ВЕТЕРИНАРИЯ И ЗООТЕХНИЯ

Э.К. Рахматуллин, доктор ветеринарных наук

О.Д. Скляров, доктор ветеринарных наук

Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов

РФ, 123022, г. Москва, Звенигородское шоссе, 5

E-mail: amil59@yandex.ru

УДК 577.1+619:615

DOI: 10.30850/vrsn/2020/1/67-69

ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПРЕПАРАТА «BISOLBI»

В статье представлены результаты изучения токсичности препарата «Bisolbi» - порошка светло-пепельного цвета, плохо

растворимого в воде. При смешивании с водой образует взвесь частиц, которые быстро оседают. Показатели острой ток-

сичности препарата определяли на крысах. Исследовали группы по шесть животных одного пола, а также аналогичные -

контрольные. Препарат «Bisolbi» вводили белым крысам внутрижелудочно, самцам массой 310…320 г в дозах 2500 и 2740 мг/

кг. Каждую дозу использовали на шести животных, для контрольных - дистиллированную воду - 3 мл. Рассчитывали ЛД₅₀

методом пробит - анализа, предложенным Литчфилдом и Уилкоксоном в модификации З. Рота. При пероральном введении

препарата атравматичный металлический зонд погружали до желудка. В течение 14 сут. наблюдали за общим состоянием

и поведением животных, проявлением или отсутствием симптомов интоксикации; отмечали особенности приема корма и

воды, оценивали состояние шерстного покрова, физиологические функции. Затем группы экспериментальных крыс подверга-

ли эвтаназии и патоморфологическому исследованию. Изучали действие «Bisolbi» при многократном введении и на беспород-

ных собаках. Были скомплектованы две группы 3-4-летнего возраста средней исходной массой тела 13,63…15,11 кг. Перед

применением добавку тщательно перемешивали с кормом. Препарат вводили в течение 31 сут. в дозе 0,5 г/кг. Собакам кон-

трольной группы (три) скармливали муку пшеничную. Через 15 и 31 день у подопытных животных с целью характеристики

общего состояния в крови определяли количество белка, мочевины, глюкозы, креатинина, холестерина. На основании иссле-

дований установлено, что препарат при ежедневном применении животным малотоксичен и безопасен, не провоцирует раз-

витие патологических реакций. По классификации Hodge и Sterner, «Bisolbi» можно отнести к 6 классу токсичности - от-

носительно безвредный. Согласно ГОСТ 12.1.007-76 ЛD₅₀ препарата составляет более 151 мг/кг, но менее 5000 мг/кг - 3-й

класс опасности (умеренно опасный).

Ключевые слова: кормовая добавка, токсичность, Bisolbi, ЛД_50,общий белок, мочевина, глюкоза, билирубин, холестерин, кре-

атинин, аспартат - и аланинаминотрасферазы (АсАТ и АлАТ) и лактатдегидрогеназа (ЛДГ).

E.K. Rakhmatullin, Grand PhD in Veterinary sciences

O.D. Sklyarov, Grand PhD in Veterinary sciences

All-Russian State Center for Quality and Standardization of Medicines for Animals and Feed

RF, 123022, g. Moskva, Zvenigorodskoe shosse, 5

E-mail: amil59@yandex.ru

TOXICOLOGICAL PROFILE OF “BIOSOLBI” DRUG

The article presents the results of a study of the “Bisolbi” drug toxicity (powder of light ash color, poorly soluble in water). When it is mixed

with water it forms a suspension of particles that settle rapidly. Values of acute drug toxicity were determined on rats. We studied groups of

six animals of the same sex, as well as similar control ones. The “Bisolbi” drug was injected to white rats intragastrically, males weighing

310... 320 g in doses of 2500 and 2740 mg/kg. Each dose was used in six animals; distilled water (3 ml) was used for the controls. The

LD50 was calculated by the probit analysis method proposed by Litchfield and Wilcoxon modified by Z. Roth. When administered orally,

ВЕТЕРИНАРИЯ И ЗООТЕХНИЯ

an atraumatic metal probe was immersed in the stomach. Within 14 days monitored the overall health status and behavior of animals, the

manifestation or absence of symptoms of intoxication; noted the features of feed and water ingestion, assessed the condition of the coat,

physiological functions. Then groups of experimental rats were euthanized and pathomorphologically examined. We studied the effect of

“Bisolbi” with repeated introduction and on not purebred dogs. Two groups of 3-4 years of age were completed with an average initial body

weight of 13.63...15.11 kg. Before use, the additive was thoroughly mixed with feed. The drug was injected during 31 days at a dose of 0.5 g/

kg. Dogs of the control group (three) were fed wheat flour. After 15 and 31 days in laboratory animals in order to characterize the general

condition in the blood, the amount of protein, urea, glucose, creatinine, cholesterol were determined. Based on studies it was found that the

drug daily application by animals, is low toxic and safe, does not provoke the development of pathological reactions. According to the Hodge

and Sterner classification “Bisolbi” can be attributed to the 6th class of toxicity - relatively harmless. Accordingto GOST 12.1.007-76

LD50 of the drug is more than 151mg/kg, but less than 5000 mg/kg it is the 3rd hazard class (moderately hazardous).

Key words: feed additive, toxicity, Bisolbi, LD50, total protein, urea, glucose, bilirubin, cholesterol, creatinine, aspartate and alanine

aminotransferase (AcAT and AlAT) and lactate dehydrogenase (LDH).

Биологически полноценное кормление живот-

плектованы две группы 3-4-летнего возраста сред-

ных и домашней птицы невозможно без использо-

ней исходной массой тела 13,63…15,11 кг. Перед

вания кормовых добавок, которые предназначены

применением добавку тщательно перемешивали с

для восполнения недостающих элементов питания

кормом. Препарат вводили в течение 31 сут. в дозе

в рационах. Это способствует не только проявле-

0,5 г/кг. Собакам контрольной группы (три) скарм-

нию генетического потенциала продуктивности, но

ливали муку пшеничную. Через 15 и 31 день у по-

и предотвращению нарушения обмена веществ и

допытных животных с целью характеристики обще-

связанных с ним различных заболеваний. Значение

го состояния в крови определяли количество белка,

кормовых добавок особенно возрастает при огра-

мочевины, глюкозы, креатинина, холестерина.

ниченном наборе кормов в рационе, однообразии

Содержание общего белка определяли по биу-

кормления, когда до нормы недостает одновремен-

ретовой реакции, глюкозы - унифицированным

но нескольких питательных элементов, что отрица-

глюкозооксидазным методом по окислению орто-

тельно сказывается на здоровье животных и произ-

толидина, мочевины - унифицированным мето-

водстве продукции, а также существенно повышает

дом по цветной реакции с диацетилмонооксимом,

затраты кормов. Полноценное питание - основное

холестерина в сыворотке крови - методом Илька.

условие обеспечения оптимального течения обмен-

Концентрацию общего билирубина выявляли ко-

ных процессов, нормального функционирования

лориметрическим методом с 2,4-дихлоранилином,

всех органов и систем организма. [1]

креатинина - по цветной реакции Яффе. Актив-

Обязательное условие применения новых кор-

ность АлАТ и АсАТ оценивали унифицированным

мовых добавок - предшествующее проведение ток-

динитрофенилгидразиновым методом, лактатдеги-

сикологических исследований.

дрогеназы (ЛДГ) в сыворотке крови - по реакции

Цель работы - изучение токсических свойств

2,4 - динитрофенилгидрозином (метод Севела -

кормовой добавки «Bisolbi».

Товарека). [3, 7]

Содержание и уход за экспериментальными

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

животными соответствовали ГОСТу

33216-2014.

Данные экспериментальных исследований обраба-

В состав препарата входят бактерии груп-

тывали методом вариационной статистики [5], зна-

пы Bacillus subtilis и минеральный наполнитель.

чимость различий устанавливали по величине кри-

«Bisolbi» представляет собой порошок светло-пе-

терия Стьюдента.

пельного цвета, плохо растворимый в воде. При

смешивании с водой образует взвесь частиц, кото-

РЕЗУЛЬТАТЫ

рые быстро оседают.

Показатели острой токсичности препарата опре-

Ни в одном из случаев при внутрижелудочном

деляли на крысах. Исследовали группы по шесть

использовании летальных исходов не зарегистри-

животных одного пола, а также аналогичные - кон-

ровано, даже при введении максимальной дозы -

трольные.

2740 мг/кг (табл. 1). Также не отмечалось значимых

В работе применяли методы доклинических ис-

нарушений общего состояния и поведения жи-

следований лекарственных средств. [4]

вотных. Жажда и снижение потребления корма в

Препарат «Bisolbi» вводили белым крысам вну-

первые сутки проявлялись и в контрольной группе

трижелудочно, самцам массой 310…320 г в дозах

животных, что, вероятно, связано не с токсическим

2500 и 2740 мг/кг. Каждую дозу использовали на

действием препарата, а со стрессом при перораль-

шести животных, для контрольных - дистиллиро-

ном введении больших объемов. Общее состояние и

ванную воду - 3 мл. Рассчитывали ЛД₅₀методом

поведение опытных животных и контрольных были

пробит - анализа, предложенным Литчфилдом и

аналогичными.

Уилкоксоном в модификации З. Рота. При перо-

Через две недели после применения «Bisolbi»

ральном введении препарата атравматичный метал-

животные, получившие препарат, не отличались от

лический зонд погружали до желудка.

контрольных.

В течение 14 сут. наблюдали за общим состоя-

нием и поведением животных, проявлением или

Таблица 1.

отсутствием симптомов интоксикации; отмеча-

Токсичность препарата «Bisolbi» при внутрижелудочном введе-

ли особенности приема корма и воды, оценивали

нии крысам

состояние шерстного покрова, физиологические

функции. Затем группы экспериментальных крыс

Доза мг/кг

2410

2740

подвергали эвтаназии и патоморфологическому ис-

следованию.

Объем вводимого раствора, мл/кг

24,1

27,4

Изучали действие «Bisolbi» при многократном

Эффект, пало/всего

0/6

введении и на беспородных собаках. Были ском-

ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ НАУКИ • № 1-2020

ВЕТЕРИНАРИЯ И ЗООТЕХНИЯ

Значения ЛД₅₀ препарата при внутрижелудочном

водил к гибели, не вызывал макроскопических из-

введении белым крысам определить не представля-

менений внутренних органов животных.

ется возможным - они заведомо выше 2740 мг/кг.

По классификации Hodge и Sterner (1943), а так-

Дозы более 2200 мг/кг не приводили к их гибели, не

же по данным патоморфологических исследований

оказывали раздражающего действия на слизистые

препарат «Bisolbi» можно отнести к 6 классу токсич-

органы пищеварительного тракта.

ности - относительно безвредным [6].

Таким образом, результаты токсикометрии, на-

Согласно ГОСТ 12.1.007-76 ЛD₅₀ препарат отно-

блюдения за экспериментальными животными

сится к 3 классу опасности - веществам умеренно

после введения «Bisolbi», а также результаты пато-

опасным. [2]

морфологических исследований позволяют отнести

препарат по классификации токсичности Hodge и

СПИСОК ИСТОЧНИКОВ

Sterner к 4 классу (малотоксичные вещества). Со-

1. Афанасьев, К.А. Несбалансированное кормление как

стояние переживших острые эксперименты живот-

причина нарушения минерального обмена у коров /

ных свидетельствует о хорошей переносимости и

К.А. Афанастев // Вестник Алтайского государствен-

безвредности препарата.

ного аграрного университета, - Барнаул, - 2017. -

Согласно ГОСТ 12.1.007-76 ЛD₅₀препарата со-

№ 4 (150). - С. 110-115.

ставляет менее 5000 мг/кг - 3 класс опасности -

2. ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности

умеренно опасный. [2]

труда (ССБТ). Вредные вещества. Классификация

При ежедневном пероральном введении со-

и общие требования безопасности (с Изменениями

бакам 0,5 г/кг «Bisolbi» общее состояние и поведе-

N 1, 2).

ние опытных животных не изменялось, угнетение,

3. Кондрахин, И.П. Методы ветеринарной клинической

токсикоз и гибель отсутствовали. Необходимо от-

лабораторной диагностики. Справочник / И.П. Кон-

метить, что внутрижелудочное введение «Bisolbi» в

драхин - М.: КолосС. - 2004. - 520 с.

дозе 0,5 г/кг существенно не влияло на колебания

4. Руководство по проведению доклинических исследо-

биохимических показателей крови (табл. 2). Так,

ваний лекарственных средств. Часть первая. / Под об-

через 15 сут. количество креатина увеличилось на

щей редакцией доктора медицинских наук А.Н. Миро-

12,6%, активность ЛДГ повысилась на 9,8, а АсАТ -

нова - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.

на 100,6, АлАТ - на 284,7%.

5. Солнцева, О.В. Анализ статистических данных в паке-

Через 31 сутки после введения препарата коли-

те STATISTICA. Практическое руководство для поль-

чество креатинина увеличилось на 10,6%, актив-

зователей. / О.В. Солнцева, А.В. Севастьянов - Улья-

ность ЛДГ понизилась на 26,7%, АсАТ повысилась

новск, ГСХА. - 2004. - 43 с.

на 43%, АлАТ - на 259,8%.

6. Hodge H., Sterner К. Clinical Toxicology of Commercial

По мере поступления препарата происходит

Products. Acute Poisoning. Ed. IV, Baltimor. - 1975. -

адаптация организма животных к его действию. Ха-

427 p.

рактер изменения показателей свидетельствует о

7. Schirmeister, J. Dtsch /J. Schirmeister, H. Willmann,

том, что в метаболизме препарата активно участвует

H. Kiefer et al. //Med. Wschr, 89 (1984) 1640.

печень, «Bisolbi» обладает гепатопротекторным дей-

ствием.

LIST OF SOURCES

Кормовая добавка при внутрижелудочном вве-

1. Afanas`ev, K.A. Nesbalansirovannoe kormlenie kak

дении собакам в течение 31 суток в дозе 0,5 г/кг не

prichina narusheniya mineral`nogo obmena u korov /

оказывает отрицательного влияния на состояние,

K.A. Afanastev // Vestnik Altajskogo gosudarstvennogo

поведение животных и на биохимические показате-

agrarnogo universiteta, - Barnaul, - 2017. - № 4 (150). -

ли крови.

S. 110-115.

По результатам данного исследования мож-

2. GOST 12.1.007-76 Sistema standartov bezopasnosti truda

но сделать обоснованное заключение о том, что

(SSBT). Vredny`e veshhestva. Klassifikaciya i obshhie

«Bisolbi» - безопасный и не оказывающий токси-

trebovaniya bezopasnosti (s Izmeneniyami N 1, 2).

ческого действия при многократном применении

3. Kondraxin, I.P. Metody` veterinarnoj klinicheskoj

препарат.

laboratornoj diagnostiki. Spravochnik / I.P. Kondraxin -

Уровни летальных доз «Bisolbi» для белых крыс

M.: KolosS. - 2004. - 520 s.

при внутрижелудочном введении находятся выше

4. Rukovodstvo po provedeniyu doklinicheskix issledovanij

2740 мг/кг. Препарат при введении в желудок в мак-

lekarstvenny`x sredstv. Chast` pervaya. / Pod obshhej

симально возможных дозах белым крысам не при-

redakciej doktora medicinskix nauk A.N. Mironova - M.:

Grif i K, 2012. - 944 s.

5. Solnceva, O.V. Analiz statisticheskix danny`x v pakete

Таблица 2.

STATISTICA. Prakticheskoe

rukovodstvo

dlya

Биохимические показатели крови собак

pol`zovatelej.

/ O.V. Solnceva, A.V. Sevast`yanov

после введения «Bisolbi» (0,5 г/кг)

Ul`yanovsk, GSXA. - 2004. - 43 s.

6. Hodge H., Sterner К. Clinical Toxicology of Commercial

Показатель

15 суток

Контроль

31 суток

Контроль

Products. Acute Poisoning. Ed. IV, Baltimor. - 1975. -

427 p.

Общий белок, г/л

62,53±3,14

59,8±1,49

63,8±2,7

65,2±5,3

7. Schirmeister, J. Dtsch /J. Schirmeister, H. Willmann,

Глюкоза, ммоль/л

7,9±1,08

7,06±0,02

7,3±0,16

7,28±0,42

H. Kiefer et al. //Med. Wschr, 89 (1984) 1640.

Мочевина, ммоль/л

10,5±2,48

13,3±1,06

18,7±2,65

18,04±1,51

Креатинин, мкмоль/л

124,4±9,72

142,3±8,21

88,4±6,13

98,9±4,05

Билирубин, мкмоль/л

33,4±10,21

29,8±12,54

5,23±2,71

4±1,53

Холестерин, ммоль/л

4,5±0,77

4,33±0,38

3,88±0,54

3,64±0,06

АсАТ, Е/л

44±8,6

21,97±2,51

26,1±5,85

18,23±1,99

АлАТ, Е/л

120,8±91

31,4±1,59

73±54,5

20,3±2,7

ЛДГ, Е/л

134,7±20,7

122±6,43

203,7±54,8

277,7±57,7