Российская сельскохозяйственная наука, 2022, № 3

УДК 633.36/37: 631.522/.524:631.527.22/32

DOI: 10.31857/S2500262722030073, EDN: GCGFOH

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МАРКЕРНОГО ПРИЗНАКА В СЕЛЕКЦИИ

КОЗЛЯТНИКА ВОСТОЧНОГО (Galega orientalis Lam.)

В.Н. Золотарев, кандидат сельскохозяйственных наук, И.А. Клименко, кандидат сельскохозяйственных наук,

В.М. Косолапов, доктор сельскохозяйственных наук, академик РАН,

В.Л. Коровина, старший научный сотрудник, Антонов А.А., младший научный сотрудник

Федеральный научный центр кормопроизводства и агроэкологии

имени В.Р. Вильямса,

141055, Московская обл., Лобня, ул. Научный городок, корп. 1

E-mail: semvik@vniikormov.ru

По состоянию на 2021 г. в Государственном реестре селекционных достижений зарегистрировано 17 сортов козлятника

восточного (Galega orientalis Lam.). Все они были созданы методами массового и индивидуального отбора для конкрет-

ных условий из интродуцированных дикорастущих популяций или сорта Гале. В результате использования исходного

материала на основе общей генетической базы большинство из них по морфологическим характеристикам в целом

однотипны. В связи с этим очень актуальны проблемы идентификации сортов, защиты авторских прав и апробации

семенных посевов для селекционеров. Существенно упростить ее решение может выведение сортов с маркерными мор-

фологическими признаками. Одновременно в последние годы возрастает значение современных методов, основанных на

использовании молекулярных ДНК-маркеров, как дополнение к традиционным способам оценки селекционного и сортового

материала. Цель исследований - создать сорт козлятника восточного с маркерным фенотипическим признаком и прове-

сти молекулярно-генетический анализ по выявлению информативных ДНК-маркеров для сортовой идентификации. Для

решения поставленной задачи из популяции сорта Гале были выделены растения с различной окраской цветков. Методом

последовательного репродуцирования потомств в нескольких поколениях и негативного отбора, удалось стабилизиро-

вать розовоцветковую и белоцветковую популяции. В потомстве козлятника с розовой окраской цветков этот признак

сохраняли 98 % растений. После конкурсного испытания популяция была зарегистрирована как сорт козлятника Вест

с маркерным морфотипическим признаком. По кормовой и семенной продуктивности сорт Вест превосходит сорт Гале

на 15…34 %. ПЦР-анализ с использованием 10 пар SSRs и 6…8 комбинаций SRAP-праймеров, в сравнении с синецветко-

вой и белоцветковой популяциями, позволил определить две информативные комбинации SRAP-маркеров - ME3-EM4 и

ME3-EM2, которые можно использовать в качестве дополнительного инструмента при сортовой ДНК-идентификации

и создании генетического паспорта нового сорта.

APPLICATION OF MARKER TRAIT IN BREEDING OF FORAGE GALEGA (Galega orientalis Lam.)

Zolotarev V.N., Klimenko I.A., Kosolapov V.M., Korovina V.L., Antonov A.A.

Federal Williams Research Center of Forage Production & Agroecology

141055, Moskovskaya obl., Lobnya, ul. Nauchnyi gorodok, korp. 1

E-mail: semvik@vniikormov.ru

As of 2021, 17 varieties of forage galega (Galega orientalis Lam.) were registered in the State Register of Breeding Achievements. All

of them were created by methods of mass and individual selection for specific conditions from introduced wild populations or varieties

of Gale. As a result of using the source material on the basis of a common genetic base, most of the available varieties are generally

of the same type in morphological characteristics. The problem of identification of varieties, copyright protection and testing of seed

crops for breeders is one of the most urgent. A significant simplification of the solution of this problem is the breeding of varieties with

marker morphological features. Along with this, in recent years, the importance of modern methods based on the use of molecular

DNA markers has been increasing as an addition to traditional methods of evaluating breeding and varietal material. The aim of

the work is to create a forage galega variety with a marker phenotypic trait and to conduct a molecular genetic analysis to identify

informative DNA markers for varietal identification. To solve this problem, plants with different flower colors were isolated from the

population of the Gale variety. By the method of successive reproduction of offspring in several generations and negative selection,

it was possible to stabilize the pink-flowered and white-flowered populations. It was found that 98% of plants retained this feature

in the progeny of forage galega with pink flowers. This population, after a competitive trial, was registered as a forage galega West

variety with a marker morphotypic feature. In terms of feed and seed productivity, the West variety exceeds the Gale variety by 15-34%.

PCR analysis using 10 pairs of SSRs and 6-8 combinations of SRAP primers in comparison with blue-flowered and white-flowered

populations allowed us to identify two informative combinations of SRAP markers ME3-EM4 and ME3-EM2, which can be used as

an additional tool for varietal DNA identification and the creation of a genetic passport of a new variety.

Ключевые слова: козлятник восточный (Galega orientalis

Key words: forage galega (Galega orientalis Lam.), variety,

Lam.), сорт, маркерный фенотипический признак, окраска

marker phenotypic trait, flowers color, molecular and genetic

цветков, молекулярно-генетическая характеристика.

characteristic.

На современном этапе развития кормопроизводства

почвенно-климатическим условиях. Козлятник восточ-

дополнительное повышение эффективности этой отрас-

ный, или галега восточная (Galega orientalis Lam.) выде-

ли возможно в результате более широкого вовлечения в

ляется среди других бобовых трав рядом морфобиологи-

процесс хозяйственного использования ценных в кормо-

ческих и биогеоценотических особенностей и относится

вом отношении, но еще малораспространенных культур,

к группе растений, обладающих высокой биологической

обладающих высоким потенциалом продуктивности,

продуктивностью и экологической пластичностью [1, 2,

технологичностью, устойчивостью к абиотическим

3]. Эта культура характеризуется адаптивностью, устой-

стрессам и способностью к адаптации в различных

чивостью и неприхотливостью, высокой конкурентной

Российская сельскохозяйственная наука, 2022, № 3

способностью в травосмесях и выносливостью, морозо-

ными признаками, которые визуально легко и надежно

и зимостойкостью, засухоустойчивостью, повышенной

определимы и проявляются независимо от влияния

азотфиксирующей способностью [4, 5, 6]. Вследствие

условий среды [16, 17].

высокой способности к адаптации в различных условиях

На сегодняшний день на отдельных культурах рас-

козлятник восточный может возделываться в широком

ширяются работы по сбору коллекций и выведению

диапазоне почвенно-климатических условий [7, 8, 9].

сортов с маркерными признаками. При этом обраща-

Одно из условий повышения эффективности хо-

ется внимание на новые маркерные морфологические

зяйственного использования козлятника восточного

признаки, для установления корреляции между ними и

- перманентный процесс создания и расширения со-

хозяйственно-биологическими показателями, изучается

ртимента сортов, адаптированных к разным почвенно-

их генетика [18]. Так, генетический анализ мутантных

климатическим условиям и технологическим требо-

линий льна выявил доминантное моногенное наследо-

ваниям. По состоянию на 2021 г. в Государственный

вание анатомических маркерных особенностей строения

реестр селекционных достижений, допущенных к ис-

стебля растений и в результате взаимодействия неал-

пользованию на территории России, включено 17 сортов

лельных генов полигенный контроль по типу эпистаза

этой культуры. Первым с 1988 г. был зарегистрирован

окраски семян [19].

сорт Гале селекции ВНИИ кормов им. В.Р. Вильямса,

Цель исследований - создать сорт козлятника вос-

выведенный массовым отбором из дикорастущей по-

точного с выраженным маркерным морфологическим

пуляции, интродуцированной еще в 30-е гг. прошлого

признаком и хозяйственно-полезными свойствами,

века из естественного ареала. В результате многолетнего

не уступающими районированному сорту Гале, и

отбора сформировалась популяция из наиболее акклима-

провести молекулярно-генетический анализ по вы-

тизированных для условий Центрального Нечерноземья

явлению информативных ДНК-маркеров для сортовой

биотипов, которую в 1988 г. юридически оформили

идентификации.

как сорт Гале [10]. В процессе культивирования семена

Методика. Работу выполняли в ФНЦ «ВИК им.

популяции рассылали во многие научные учреждения

В.Р. Вильямса» в 1993-2021 гг. в отделе генофонда и

и хозяйства по всей стране. Этот материал послужил

лаборатории семеноводства и семеноведения кормо-

основой для выведения новых сортов козлятника в

вых культур Сравнительный ПЦР-анализ проведен в

разных агроклиматических зонах. Так, районированные

лаборатории молекулярно-генетических исследований

сорта Горноалтайский 87, Ялгинский, Магистр и другие

кормовых культур. Для решения поставленной задачи

выведены методом массового отбора непосредственно

на начальном этапе в 1993 г. было проведено обследова-

из сорта Гале, полученного из коллекции ВНИИ кор-

ние старовозрастных (10…12 г.п.) посевов сорта Гале в

мов [10]. Сорта Кривич, Юбиляр и Талисман селекции

фазе цветения с целью поиска биотипов с маркерными

Псковского НИИ сельского хозяйства также созданы

признаками по окраске цветков. Из травостоя были вы-

с использованием исходного материала псковской ре-

делены растения с белой, розовоцветковой (сиреневой)

продукции сорта Гале [11]. Сорта Полесская, Нестерка,

и светло-голубой окраской цветков, а также комбиниро-

Садружнасць, зарегистрированные в Госреестре Респу-

ванной (например, типичной сине-фиолетовой паруса и

блики Беларусь, и сорта литовской селекции Vidmantai,

крыльев, белой - лодочки и другие вариации и оттенки).

Laukiai и Melsviai также получены методами массового

Отобрано от 2 до 21 парциальных кустов козлятника с

и индивидуального отбора лучших растений из ранее

семью различными вариантами окраски цветков. Осе-

интродуцированной популяции сорта [12, 13].

нью этого же года выделенные биотипы пересадили в

Козлятник восточный может быть классифицирован

пространственно изолированные питомники с комплек-

как культура с очень небольшим генетическим селек-

тованием по признакам окраски цветка для изучения

ционным улучшением. Величина кормовой и семенной

возможности их закрепления при переопылении, оценки

продуктивности районированных сортов галеги опреде-

биологических и хозяйственно-полезных показате-

ляется в основном почвенно-климатическими условиями

лей популяций. Семена, выращенные в питомниках

и технологиями возделывания, а не генетической базой

переопыления, репродуцировали в трех поколениях в

[10]. Возделываемые ранее в производстве сорта галеги

условиях пространственной изоляции при непрерыв-

восточной в целом характеризуются незначительным

ном негативном отборе. Основной метод в селекции

разнообразием по морфологическим и хозяйственно-

козлятника с маркерным признаком - направленный

полезным признакам и свойствам. Фенотипически боль-

индивидуальный и массовый отбор по маркерным при-

шинство сортов, созданных преимущественно методами

знакам при сохранении высоких показателей кормовой

отбора, характеризуются сине-фиолетовой окраской

и семенной продуктивности исходного сорта.

цветков и по этому признаку существенно не отличаются

Учеты и наблюдения, оценку сформированных по-

от растений из дикорастущих популяций [12].

пуляций проводили в соответствии с методическими

В условиях рыночной конъюнктуры проблемы иден-

указаниями по селекции многолетних трав (М.: ВИК,

тификации сортов, сохранения авторских прав, апроба-

1985). Стандартом в конкурсном сортоиспытании на

ции семенных посевов и сбора роялти для селекционеров

кормовую и семенную продуктивность служил сорт

становятся очень актуальными. Сорт выступает в каче-

Гале. Размер делянок составлял 10 м², повторность -

стве рентообразующего фактора, его создание требует

4-х кратная.

существенных затрат времени, а также интеллектуаль-

Почва опытных участков дерново-подзолистая,

ных и финансовых вложений [14]. Сорта относятся к

среднесуглинистая с содержанием в пахотном слое

важным объектам интеллектуальной собственности и

(0…20 см) подвижных форм фосфора (по Кирсано-

жизненно важно, чтобы инновации в селекцию растений

ву) - 112…150 мг/кг, обменного калия (по Масловой)

получали соответствующие материальные стимулы [15].

- 108…112 мг/кг, гумуса (по Тюрину) - 2,36…2,47

В связи с этим актуальна проблема разработки критериев

%, pH_сол - 5,3…5,6. Минеральные удобрения в виде

новизны, отличимости, однородности и стабильности

суперфосфата простого гранулированного (18 % P₂O₅)

(DUS) селекционных достижений в соответствии с кон-

и калия хлористого (K₂O - 60 %) из расчета Р45К90

венцией UPOV. Существенным упрощением решения

вносили на участках с питомниками осенью раз в три

этой задачи представляется селекция сортов с маркер-

года. Метеорологические условия в период проведения

Российская сельскохозяйственная наука, 2022, № 3

исследований в отдельные годы отличались между со-

ем сухого вещества. При этом облиственность варьирует

бой и от среднемноголетних показателей (прохладные

от 47…58 % до 72…80 % в зависимости от года жизни

или с избыточным выпадением осадков вегетационные

и типа побегов (монокарпические генеративные или

сезоны 2000, 2017 гг., но в основном засушливые или

вегетативные).

с повышенным температурным фоном при норме или

Зимостойкость растений первого года жизни при

избытке осадков - 2002, 2004, 2006, 2007, 2009, 2014 гг.,

весеннем сроке посева розоцветковой популяции со-

аномально засушливые - 2010 и 2011 гг.) что дало воз-

ставила 96…98 %. На последующем этапе рекуррентной

можность отобрать наиболее адаптивные образцы.

биотипической селекции на протяжении трех циклов

Для выявления особенностей нового сорта на гене-

пересева выполняли массовый негативный отбор, что

тическом уровне провели ПЦР-анализ, в котором для

способствовало закреплению биотипического состава

сравнительной оценки использовали исходный сорт Гале

сформированной популяции с маркерным признаком -

и селекционный белоцветковый образец, полученный

розоцветковой (сиреневой) окраски цветков.

в результате отбора и последующих пересевов для за-

В 2007-2012 гг. проводили конкурсное и эколо-

крепления отличительного признака.

гическое сортоиспытание, а также селекционное раз-

Геномную ДНК для анализа выделяли из ткани 30

множение в питомнике сортосохранения. В 2012 г.

семидневных проростков от каждого экспериментально-

перспективный сорт передали на государственное

го образца на основе базового SDS-метода с внесением

сортоиспытание по экспертной оценке под названием

ряда модификаций [20]. Использовали 10 пар SSRs и

Вест, с 2014 г. его внесли в Госреестр селекционных

6 комбинаций SRAP-праймеров в различных парных

достижений России (оригинатор - ФНЦ «ВИК им.

сочетаниях [21, 22]. Состав компонентов реакционной

В.Р. Вильямса»). Растения козлятника сорта Вест ха-

смеси для ПЦР: 10х Taq Turbo buffer - 3 мкл, 50 dNTP

рактеризуются ярко выраженным отличительным мар-

mix - 0,5 мкл, 5U Taq-ДНК полимеразы - 0,4 мкл, 1 мкл

керным морфологическим признаком репродуктивных

каждого праймера и 1 мкл геномной ДНК концентрацией

органов - фиолетово-розовой (сиреневой) окраской

20 нг/мкл (на 1 реакцию объёмом 20 мкл). Амплифика-

цветков: парус и крылья светло-розово-фиолетовые,

цию с осуществляли на приборе «Bio-Rad T-1000, USA»

лодочка - фиолетово-розовая, более темно окрашен-

в соответствии с условиями для SSR-маркеров [21] и

ная. Пыльники тычинок имеют оранжево-желтую

SRAP-маркеров [23].

окраску [25].

Продукты реакции разделяли методом электрофореза в

Оценка продуктивности показала, что урожайность зе-

1,6 %-ном LE2-агарозном геле при 50 В в течение 90 мин.

леной массы галеги сорта Вест в среднем за первые 3 года

Для оценки размера фрагментов продуктов амплификации

пользования составила 36,5 т/га, у сорта Гале - 32,8 т/га,

использовали молекулярный маркер 100 kb DNA Ladder

или на 11 % меньше. Сбор сухого вещества был равен

(«ThermoFisher Scientific»). Визуализацию фрагментов ам-

соответственно 6,33 и 5,73 т/га. Вследствие более вы-

плификации проводили на приборе «Gel Doc™ XR+» (Bio-

сокой облиственности содержание сырого протеина в

Rad, USA). Размер продуктов амплификации и показатели

фазе стеблевания - начала бутонизации (III декада мая

генетического разнообразия, рассчитанные на основании

- I декада июня) у нового сорта составляет 26…30 %;

данных бинарных матриц, определяли с использованием

в фазе цветения (I-II декады июня) оно снижается до

программ Image Lab и PopGene.

18,4…19,4 %, а количество сырой клетчатки за этот

Результаты и обсуждение. Исходный материал - это

период увеличивается с 22,8 до 28,7 % [25].

биологическая платформа, на которой в процессе ис-

Фактический сбор семян сорта Вест в первый год

пользования различных селекционных методов работы

пользования в среднем составил - 74 кг/га, во второй -

формируется определенного генотипа с комплексом

397 кг/га, третий - 427 кг/га, что соответственно на 34, 15

необходимых морфотипических и хозяйственных при-

и 31 % выше, чем у сорта Гале. В благоприятные годы фак-

знаков. Появление биотипов с новыми признаками в

тический сбор семян сорта Вест достигал 597…612 кг/га,

старовозрастных посевах козлятника связано с тем, что

биологическая урожайность - 1000 кг/га.

в процессе интродукции в новых районах с резко отли-

Следует отметить, что в семенном потомстве в по-

чающимися климатическими условиями в популяциях

севах могут появляться единичные синецветковые рас-

вследствие морфогенетического процесса расширился

тения, что требует проведения сортовой прополки. Для

диапазон полиморфизма признаков и произошло мно-

предотвращения переопыления обязательно соблюдение

жество новых трансформаций. Спонтанная мутация

пространственной изоляции от других сортов и дикора-

окраски цветков, обнаруженная в старовозрастных

стущих популяций козлятника.

травостоях, подтверждает закономерности проявления

SSR-анализ с использованием маркеров, фланки-

вариабельности комбинации по этому и другим призна-

рующих микросателлитные последовательности генома,

кам в гетерогенных популяциях, имеющие отношение к

оказался малоинформативным на изучаемом материале.

закону гомологических рядов [24].

В общей выборке из 10 пар праймеров только три (VSspS

Методами последовательного репродуцирования по-

038, VSspS 066, VSspS 245) генерировали мономорфные

томств в нескольких поколениях и негативного отбора

фрагменты амплификации, не позволяющие оценить

удалось стабилизировать розовоцветковую и белоцвет-

уровень полиморфизма ДНК (рис. 1). С остальными ам-

ковую популяции. Было установлено, что в потомстве

плификация не прошла или была слабовыраженной. Это

козлятника с розоцветковой (сиреневой) окраской цвет-

можно объяснить, как неудачным подбором маркеров,

ков этот признак сохранили 98 % растений.

так и отсутствием различий в исследуемых областях

Образцы с белой окраской цветков отличаются не

генома вследствие узкой генетической основы анали-

только по фенотипу, но и по хозяйственно полезным

зируемого материала.

признакам. Они характеризуются слабой изменчивостью

Результаты анализа на основе 8 комбинаций SRAP-

количественных признаков, которая характеризуется

маркеров, разработанных для амплификации интрон-

коэффициентом вариации в пределах от 4,3 до 8,3 %, что

экзонных участков в геноме, показали, что сорт Вест,

подтверждают данные других авторов [11, 24].

наряду с общими фрагментами амплификации, харак-

Розовоцветковая популяция отличается от сорта Гале

терными для других образцов, отличался уникальным

более высокой облиственностью растений и содержани-

ДНК-спектром по 6 комбинациям. В качестве примера

Российская сельскохозяйственная наука, 2022, № 3

положенными на общей ветви генеалогического дерева

и на дендрограмме, построенной методом UPGMA

(невзвешенной попарной группировки с усреднением),

анализируемые образцы (рис. 3).

Рис. 1. Электрофореграмма ПЦР-продуктов, полученных

при амплификации образцов ДНК козлятника восточного

Рис. 3. UPGMA-дендрограмма генетического сходства

с SSR-праймерами: а) VSspS 245; б) VSspS 038; 1 -

между образцами козлятника восточного (Gale - сорт

белоцветковое растение; 2 - сорт Вест; 3 - сорт

Гале; Gale white - белоцветковая форма; West - сорт Вест).

Гале; К - отрицательный контроль (H₂O); M - маркер

молекулярной массы (100 bp DNA Ladder).

Таким образом, интродуцированные популяции коз-

лятника восточного в результате морфогенетического

приведены электрофореграммы с некоторыми из инфор-

процесса подвержены генетической изменчивости.

мативных праймеров. В частности, сорт Вест выделялся

Новые нетипичные признаки окраски цветков могут

наличием ампликонов размером 229 и 726 пар нуклео-

использоваться в селекции для создания сортов с мар-

тидов (п.н.) и отсутствием фрагментов ДНК размером

керными признаками. На основании отбора отдельных

1108 п.н. и 781 п.н., имеющихся в спектре сорта Гале и

биотипов из популяции сорта Гале были выделены

белоцветковой формы, с комбинациями праймеров МE3-

растения с различной окраской цветков. Методом после-

EM4, МE3-EM2 и МE3-EM5 соответственно (рис. 2).

довательного репродуцирования потомств в нескольких

Рис. 2. Электрофореграмма ПЦР-продуктов, полученных при амплификации образцов ДНК козлятника восточного с

использованием SRAP-праймеров: а) ME3-EM5; б) ME3-EM4; в) ME3-EM2; 1 - сорт Гале; 2 - Галле б/ц (белоцветковое

растение на основе сорта Галле); 3 - сорт Вест; M - маркер молекулярной массы (100 bp DNA Ladder).

По результатам, полученным с использованием

поколениях и негативного отбора, удалось стабилизи-

SRAP-маркеров МE1-EM5 и ME1-EM1, обнаружено

ровать розовоцветковую и белоцветковую популяции.

высокое сходство на генетическом уровне между со-

В потомстве козлятника с розовой окраской цветков

ртом Вест и белоцветковой формой, что подтверждало

такой признак сохранили 98 % растений. Эта популяция

и высокое значение индекса разнообразия по Нею (H_e)

после конкурсного испытания была зарегистрирована в

- 0,833 (см. табл.). Указанные образцы оказались рас-

Госреесте селекционных достижений как сорт козлят-

ника Вест с маркерным морфотипическим признаком -

Индексы генетического разнообразия по Нею для анализи-

розовой окраской цветков. Новый сорт характеризуется

руемых образцов козлятника восточного*

высокой продуктивностью. По сбору кормовой массы и

урожайности семян он превосходит сорт Гале на 15…34

Гале, синец-

Гале, бело-

Вест, розовоц-

Образец

%. Наличие маркерного фенотипического признака по-

ветковый

цветковый

ветковый

зволяет легко визуально идентифицировать сорт Вест

Гале

0,722

0,677

при ведении его семеноводства.

По результатам молекулярно-генетического ана-

Гале б/ц

0,325

0,833

лиза определены информативные комбинации SRAP-

Вест

0,406

0,182

маркеров ME3-EM4 и ME3-EM2, которые можно ис-

*над диагональю приведены индексы генетического сходства,

пользовать в качестве дополнительного инструмента

под диагональю - генетические дистанции; Галле б/ц - белоцвет-

при сортовой ДНК-идентификации и создании генети-

ковое растение, полученное из сорта Галле.

ческого паспорта нового сорта.

Российская сельскохозяйственная наука, 2022, № 3

Литература.

Latvian Journal of Agronomy / Agronomija Vestis. 2008.

Productivity of Galega (Galega orientalis) in single-

No. 10. P. 82-87.

species and binary crops with Sainfoin (Onobrychis

14. Малько А.М. Мировой рынок семян и место России в

arenaria): a case study of forest-steppe of European

нем // Картофель и овощи. - 2013. № 4. С. 2-4.

Russia / V.I. Cherniavskih, E.V. Dumacheva, F.N.

15. Bostyn S. J. R. Towards a Fair Scope of Protection

Lisetskii, et al. // Bioscience biotechnology research

for Plant Breeders’ Rights in an Era of New Breeding

communications. 2020. No. 13. (1) P. 15-22. doi:

Techniques: Proposals for a Modernization of the

10.1088/1742-6596/1942/1/012103.

Essentially Derived Variety Concept // Agronomy. 2021.

Технологические приемы формирования продуктив-

No. 11 (8). P. 1511. URL: https://www.mdpi.com/2073-

ности козлятника восточного / В.И. Турусов, А.М.

4395/11/8/1511 (дата обращения: 12.02.2022). doi:

Новичихин, Л.А. Пискарева и др. // Достижения науки

10.3390/agronomy11081511.

и техники АПК. 2016. Т. 30. № 3. С. 68-70.

16. Morphological Characteristics of Grapevine Cultivars

Сафина Н.В., Кильянова Т.В. Влияние покровной

and Closed Contour Analysis with Elliptic Fourier

культуры, способов посева и доз вносимых удобре-

Descriptors / M. Kupe, B. Sayıncı, B. Demir et al. //

ний на продуктивность козлятника восточного в

Plants. 2021. No. 10 (7). P. 1350. URL: https://www.

условиях Среднего Поволжья // Достижения науки

mdpi.com/2223-7747/10/7/1350 (дата обращение:

и техники АПК. 2015. Т. 29. № 10. С. 80-82.

15.02.2022). doi: 10.3390/plants10071350.

Иванова М. В., Плотников А. А. Сравнительная эф-

17. Assessment of the Genetic Diversity of Chrysanthemum

фективность бобово-злаковых травостоев на основе

Cultivars Using SSR Markers / A. Olejnik, K. Parkitna,

козлятника восточного (Galega orientalis Lam.) //

B. Kozak, et al. // Agronomy. 2021. No. 11 (11). P. 2318.

Достижения науки и техники АПК. 2019. Т. 33. № 1.

URL: https://www.mdpi.com/2073-4395/11/11/2318

С. 10-13. doi: 10.24411/0235-2451-2019-10103.

(дата обращения: 14.02.2022). doi: 10.3390/

Анализ симбиотической эффективности бактери-

agronomy11112318.

альных и грибных препаратов на кормовых культу-

18. Маркерные признаки сортов льна и их значение в

рах по данным урожайности семян / А.П. Юрков,

селекции и семеноводстве / С.Ф. Тихвинский, С.В.

Ю.В. Лактионов, А.П. Кожемяков и др. // Кормо-

Доронин, А.Н. Дудина и др. // Аграрная наука Евро-

производство. 2017. № 3. С. 16-21.

Северо-Востока. 2008. № 11. С. 42-44.

Дронова Т.Н., Бурцева Н.И., Кулик Д.К. Симбиотиче-

19. Журавель В.Н., Будилка Г.И., Вендель Г.В. Исполь-

ская деятельность и продуктивность многолетних

зование рецессивного маркерного признака бледно-

бобовых трав при использовании микробиологиче-

желтая окраска лепестков цветков в селекции

ских препаратов // Плодородие. 2018. № 5 (104). С.

горчицы сизой (Brassica juncea Czern.) // Научно-

61-63.

технический бюллетень Института масличных

Чернявских В.И., Думачева Е.В. Эффективность

культур НААН. 2018. № 26 (26) . С. 14-20.

совместных посевов козлятника восточного с

20. Эффективный способ выделения ДНК для ПЦР-

эспарцетом песчаным на семена // Кормопро-

анализа из «балк-образцов» проростков / И.А.

изводство. 2019. № 12. С. 21-25. doi: 10.25685/

Клименко, А.А. Антонов, В.А. Душкин и др. // Адап-

KRM.2019.2019.49854.

тивное кормопроизводство. 2021. № 3. С. 29-48. doi:

Rymuza K., Bombik A. Application of a logistic function

10.33814/AFP-2222-5366-2021-3-29-48.

to describe the growth of Fodder Galega // Journal of

21. Development of 65 novel polymorphic cDNA-SSR

Ecological Engineering. 2017. No. 18 (1). P. 125-131.

markers in common vetch (Vicia sativa subsp. sativa)

doi: 10.12911/22998993/66245.

using next generation sequencing / J.W. Chung, T.S.

Fodder galega (Galega orientalis Lam) grass potential

Kim, S. Suresh, et al. // Molecules. 2013. No. 18(7). P.

as a forage and bioenergy crop / H. Meripõld, U. Tamm,

8376-8392.

S.Tamm, et al. // Agronomy Research. 2017. No. 15(4).

22. Li G., Quiros C. F. Sequence-related amplified

P. 1693-1699.

polymorphism (SRAP), a new marker system based on

10. Золотарев В.Н. Перспективы и проблемные аспекты

a simple PCR reaction: its application to mapping and

использования козлятника восточного в кормопроиз-

gene tagging in Brassica // Theoretical and applied

водстве России: состояние и направления селекции

genetics. 2001. No. 103 (2). P. 455-461.

// Кормопроизводство. 2021. № 5. С. 35-46. doi:

23. Assessment of genetic diversity in Galega officinalis

10.25685/KRM.2021.40.11.001.

L. using ISSR and SRAP markers / Z. Wang, J.E.

11. Сорта и перспективные образцы козлятника вос-

Wang, X.M. Wang, et al. // Genetic resources and crop

точного селекции Псковского института сельского

evolution. 2012. No. 59(5). P. 865-873.

хозяйства / Т.В. Шайкова, В.С. Баева, Н.С. Рогозина,

24. Bushuyeva V.I. The use of the regularities of manifestation

et al. // Владимирский земледелец. 2019. № 4 (90). С.

of hereditary variability characteristics in legumes in

72-76. doi: 10.24411/2225-2584-2019-10099.

the selection of galega orientalis (Book Chapter) //

12. Авраменко М.Н., Бушуева В.И. Оценка исходного

Ecological consequences of increasing crop productivity:

материала галеги восточной в коллекционном пи-

Plant breeding and biotic diversity. New York: Apple

томнике // Вестник Белорусской государственной

Academic Press, Inc., 2014. P. 277-286.

сельскохозяйственной академии. 2012. № 1. С. 64-

25. Золотарев В.Н., Коровина В.Л. Сорт козлятника

69.

восточного (Galega orientalis Lam.) с маркерным при-

13. Baležentienė L. Bio-morphological peculiarities of new

знаком // Адаптивное кормопроизводство. 2021. № 1.

cultivars of fodder galega (Galega orientalis Lam.) //

С. 6-14. doi: 10.33814/AFP-2222-5366-2021-1-6-14.

Поступила в редакцию 04.03.2022

После доработки 30.03.2022

Принята к публикации 25.04.2022