Российская сельскохозяйственная наука, 2022, № 2

Растениеводство, защита и биотехнология растений

УДК 575.22:634.84

DOI: 10.31857/S250026272202003X, EDN: GABHAW

Молекулярно-генетический анализ автохтонных сортов винограда

(Vitis vinifera L.) различных эколого-географических групп*

А.В. Секридова¹, Е.Н. Кислин², кандидат биологических наук,

В.А. Захарьин³, П.Н. Харченко¹, академик РАН, И.А. Шилов¹,доктор биологических наук

¹Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной биотехнологии,

127550, Москва, ул. Тимирязевская, 42

E-mail: ishilov@rambler.ru

²Федеральный исследовательский центр Всероссийский институт генетических ресурсов

растений имени Н.И. Вавилова,

190031, Санкт-Петербург, ул. Б. Морская, 44

E-mail: vitisamurensis@yandex.ru

³ООО «Дом Захарьиных»,

295015, Симферополь, ул. Шмидта, 9

E-mail: info@interfin-wine.com

Создание устойчивых к многочисленным заболеваниям и изменяющимся метеоусловиям сортов с высоким качеством ягод - главная

задача в селекции винограда на сегодняшний день. Один из вариантов её решения - гибридизация современных сортов Vitis vinifera

L. с дикими и/или древними образцами винограда, которые выращивали на начальном этапе освоения этой сельскохозяйственной

культуры. Всестороннее изучение генетических ресурсов винограда чрезвычайно необходимо для осмысленного выбора кандидатов

для скрещиваний. Цель исследований - установление филогенетических связей между выбранными 50 сортами и дикими пред-

ставителями вида Vitis vinifera L.; проверка адекватности применения модели эколого-географических групп древних автохтонных

сортов винограда к сделанной выборке; определение происхождения некоторых крымских и других автохтонных сортов винограда.

Работу проводили на основе микросателлитного анализа ДНК по 9 утверждённым Международной организацией виноградорства

и виноделия (OIV) SSR-маркерам (VVS2, VVMD5, VVMD7, VVMD27, VVMD28, VVMD25, VVMD32, VrZAG62, VrZAG79) с использова-

нием ранее разработанной технологии генетической идентификации сортов винограда. Она включает в себя мультиплексную ПЦР

по всем маркерам с последующим электрофоретическим анализом полученных фрагментов ДНК в одном капилляре генетического

анализатора. Для каждого исследуемого представителя вида V. vinifera L. получали генетический профиль в виде индивидуального

набора длин фрагментов ДНК, что позволило с использованием математического метода «ближайших соседей» (Neighbor Joining)

построить дендрограмму, отражающую филогенетические связи внутри выборки сортов. Модель эколого-географических групп

древних автохтонных сортов в исследованной выборке не отражает филогенетические взаимосвязи между образцами. Распростра-

нение культурных сортов винограда на начальном этапе развития виноградарства шло с востока на запад. Изученные автохтонные

крымские сорта винограда не происходят от местных диких форм V. vinifera L, а были интродуцированы из других областей.

Molecular genetic analysis of autochthonous grape varieties (Vitis vinifera L.) from

different ecological and geographical proles

A.V. Sekridova¹, E.N. Kislin², V.A. Zaharin³, P.N. Kharchenko¹, I.A. Shilov¹

¹All-Russia Research Institute of Agricultural Biotechnology,

127550, Moskva, ul. Timiryazevskaya, 42

E-mail: ishilov@rambler.ru

²Vavilov Federal Research Center All-Russian Institute of Plant Genetic Resources,

190031, Sankt-Peterburg, ul. B. Morskaya, 44

E-mail: vitisamurensis@yandex.ru

³LLC «Valery Zaharin»,

295015, Simferopol’, ul. Shmidta, 9

E-mail: info@interfin-wine.com

The creation of varieties resistant to different diseases and changing climate conditions as well as high-quality berries is the main

goal of grape breeders. One of the approaches is the hybridization of cultivated Vitis vinifera L. varieties with wild and/or ancient

accessions. A comprehensive study of the grapes genetic resources is highly necessary for a choosing of candidates for breeding

process. The purposes of our study were: determination of phylogenetic relationships between the 50 varieties and wild representatives

of the Vitis vinifera L. species; compliance checking of the model of ecological and geographical groups to the varieties we have

selected; determination of the origin of some Crimean and other autochthonous grape varieties. The study was conducted on the

basis of microsatellite DNA analysis for 9 SSR markers approved by the International Organization of Viticulture and Winemaking

(OIV) (VVS2, VVMD5, VVMD7, VVMD27, VVMD28, VVMD25, VVMD32, VrZAG62, VrZAG79) using the technology of genetic

identification of grape varieties developed and published by us earlier. This technology includes multiplex PCR for all markers followed

by electrophoretic analysis of the obtained DNA fragments in one capillary of a genetic analyzer. For each studied sample we obtained

a genetic profile in the form of an individual set of lengths of DNA fragments, which allowed us to use the mathematical method of

«Neighbor Joining» to construct a dendrogram reflecting phylogenetic relationships within our sample of varieties. As a result of our

work, it was found that the model of ecological and geographical groups of ancient autochthonous varieties in the studied sample

*Работа выполнена в рамках государственного задания по теме «Разработка новых технологий генетического анализа растительных форм

сельскохозяйственных растений для ускорения и контроля селекционного процесса» (проект № 0574-2019-0003).

Российская сельскохозяйственная наука, 2022, № 2

does not reflect the phylogenetic relationships between the samples. The spread of cultivated grape varieties at the initial stage of the

development of viticulture went from east to west. The studied autochthonous Crimean grape varieties were introduced from other

regions, and do not originate from local wild forms of V. vinifera L.

Ключевые слова: Vitis vinifera, виноград, эколого-

Key words: Vitis vinifera, grapes, ecological and geographical

географические группы, микросателлитный анализ ДНК, SSR,

proles, microsatellite DNA analysis, SSR, genetic pedigree,

филогенетические связи, автохтонные сорта.

autochthonous varieties.

Виноград - важнейшая сельскохозяйственная куль-

древними сортами и/или с дикими формами V. vinifera

тура, выращиваемая человечеством не одно тысяче-

subsp. silvestris Gmel. Этот подход может увеличить

летие. Все его известные сорта относятся к роду Vitis

аллельное разнообразие и привести к появлению вино-

(семейства Vitaceae). Этот род включает в себя более

градной продукции с новыми свойствами.

60 видов, около 20 из них введено в культуру. Для

Известный советский учёный Александр Михайло-

сельскохозяйственной отрасли чрезвычайно значим

вич Негруль в своей работе [9] на основе биоморфоло-

евроазиатский вид - Vitis vinifera L., представители

гических исследований сделал вывод о происхождении

которого культивируются и подвергаются селекции наи-

древних (так называемых автохтонных) сортов вино-

более длительное время, а также обладают наилучшими

града, выращиваемых в определённых регионах, от

ценными качествами ягод.

соответствующих, произрастающих в этих регионах

Современная классификация различает два подвида

форм V. vinifera subsp. silvestris Gmel. Таких регионов,

Vitis vinifera: sativa D. C. (включает в себя все культур-

а, следовательно, и групп автохтонных сортов, А. М.

ные сорта) и silvestris Gmel. (представлен различными

Негруль выделял три: западно-европейский регион

формами вида, произрастающими в дикой природе).

(группа), восточный регион (группа) и регион (группа)

Основное различие по биоморфологическим призна-

бассейна Чёрного моря. Они были названы эколого-

кам между этими подвидами заключается в строении

географическими группами сортов винограда, отражаю-

цветка [1] и форме семени [2]. Культурный виноград, V.

щими происхождение культурного винограда (рис. 1).

vinifera subsp. sativa D. C., преимущественно обладает

цветками обоеполого типа и лишь у небольшого ко-

личества сортов есть цветки функционально женского

типа. Семя у представителей V. vinifera subsp. sativa D.

C. вытянутое с выраженным носиком. Дикий подвид V.

vinifera subsp. silvestris Gmel. характеризуется мужским

или женским типом цветка его представителей и окру-

глым семенем с отсутствующим или невыраженным

носиком. В целом ягоды диких форм Vitis vinifera L.

чёрного цвета и значительно мельче плодов сортового

винограда. В исследовании [3] было подтверждено про-

Рис. 1. Эколого-географические группы автохтонных

исхождение представителей подвида V. vinifera subsp.

сортов винограда.

sativa D. C. от диких сородичей V. vinifera subsp. silves-

tris Gmel. Большинство современных сортов винограда

Потребность виноградарства в изучении и сохра-

произошли в результате трёх основных селекционных

нения генетического разнообразия рода Vitis, а также

процессов: отбора и выращивания человеком диких

давний интерес к происхождению и определению

представителей V. vinifera subsp. silvestris Gmel.; по-

филогенетических связей древних и культивируемых

следовательного скрещивания культурных сортов

сортов привели к развитию в этой сфере сельского

V. vinifera subsp. sativa D. C. с местными дикими об-

хозяйства молекулярно-генетических методов [10, 11,

разцами V. vinifera subsp. silvestris Gmel.; скрещивания

12]. Один из широко применяемых методов при таких

различных сортов винограда [4, 5].

исследованиях - микросателлитный анализ ДНК или

Основная задача селекции винограда - выведение

анализ с использованием SSR (simple sequence repeat)

новых сортов, устойчивых к заболеваниям и изме-

ДНК-маркеров [13, 14]. SSR-маркеры - это небольшие

няющимся погодно-климатическим условиям, с со-

участки ДНК (до 100 п.н.), которые состоят из повто-

хранением высокого качества конечной продукции.

ряющихся мотивов в 1-6 нуклеотидов и отличаются

На сегодняшний день известно более 30 различных

по размеру у разных аллелей. В виноградарстве SSR-

болезней, поражающих представителей V. vinifera subsp.

маркеры в основном применяют для паспортизации и

sativa D. C. [6, 7]. Впервые виноградники массово по-

идентификации сортов [13], ДНК-маркирования генов

страдали от повреждающего воздействия филлоксеры,

ценных признаков, картирования ДНК локусов [15].

завезённой в Европу из Америки на корнях саженцев

Международная организация виноградарства и вино-

в XIX столетии [8]. С этого времени в виноградарстве

делия (OIV - Organisation internationale de la vigne et du

стали активно использовать филлоксероустойчивые

vin) утвердила минимальный набор из девяти микро-

подвои, а в селекционную работу привлекать такие виды

сателлитных маркеров (VVS2, VVMD5, VVMD7,

рода Vitis, как, например, V. riparia Michx., V. vulpina L.,

VVMD27, VVMD28, VVMD25, VVMD32, VrZAG62

V. rupestris Scheel, V. labrusca L., проявляющие большую

и VrZAG79), необходимых для идентификации сорта

устойчивость к болезням и вредителям, чем V. vinifera

или дикой формы рода Vitis. На основе этого набора

subsp. sativa D. C. Однако неуклонно увеличивающееся

была составлена база данных генетических профилей

число заболеваний винограда и их повсеместное рас-

сортов винограда Международного каталога сортов

пространение, которые приводят к исчезновению многих

винограда (VIVC - Vitis international variety catalogue),

хозяйственно ценных сортов, вызывают необходимость

доступная в интернете (http://www.vivc.de/index.

поиска новых селекционных решений. Перспективным

php?r=eva-analysis-mikrosatelliten-vivc%2Findex).

направлением в селекции на повышение устойчивости

Также с помощью микросателлитного анализа ДНК

винограда может стать гибридизация современных

были проведены работы по определению родства и

культурных сортов V. vinifera subsp. sativa D. C. с более

происхождения сортов винограда [16, 17].

Российская сельскохозяйственная наука, 2022, № 2

Рис. 2. Пример генетических профилей образцов винограда Демир Кара (А) и Рисланер (Б). Пики, находящиеся на

разных координатных плоскостях, соответствуют разным флуоресцентным красителям (1 - FAM, 2 - R6G, 3 - ROX),

которые введены в состав амплифицированных фрагментов, содержащих микросателлиты. По оси Y отложены

относительные значения интенсивности флуоресценции в RFU (Relative Fluorescence Units), по оси X — значения длин

фрагментов в п.н. В табличном формате приведены полученные длины фрагментов микросателлитных локусов в

п.н. Порядок их записи соответствует международной базе данных VIVC (http://www.vivc.de/index.php?r=eva-analysis-

mikrosatelliten-vivc%2Findex).

В нашей лаборатории была создана не существовав-

дополнительного стандарта длин - аллельной лестницы,

шая ранее удобная для использования технология гено-

состоящей из фрагментов ДНК анализируемых микроса-

типирования сортов и диких форм рода Vitis [18], которая

теллитных локусов. К преимуществам этой технологии

позволяет быстро и надёжно получать генетические про-

следует отнести возможность стандартизации и авто-

фили в формате базы данных «Международный каталог

матизации анализа в формате 96-луночного планшета,

сортов винограда» (VIVC). Один из ключевых элементов

что позволяет проводить массовые анализы. Появление

технологии, определяющих точность и воспроизводи-

такого инструмента открывает новые возможности для

мость анализа, - применение на стадии электрофореза

оперативного решения различных задач виноградарства

Российская сельскохозяйственная наука, 2022, № 2

(определение омонимов и синонимов, идентификация

subsp. silvestris Gmel. был собран в естественной среде

спорных сортовых образцов различных виноградарских

обитания - образцы 1, 2, 3, 4, 5, ДК красн. муж.

и винодельческих хозяйств, контроль посадочного ма-

Геномную ДНК винограда выделяли из участков

териала, определение происхождения сортов, защита

ткани молодых листьев площадью 1 см² с применением

авторских прав селекционеров и др.).

модифицированного метода «СТАВ» (метода с ис-

Цель исследований - установление филогенетиче-

пользованием цетил-триметиламмоний бромида - cetyl

ских связей между некоторым выбранными автохтон-

trimethylammonium bromid) [22].

ными сортами и дикими представителями V. vinifera

Фрагменты ДНК винограда, содержащие исполь-

L., а также проверка адекватности применения модели

зуемые микросателлитные маркеры, получали ампли-

эколого-географических групп к этой выборке.

фикацией с помощью мультиплексной ПЦР, которую

Методика. Автохтонные сорта - один из наиболее

проводили в одной пробирке по всем девяти участкам

перспективных объектов для виноградарства, виноделия

ДНК. Для определения длин фрагментов ДНК, содер-

и селекционной работы в связи с их длительным выращи-

жащих микросателлитные повторы, в качестве маркера

ванием на определенных территориях и районированием.

использовали универсальный коммерчески доступный

Их исследуют многие российские и зарубежные учёные, в

стандарт LIZ600 (Applied Biosystems, США). Образец

том числе с использованием микросателлитного анализа

смеси мультиплексной ПЦР после амплификации вно-

ДНК [19, 20, 21].

сили вместе со стандартом LIZ600 в один капилляр при-

Источником геномной ДНК винограда, необходимой

бора. В отдельный капилляр генетического анализатора

для проведения микросателлитного анализа, служили

вносили пробу, содержащую дополнительный стандарт

листья сортов Vitis vinifera subsp. sativa D. C. и диких

длин - аллельную лестницу (смесь фрагментов ДНК,

представителей Vitis vinifera subsp. silvestris Gmel. Био-

состоящую из различных аллельных вариантов по всем

логический материал был предоставлен Всероссийским

девяти микросателлитным участкам) с универсальным

национальным научно-исследовательским институтом

стандартом LIZ600. Автоматический высокоразрешаю-

виноградарства и виноделия «Магарач» (г. Ялта) - со-

щий электрофорез в ПААГ проводили в денатурирую-

рта Мерло, Каберне Совиньон, Пино Гри, Шардоне,

щих условиях в генетическом анализаторе ABI Prism

Саперави, Ркацители, Читискверцкха тетри, Тайфи

3130xl (Applied Biosystems). Данные по электрофорети-

розовый; Всероссийским институтом генетических

ческой подвижности фрагментов ДНК обрабатывали с

ресурсов растений имени Н.И. Вавилова (ВИР; г. Санкт-

использованием программного обеспечения GeneMapper

Петербург) - сорта Рисланер, Кишмиш белый круглый,

ID-X (Applied Biosystems), определяли длину фрагмен-

Темпранилльо, Мурведер, Коринка чёрная, Коринка

тов (рис. 2). Генетический профиль каждого образца

белая, Ахмар бу Ахмар, Ранний Магарача, Кишмиш

получали в трёх повторах.

чёрный; виноградарским хозяйством ООО «Дом Заха-

Установленные генетические профили образцов

рьиных» (г. Симферополь, респ. Крым) - сорта Капитан

винограда сравнивали с профилями, представленными

Яни Кара, Шабаш, Фирский ранний, Демир Кара, Аль-

в международной базе данных анализа микросателлитов

бурла. Биологический материал винограда Vitis vinifera

винограда VIVC (https://www.vivc.de/index.php?r=eva-

Рис. 3. Дендрограмма, отражающая филогенетические взаимосвязи сортов и диких форм винограда, традиционно

выращиваемых и произрастающих в различных географических областях; точкой (•) отмечены сорта относимые к

западно-европейской эколого-географической группе; ромбом (

) - сорта восточной группы; треугольником ( ) - сорта

группы бассейна Чёрного моря; крестом ( ) - дикие формы винограда, относящиеся к подвиду V. vinifera sylvestris Gmel.

Генетические профили сортов и форм винограда, названия которых записаны на дендрограмме в русской литерации ,

были получены нами и сопоставлены с профилями международной базы данных VIVC. Курсивом отмечены образцы,

генетические профили которых отсутствуют в базе данных. Остальные полученные нами профили, совпали с

имеющимися в указанной базе. Генетические профили сортов и форм винограда, названия которых записаны на

дендрограмме в английской литерации, были взяты из международной базы данных VIVC.

Российская сельскохозяйственная наука, 2022, № 2

analysis-mikrosatelliten-vivc%2Findex). Дендрограмму,

Сделанные выводы позволяют по-новому взглянуть

отражающую филогенетические взаимосвязи между

на происхождение автохтонных сортов винограда раз-

исследуемыми образцами Vitis vinifera L., строили с ис-

личных эколого-географических групп, а также могут

пользованием программы DARwin 6 (CIRAD, Франция)

быть использованы в селекционном процессе при вы-

методом «ближайших соседей» (Neighbor Joining).

боре кандидатов для скрещиваний.

Результаты и обсуждение. Результаты нашего

исследования лишь частично соответствовали модели

Литература

эколого-географических групп автохтонных сортов

Zohary D. Domestication of the grapevine Vitis vinifera

винограда, предложенной А.М. Негрулем, в части

L. in the Near East // The Origins and Ancient History

восточной группы (см. рис. 1). Анализ распределения

of Wine / ed. P.E. Mc Govern, S.J. Fleming, S.H. Katz.

изученных автохтонных сортов винограда, относящих-

New York: Gordon and Breach Sciences Publisher.

ся к разным эколого-географическим группам, по кла-

1995. P. 23-30.

стерам (группам) на основе молекулярно-генетического

Evolution and history of grapevine (Vitis vinifera)

микросателлитного анализа ДНК показал, что образцы

under domestication: new morphometric perspectives

сгруппировались в три отдельных кластера отличаю-

to understand seed domestication syndrome and reveal

щиеся по составу от эколого-географических групп

origins of ancient European cultivars / J.-F. Terral,

и условно названные нами итало-франко-немецкий,

E. Tabard, L. Bouby, et al. // Annals of Botany. 2010. Vol.

испано-португальский и восточный (рис. 3). Сорта, тра-

105. P. 443-455. doi: 10.1093/aob/mcp298.

диционно относимые к западно-европейской эколого-

Levadoux L. Les populations sauvages et cultivees de

географической группе (отмечены на дендрограмме

Vitis vinifera L. Annals d`Amelioration des Plantes.

точкой) вошли в итало-франко-немецкий и испано-

1956. Vol. 6. P. 59-118.

португальский кластеры, которые также включают

Genetic analysis of the grapevine genotypes of the

в себя часть сортов восточной группы (отмечены на

Russian Vitis ampelographic collection using iPBS

дендрограмме ромбом) и группы бассейна Чёрного

markers / A. Milovanov, A. Zvyagin, A. Daniyarov, et

моря (отмечены на дендрограмме треугольником). К

al. // Genetica. 2019. Vol. 147. P. 91-101. doi: 10.1007/

третьему кластеру относились только восточные сорта,

s10709-019-00055-5.

что подтверждает предположение других исследовате-

Multiple origins of cultivated grapevine (Vitis vinifera L.

лей о распространении V. vinifera subsp. sativa D. C. на

ssp. sativa) based on chloroplast DNA polymorphisms

начальном этапе выращивания винограда в качестве

/ R. Arroyo-García, L. Ruiz-Garcia, L. Bolling, et al. //

сельскохозяйственной культуры с востока на запад

Molecular ecology. 2006. Vol. 15(12). P. 3707-3714.

[23]. Необходимо также отметить, что для контроля

Принц Я.М. Вредители и болезни виноградной лозы.

распределения сортов по кластерам был проанали-

М.: Сельхозиздат, 1962. 247 с.

зирован образец Ранний Магарача - гибрид сортов

Алейникова Н.В., Галкина Е.С., Радионовская Я.Э.

Кишмиш чёрный (восточная группа) × Мадлен Анжеви

Болезни и вредители виноградной лозы. Ялта. 2018.

(западно-европейская группа). На дендрограмме он

149 с.

вошёл в восточный кластер. Между сортами Ранний

Arrigo N., Arnold C. Naturalised Vitis rootstocks in

Магарача и Кишмиш чёрный была отмечена минималь-

Europe and consequences to native wild grapevine. PLoS

ная генетическая дистанция, что подтверждает наличие

ONE. 2007. Vol. 2(6). e521. URL: https://journals.plos.

близкородственных связей между этими образцами.

org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0000521

Несмотря на то, что исследованные крымские автох-

(дата обращения: 22.12.2021). doi: 10.1371/journal.

тонные сорта (Капитан Яни Кара, Шабаш, Фирский ран-

pone.0000521.

ний, Демир Кара, Эким Кара, Кокур белый, Альбурла)

Негруль А.М. Семейство Vitacea Lindley (Ampelideae

традиционно относят к разным эколого-географическим

Kunh.) (очерк семейства виноградных и его главных

группам, на полученной дендрограмме они кластеризо-

видов с их краткой хозяйственной характеристикой)

вались в одну испано-португальскую группу. В то же

// Ампелография СССР. М.: Пищепромиздат, 1946.

время, несколько диких форм V. vinifera subsp. sylvestris

1. С. 126-127.

Gmel., собранных в Крыму в ущелье Таш Аир, при-

10. A high quality draft consensus sequence of the genome

надлежность которых к подвиду sylvestris Gmel. была

of a heterozygous grapevine variety / R. Velasco,

доказана по биoморфологическим признакам, вошли в

A. Zharkikh, M. Troggio, et al. // PLoS ONE. 2007. Vol.

другую итало-франко-немецкую группу, что свидетель-

2(12), e1326. URL: (дата обращения: 20.12.2021).

ствует в пользу древней интродукции исследованных

doi: 10.1371/journal.pone.0001326.

автохтонных сортов на территорию Крыма из других

11. Whole-genome sequencing and SNV genotyping of

областей. Вывод об интродукции крымских автохтонов

‘Nebbiolo’ (Vitis vinifera L.) clones / G. Gambino,

был также сделан в работе А. М. Негруля [9] и откры-

A. Dal Molin, P. Boccacci, A. Minio, et al. // Scientific

вает возможности для увеличения генетического раз-

Reports. 2017. Vol. 7. 17294. URL: https://www.nature.

нообразия отечественных крымских сортов винограда

com/articles/s41598-017-17405-y (дата обращения:

путем использования в селекционной работе крымских

21.12.2021). doi: 10.1038/s41598-017-17405-y.

образцов V. vinifera subsp. sylvestris Gmel.

12. Bianchi D., Brancadoro L., De Lorenzis G. Genetic

Таким образом, в результате проведенных ис-

diversity and population structure in a Vitis spp. core

следований было установлено, что модель эколого-

collection investigated by SNP markers. Diversity.

географических групп древних автохтонных сортов в

2020. Vol. 12. 103. URL: https://www.mdpi.com/1424-

исследованной выборке не отражает филогенетические

2818/12/3/103 (дата обращения:20.12.2022). doi:

взаимосвязи между образцами. Распространение куль-

10.3390/d12030103.

турных сортов винограда на начальном этапе развития

13. A forensic perspective on the genetic identification

виноградарства шло с востока на запад. Изученные ав-

of grapevine (Vitis vinifera L.) varieties using STR

тохтонные крымские сорта винограда были интродуци-

markers / S. Santos, M. Oliviera, A. Amorim, et al. //

рованы из других областей, а не происходят от местных

Electrophoresis. 2014. Vol. 35. P. 3201-3207. doi:

форм V. vinifera subsp. sylvestris Gmel.

10.1002/elps.201400107.

Российская сельскохозяйственная наука, 2022, № 2

14. Genetic diversity and population structure assessed by

ких форм винограда на основе мультилокусного микро-

SSR and SNP markers in a large germplasm collection

сателлитного анализа / А.В. Секридова, И.А. Шилов,

of grape / F. Emanuelli, S. Lorenzi, L. Grzeskowiak, et

Е.Н. Кислин и др. // Биотехнология. 2021. Т. 37. № 3. С.

al. // BMC Plant Biol. 2013. Vol. 13. P. 39-56.

85-95. doi: 10.21519/0234-2758-2021-37-3-85-95.

15. Ильницкая Е.Т., Макаркина М.В. Применение ДНК-

19. Использование универсальных флуоресцентно-

маркеров в современных селекционно-генетических

меченых праймеров в генотипировании казахстан-

исследованиях винограда // Вавиловский журнал

ских сортов винограда по микросателлитным

селекции и генетики. 2016. T. 20. № 4. С. 528-536.

маркерам / К.П. Аубакирова, М.Е. Омашева, Н.А. Ря-

doi: 10.18699/VJ16.163.

бушкина и др. // Биотехнология.  Теория и практика.

16. DNA-based genealogy reconstruction of Nebbiolo,

2013. № 2. С. 35-41. doi: 10.11134/btp.2.2013.6.

Barbera and other ancient grapevine cultivars from

20. Microsatellite genotyping of cultivars of the Holy

northwestern Italy / S. Raimondi, G. Tumino, P. Ruffa,

Land grapevine, Vitis  vinifera ssp. sativa (Vitaceae)

et al. // Scientific Reports. 2020. Vol. 10. 15782. URL:

/ B.Y. Klein, C. Ben-Yair, G.K. Bar-Gal, et al. // Bot. 

https://www.nature.com/articles/s41598-020-72799-6

J. Linn. Soc. 2008. Vol. 156. P. 513-521. doi: 10.1111/

(дата обращения: 20.12.2022). doi: 10.1038/s41598-

j.1095-8339.2007.00751.x.

020-72799-6.

21. Genetic diversity of ancient grape cultivars of the Crimea

17. Genetic diversity analysis of cultivated and wild

region / S. Goryslavets, R. Bacilieri, V. Risovannaya, et

grapevine (Vitis vinifera L.) accessions around the

al. // Vitis. 2015. Vol. 54. P. 37-41.

Mediterranean basin and Central Asia / S. Riaz, G. De

22. Doyle J.J., Doyle J.L. Isolation of plant DNA from fresh

Lorenzis, D. Velasco, et al. // BMC Plant Biology. 2018.

tissue // Focus. 1990. Vol. 12. P. 13-15.

Vol. 18. 137. URL: https://bmcplantbiol.biomedcentral.

23. Genetic structure and domestication history of the

com/articles/10.1186/s12870-018-1351-0 (дата обра-

grape / S. Myles, A.R. Boyko, C.L. Owens, et al. //

щения: 21.12.2022). doi: 10.1186/s12870-018-1351-0.

PNAS. 2011. Vol. 108 (9). P. 3530-3535. doi: 0.1073/

18. Технология генетической идентификации сортов и ди-

pnas.1009363108.

Поступила в редакцию 01.12.2022

После доработки 23.12.2022

Принята к публикации 25.02.2022