жидкостью бактерий Bac.

Результаты биохимических исследований крови ко-

subtilis в дозе 0,2 мл; 2 группу - инактивированной вак-

был показали, что на 30 и 90 дни после иммунизации

циной с иммуномодулятором полирибонат в дозе 0,2 мл

содержание общего белка и его фракций существенно

подкожно в область спины. Животным 3 (контрольной)

не изменилось. При этом отмечено некоторое повы-

группы препараты не вводили. Через 14 дней после им-

шение альфа-глобулиновой и снижение гамма-глобу-

мунизации мышей заражали подкожно в область спины

линовой фракции белка у кобыл 1 опытной группы. У

суточной культурой патогенного штамма Sal. аbortus

животных 1 и 2 групп на 150 день после вакцинации

equi в дозе 5 LD₅₀. За белыми мышами вели наблюдения

регистрировано повышение содержания общего белка,

в течение 10 дней.

альбуминовой и гамма-глобулиновой фракций. Этот

Для изучения напряженности иммунитета вакцины

период совпадает с максимальным синтезом агглюти-

в ноябре-декабре 2015 г. были сформированы три груп-

низирующих антител.

пы кобыл по 20 голов в каждой коневодческого звена

Результаты производственных испытаний в хозяй-

ОПХ «Покровское». Животных 1 группы обработали

стве «Немюгюнцы» показали, что введение инакти-

инактивированной вакциной с Bac. Subtilis; 2 группы

вированной вакцины против сальмонеллезного абор-

- вакциной с полирибонатом; 3 (контрольной) группы

та со штаммом бактерий Bac. subtilis ТНП-3 является

- не иммунизировали. Препараты ввводили в дозе 2 мл

эффективным методом профилактики инфекционных

внутримышечно в область верхней трети шеи. Через 30

абортов, поскольку ведет к увеличению делового вы-

дней после иммунизации из всех групп отобраны по 3

хода жеребят на 13,8% (табл.). У животных 1 группы

головы жеребых кобыл, которых заражали минимальной

зафиксировано 19 абортов, однако их сальмонеллез-

инфицирующей дозой патогенной культуры Sal. аbortus

ная этиология не установлена. В контрольной группе

equi. За животными вели клиническое наблюдение.

из 11 абортов в 3 пробах выделен возбудитель саль-

В целях испытания инактивированной вакцины в но-

монеллезного аборта лошадей. Производственные ис-

ябре 2016 г. подобрано 219 голов кобыл 4-5-месячной

пытания были продолжены в хозяйствах Таттинского,

жеребости в двух звеньях ОПХ «Покровское». Кобыл

Мегино-Кангаласского улусов и пригороде г. Якутска,

перед опытом дегельментизировали препаратом ивомек.

где иммунизировано 1169 голов жеребых кобыл. Дело-

Животных разделили на три группы. Кобылам 1 группы

вой выход молодняка составил 58,0, 70,9 и 48,4%, что

вводили инактивированную вакцину с полирибонатом;

существенно выше показателей предыдущих лет, коле-

2 группы - вакцину со штаммом бактерий Bac. Subtilis

бавшихся на уровне 34,0-44,0%.

ТНП-3; 3 (контрольной) группы - вакцину не вводили.

По результатам клинических наблюдений, патоло-

Производственные испытания препарата осущест-

гоанатомического вскрытия и гистологических иссле-

вляли в ранее неблагополучных по сальмонеллезному

дований культуральная жидкость из штамма бактерий

аборту лошадей хозяйствах Якутии. Испытания вакци-

Bacillus subtilis ТНП-3 и вакцина против сальмонел-

ны и оформление научно-технической документации

лезного аборта с фугатом не влияют отрицательно на

проводили согласно Федеральному закону от 12.04.2010

общее состояние животных, не обладают аллергизи-

№ 61-ФЗ «Об обращении лекарственных средств» и

рующими свойствами, не вызывают патологических

приказу Минсельхоза РФ от 22 августа 2017 г., № 430.

изменений в органах и тканях, не оказывают токсиче-

Цифровые материалы обработаны биометрически.

ского действия на организм лабораторных и целевых

Результаты и обсуждение. За время опыта общее

животных.

состояние подопытных белых мышей было удовлет-

По результатам доклинических испытаний на бе-

ворительным, двигательная активность и реакция на

лых мышах и производственных испытаний на ло-

внешние раздражители сохранялись, аппетит не нару-

шадях установлено, что введение инактивированной

Российская сельскохозяйственная наука, 2020, № 4

Результаты производственных испытаний инактивированной вакцины

с штаммом Bac. subtilis против сальмонеллезного аборта лошадей

Хозяйство, группа

Вид

Кол-во гол.

Получено

Зафиксировано

Аборты сальмонел-

Деловой выход

вакцины

приплода, гол.

абортов

лезной этиологии

жеребят,%

«Немюгюнцы»,

Вакцина

1 группа

101

74,2

полирибонат

«Немюгюнцы»,

Вакцина

2 группа

83,0

Bac. subtilis

«Немюгюнцы»,

69,2

3 группа

Таттинский улус

Вакцина

370

186

50,2

В т ч:

КХ «Таатта»

Bac. subtilis

234

101

43,2

КХ «Кордугэн»

75,0

КХ «Победа»

100

58,0

Пригород г. Якутска

Вакцина

124

70,9

Bac. subtilis

Мегино-

Вакцина

675

327

48,4

Кангаласский улус

Bac. subtilis

вакцины против сальмонеллезного аборта со штаммом

Литература

бактерий Bac. subtilis ТНП-3 является эффективным ме-

Bustos C.P., Gallardo J., Retamar G., Lanza N.S.,

тодом профилактики инфекционных абортов.

Falzoni E., Caffer M.I., Picos J., Munoz A.J., Perez

При введении вакцины с полирибонатом экономи-

A.,Moras E.V., Mesplet M., Guida N. Salmonella

ческий эффект на 1 руб. затрат составляет 7,8 руб. При

enterica serovar Abortusequi asan emergent pathogen

внедрении способа иммунизации вакциной с фугатом

causing equine abortion in Argentine // J. Equine Vet.

Bac. subtilis ТНП-3 эффект на 1 руб. затрат возрастает в

Sci. - 2016. -№ 39. - S.58-59.

1,8 раза и составляет 14,1 руб.

Llorente L.A., Ivanissevich A., Camina S., Marco L.,

Следует отметить, что в предыдущих исследованиях

Vissani A., Olguin C., Herrera M., Barrandeguy M.

нами установлена нецелесообразность использования

Occurrence of multiple abortions due toSalmonella

живых вакцин при сальмонеллезном аборте и риноп-

enterica serovar Abortusequi infection // J. Equine Vet.

невмонии из-за экстремальных климатических условий

Sci. - 2016. -№39. - S.58.

содержания табунных лошадей в Якутии. Разработан-

Marenzoni M.L. Causes of equine abortion, stillbirth

ная нами вакцина не уступает по эпизоотической эф-

andneonatal death in central Italy // Vet. Rec. - 2012. -

фективности живым вакцинам, предложенным в Казах-

170. - Р. 262.

стане [14]. Таким образом, разработанный нами метод

Rodriguez A. Prevalence of Salmonella in diverseen-

специфической профилактики сальмонеллезного аборта

vironmental farm samples // J. Food Prot. - 2006. - №

лошадей инактивированной вакциной с культуральной

69. - Р. 2576-2580.

жидкостью из штамма Bac. subtilis ТНП-3 является эко-

Grandolfo E., Parisi A., Ricci A., Lorusso E., Rocco de

номически эффективным и его следует рекомендовать

Siena, Trotta A., Buonavoglia D., Martella V., Corrente

для широкого внедрения в табунном коневодстве.

M. High mortality in foals associated with Salmonella

Высокую эффективность инактивированной вак-

enterica subsp. Enterica Abortusequi infection in Italy

цины, по нашему мнению, можно объяснить антиген-

// Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. -

ной активностью вакцинного штамма и иммуномоду-

2018. - Vol. 30(3). - Р. 483-485.

лирующим компонентом - культуральной жидкостью

Юров К.П. Инфекционные болезни лошадей. - М.:

(фугатом) штамма бактерий Bacillus subtilis ТНП-3.

Росагропромиздат, 2000. - С. 126-130.

Возможность применения пробиотиков и других био-

Неустроев М.П., Петрова С.Г. Особенности эпи-

логически активных веществ в качестве иммуномоду-

зоотологии сальмонеллезного аборта лошадей в

ляторов отмечена при иммунизации животных против

Якутии // Сельскохозяйственные науки и агропро-

бруцеллеза [17], сальмонеллеза коров [18], сальмо-

мышленный комплекс на рубеже веков: Сборник

неллеза песцов [19]. Нами доказана возможность ис-

пользования фугата штамма бактерий Bac. subtilis в

материалов ХХ международной научно-практиче-

качестве иммуномодулятора при разработке инакти-

ской конференции. - Новосибирск, 2017. - С.93-97.

вированной вакцины против ринопневмонии лошадей.

Литвинова З.А. Патологоанатомическое проявле-

Штамм бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 может инду-

ние и лечение тромбогеморрагического синдрома

цировать синтез интерферона и стимулировать имму-

при сальмонеллезе у телят // Дальневосточный

нобиологическую реактивность организма, усиливать

агарный вестник. - 2016. - № 2 (38). - С. 56-62.

иммуногенность инактивированных бактериальных и

Swerczek T.W. Identifying the bacterial causes of

вирусных вакцин [16, 20].

abortion inmares // Vet. Med. - 1991. - № 86. - Р.

По результатам исследований разработана науч-

1210-1216.

но-техническая документация и представлена для

10. Матвиенко Б.А., Всеволодов Б.П., Куляшбекова Р.К.

рассмотрения в Россельхознадзор. В настоящее время

Характеристика живой сухой вакцины против па-

утверждена Инструкция по применению вакцины и

ратифозного аборта кобыл из штамма Е-841 //

выдано Регистрационное удостоверение (71-1-10.19-

Вестник сельскохозяйственной науки. - 1973. - №

4495№ПВР-1-1.6/01631, от 10 июня 2019 г.).

4. - С. 107-110.

Российская сельскохозяйственная наука, 2020, № 4

11. Ахметсадыков Н.Н. Комплексная иммунопрофи-

16. Manship A.J., Bliklager A.T., Elfenbein J.R. Disease

лактика ринопневмонии и сальмонеллезного абор-

features of equine coronavirus and enteric salmonellosis

та кобыл живыми вакцинами: Автореф. дис. …

are similar in horses // Journal of Veterinary Medicine.

канд. вет. наук. - Алма-Ата, 1988. - 22 с.

- 2019. - V. 33. 2. - P. 912-917.

12. Ахметсадыков Н.Н., Бияшев К.Б. Биологические и

17. Львова О.В., Ощепков В.Г., Попова Т.Г., Бронников

иммуногенные свойства вакцинных штаммов про-

В.С., Гуськова Т.В. Возможность применения про-

тив сальмонеллезного аборта и ринопневмонии

биотиков при вакцинации животных различными

лошадей // Диагностика, лечение и профилактика

противобруцеллезными вакцинами // Материалы

инфекционных болезней животных Казахстана. -

шестой межрегиональной конференции, посвящен-

Алма-Ата, 1989. - С. 94-99.

ной 85-летию СибНИВИ ВНИИТБЖ ( г. Омск, 7-8

13. Юров К.П. Инфекционные болезни лошадей. - М.:

декабря 2007 г). - Новосибирск, 2007. - Вып. 2. - С.

Росагропромиздат, 1991. - С. 114-118.

111-114.

14. Мусаева А.К., Егорова Н.Н. Специфическая профи-

18. Шахов А.Г., Масьянов Ю.Н., Бригадиров Ю.Н.,

лактика сальмонеллезного аборта кобыл в Казах-

Першина С.И., Бирюкова М.В., Золотарев А.И.,

стане // Аграрная наука - сельскохозяйственному

Кардашов А.М.. Батищева Е.В. Применение имму-

производству Сибири, Казахстана, Монголии, Бе-

номодуляторов при вакцинации животных против

лоруссии и Болгарии: Материалы ХХI Междуна-

сальмонеллеза // Ветеринария. - 2006. - № 6. - С.

родной научно-практической конференции (Ново-

21-26.

сибирск 16-17 ноября 2017 г.). - Новосибирск, 2018.

19. Соловьева А.С., Овсянников Ю.С., Домский И.А.,

- С. 197-198.

Бельтюкова З.Н. Применение субалина при вакци-

15. Неустроев М.П., Тарабукина Н.П., Петрова С.Г.

нации щенков песца против сальмонеллеза // Вете-

Способ повышения эффективности вакцинации

ринарная медицина. - 2011. - № 3-4. - С. 124-126.

против инфекционных абортов в табунном коне-

20. Осмаев И.А., Юров К.П., Неустроев М.П. Иммуно-

водстве // Российская сельскохозяйственная наука.

модулирующие свойства эндогенного интерферона

- 2019. - № 1. - С. 49-52.

у телят // Ветеринария. - 2007. - № 1. - С. 11- 13.

Поступила в редакцию 23.03.20

После доработки 15.05.20

Принята к публикации 18.05.20