АГРОНОМИЯ

М.Г. Маркова, научный сотрудник

Е.Н. Сомова, старший научный сотрудник

Удмуртский Федеральный исследовательский центр Уральского отделения РАН

РФ, 426067, Республика Удмуртия, г. Ижевск, ул. Т. Барамзиной, 34

Е-mail: ugniish-nauka@yandex.ru

УДК 634.75:635.032.034

DOI: 10.30850/vrsn/2020/4/66-68

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРОДУКТОВ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ ЛИЧИНОК

БОЛЬШОЙ ВОСКОВОЙ МОЛИ В КЛОНАЛЬНОМ МИКРОРАЗМНОЖЕНИИ

ЗЕМЛЯНИКИ САДОВОЙ

Работы по клональному микроразмножению земляники сводятся к поиску новых регуляторов роста, к которым относится

биологически активное вещество - продукт жизнедеятельности восковой моли Galleria mellonella L. (ПЖВМ). Приведены

данные 2018-2020 годов по влиянию ПЖВМ на эффективность клонального микроразмножения земляники (Fragaria х anan-

assa duch) в условиях in vitro и in vivo. Объекты исследований - микрочеренки, укорененные микрочеренки и адаптированные

микрорастения земляники садовой сорта Корона и ремонтантной сорта Брайтон. Выявлено, что на этапе пролиферации

коэффициент размножения по сорту Корона существенно увеличился с внесением в питательную среду ПЖВМ в дозах 4,0

и 6,0 мг/л и составил 4,2 и 3,8 шт/экспл. соответственно; по сорту Брайтон коэффициент при дозе ПЖВМ 2,0 мг/л возрос

до 4,6 шт/экспл. На выход пригодных для укоренения микрочеренков сорта Брайтон существенное влияние оказало внесение

в питательную среду ПЖВМ в дозах 4,0 и 6,0 мг/л: выход составил 95,5 и 94,1 % соответственно, 87,7 % в контроле. По сорту

Корона существенного положительного влияния ПЖВМ на данный показатель не отмечено. Укореняемость микрочеренков

земляники обоих сортов значительно увеличилась с внесением в питательную среду ПЖВМ во всех изучаемых дозах - Корона

86,4-100, Брайтон - 88,9-100 %. Приживаемость адаптируемых микрочеренков земляники сорта Корона составила 100 %

при опрыскивании водным раствором ПЖВМ в дозе 4,0 мг/л; максимальная приживаемость микрочеренков сорта Брай-

тон - 99,8 % в варианте с опрыскиванием водным раствором ПЖВМ в дозе 6,0 мг/л.

Ключевые слова: клональное микроразмножение,укоренение, адаптация, продукты жизнедеятельности восковой моли,

земляника садовая.

M.G. Markova, researcher

E.N. Somova, senior researcher

Udmurt Federal Research Center of the Ural Branch of the RAS

RF, 426067, Respublika Udmurtiya, g. Izhevsk, ul. T. Baramzinoj, 34

Е-mail: ugniish-nauka@yandex.ru

USING OF LARGE WAX MOTH LARVAE PRODUCTS EXCRETED

IN CLONAL MICROREPRODUCTION OF GARDEN STRAWBERRY

Work on the clonal micropropagation of strawberries comes down to the search for new growth regulators, which include a biologically ac-

tive substance - the waste product of the wax moth Galleria mellonella L. The effect of the waste product of the wax moth on the efficiency

of clonal micropropagation of strawberries (Fragaria х ananassa duch) in vitro and in vivo conditions in 2018-2020 is shown. The object

of research is micro-cuttings, rooted micro-cuttings and adapted micro-plants of garden strawberries of the Korona variety and of the re-

montant strawberries of the Brighton variety. It was revealed that at the proliferation stage, the propagation coefficient of the Korona variety

increased significantly with the introduction of the waste product of the wax moth in doses of 4.0 mg/L and 6.0 mg/L and amounted to 4.2

and 3.8 pcs./explant, respectively; for Brighton variety, the coefficient increased significantly when the dose of the waste product of the wax

moth 2.0 mg/L and amounted to 4.6 pcs./explant. The introduction of the waste product of the wax moth in doses of 4.0 mg/L and 6.0 mg/L

into the nutrient medium had a significant effect on the yield of Brighton micro-cuttings suitable for rooting: the yield was 95.5 and 94.1 %,

respectively 87.7 % in the control. For the Korona variety, no significant positive effect of the waste product of the wax moth on this indicator

was noted. The rooting of micro-cuttings of strawberries of both varieties significantly increased with the introduction of the waste product

of the wax moth into the nutrient medium in all studied doses and amounted to 86.4-100 % in the Korona variety, and 88.9-100 % in the

Brighton variety. The survival rate of adaptable micro-cuttings of Corona variety strawberries when sprayed with an aqueous solution of the

waste product of the wax moth at a dose of 4.0 mg/L was 100 %; the maximum survival rate of micro-cuttings Brighton variety is 99.8 % in

the variant with spraying with an aqueous solution of the waste product of the wax moth at a dose of 6.0 mg/L.

Key words: clonal micropropagation, rooting, adaptation, waste products of the wax moth, garden strawberry.

Метод in vitro дает возможность быстро размножать

активные вещества. Одно из таких веществ - продукт

единичные растения, проводить работы независимо

жизнедеятельности восковой моли (ПЖВМ), который

от погодных условий и сезонности, получать здоровый

функционирует так же, как и биогумус. Поэтому его

материал с увеличенным потенциалом к дальнейшему

изучение представляет большой интерес на раститель-

размножению. [5] Традиционно повышение эффек-

ных объектах, в том числе в клональном микроразм-

тивности клонального микроразмножения растений

ножении садовых культур. [2, 3]

достигается путем оптимизации состава питательной

ПЖВМ представляет собой рассыпчатое вещество

среды и условий культивирования, для чего исполь-

черного цвета (размер частиц от 0,1 мм до 3 мм),

зуют синтетические регуляторы роста и биологически

с приятным запахом пчелопродуктов содержит зна-

ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ НАУКИ • № 4-2020

АГРОНОМИЯ

Таблица 1.

Пролиферация микрочеренков земляники в зависимости от продуктов жизнедеятельности восковой моли в условиях in vitro

Корона

Брайтон

Коэффициент

Выход пригодных

Коэффициент

Выход пригодных

Вариант

размножения,

для укоренения

размножения,

для укоренения

шт/экспл.

микрочеренков,%

шт/экспл.

микрочеренков,%

МС+6-БАП 0,5мг/л (контроль)

3,3

96,3

3,9

87,7

МС+6-БАП 0,5мг/л + 2,0 мг/л ПЖВМ

3,4

96,2

4,6

90,9

МС+6-БАП 0,5мг/л+ 4,0 мг/л ПЖВМ

4,2

95,2

3,9

95,5

МС+6-БАП 0,5мг/л+ 6,0 мг/л ПЖВМ

3,8

96,5

3,7

94,1

НСР₀₅

0,5

3,1

0,1

5,4

чительное количество калия, фосфатов, магния,

ствие оказало внесение в питательную среду ПЖВМ

цинка и железа, а также микроэлементы: медь, марга-

в дозах 4,0 и 6,0 мг/л: в сравнении с контролем

нец, селен, хром, молибден, кобальт, следы кремния,

(3,3 шт/экспл.), коэффициент размножения соста-

ванадия и серебра. [1, 4]

вил 4,2 и 3,8 шт/экспл. соответственно при НСР₀₅

Переход из стерильных условий в нестерильные -

0,5 шт/экспл. (табл. 1). На выход пригодных для

стресс для микрорастений. На успех адаптации вли-

укоренения микрочеренков земляники внесение в

яют как оптимальное соотношение развития надзем-

питательную среду ПЖВМ не оказало влияния. Ко-

ной части и корневой системы, так и использование

эффициент размножения по сорту Брайтон суще-

новых регуляторов роста, обеспечивающих эффек-

ственно увеличился с добавлением ПЖВМ только

тивную приживаемость посадочного материала. [6]

в дозе 2,0 мг/л и составил 4,6 шт/экспл. при НСР₀₅

Цель исследований - выявить влияние продуктов

0,1 шт/экспл. На выход пригодных для укоренения

жизнедеятельности восковой моли на эффективность

микрочеренков сорта Брайтон существенно подей-

клонального микроразмножения земляники садовой.

ствовало внесение в питательную среду ПЖВМ в

дозах 4,0 и 6,0 мг/л: выход - 95,5 и 94,1 % соответ-

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

ственно, при 87,7 % в контроле и НСР₀₅ 5,4 %.

Значительному увеличению укореняемости ми-

Клональное микроразмножение земляники

крочеренков сорта Корона (86,4…100 % при НСР₀₅

выполняли в светокомнате лаборатории Удмурт-

3,1 %) способствовало внесение в питательную сре-

ского НИИСХ при освещенности - 75…85 мМоль/

ду ПЖВМ во всех дозах (контроль 76,6 %). Отмечено

м² с^-1, температуре 22…25⁰С, относительной влаж-

также положительное влияние ПЖВМ во всех из-

ности воздуха 70…75 % и 16-часовом световом дне.

учаемых дозах на количество нормально развитых

Адаптация проходила на первом этапе (15 сут.) в суб-

листьев и корней укорененных микрочеренков, на

страте на основе верхового торфа в минипарниках

высоту розеток и длину корней сорта Корона поло-

при влажности 100 % и температуре воздуха 22…27⁰С,

жительного действия ПЖВМ не выявлено (табл. 2).

на втором - в отдельных контейнерах объемом 0,4 л

Аналогичная тенденция прослеживается по со-

в субстрате на основе верхового и низинного торфа в

рту Брайтон: в сравнении с контролем (80,0 %), уко-

соотношении 1:1 и влажности 50…60 %.

реняемость микрочеренков возросла до 88,9…100 %

На этапе пролиферации, помимо 6-бензилами-

во всех изучаемых вариантах внесения ПЖВМ в пи-

нопурина (6-БАП) в концентрации 0,5 мг/л, вносили

тательную среду при НСР₀₅ 1,7 %. Положительное

в питательную среду Мурасиге-Скуга (МС) перед ав-

влияние ПЖВМ отмечено как на число нормально

токлавированием - ПЖВМ в концентрациях 2, 4 и

развитых листьев, так и на количество корней уко-

6 мг/л; при укоренении, наряду с добавлением 0,5 мг/л

рененных микрочеренков. Высота розеток и длина

индолил-3-масляной кислоты (ИМК), добавляли - 1,

корней сорта не зависели от доз ПЖВМ.

2 и 3 мг/л Мурасиге-Скуга с половинной дозой макро-

На этапе адаптации укорененных микрочерен-

и микросолей (МС ¹/₂). В период адаптации микрора-

ков in vivo земляники сорта Корона при опрыскива-

стения двукратно с интервалом 5 дн. опрыскивали во-

нии водным раствором ПЖВМ в дозе 4,0 мг/л, при-

дным раствором ПЖВМ - 2, 4, 6 мг/л, в контрольном

живаемость составила 100 %, контроль - 91,8 % и

варианте - дистиллированной водой.

НСР₀₅ - 2,8 % (см. рисунок).

Объекты исследований на этапах: пролифера-

ции - микрочеренки, укоренения - укорененные

микрочеренки, адаптации - адаптированные ми-

крорастения земляники сортов Корона и Брайтон.

Ростовые параметры адаптированных микро-

растений определяли согласно ГОСТ Р 54051-2010.

Статистическую обработку экспериментальных

данных проводили методом дисперсионного анали-

за по Доспехову Б.А.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Влияние продуктов жизнедеятельности

При культивировании микрочеренков земля-

восковой моли (ПЖВМ) на приживаемость

ники садовой сорта Корона положительное воздей-

микрорастений земляники в условиях in vivo, %.

АГРОНОМИЯ

Таблица 2.

Укореняемость и биометрические показатели укорененных микрочеренков земляники

в зависимости от внесения ПЖВМ в условиях in vitro

Вариант

Укореняемость, %

Высота розеток, мм

Число листьев, шт.

Длина корней, мм

Количество корней, шт.

Корона

МС ¹/₂+ ИМК 0,5мг/л (контроль)

76,6

2,8

3,5

МС ¹/₂+ ИМК 0,5мг/л + 1,0 мг/л ПЖВМ

89,4

3,2

4,6

МС ¹/₂+ ИМК 0,5мг/л + 2,0 мг/л ПЖВМ

100

3,8

5,8

МС ¹/₂+ ИМК 0,5мг/л + 3,0 мг/л ПЖВМ

97,0

3,6

5,9

МС ¹/₂+ ИМК 0,5мг/л + 4,0 мг/л ПЖВМ

86,4

3,0

4,8

НСР₀₅

2,1

Брайтон

МС ¹/₂+ ИМК 0,5мг/л (контроль)

80,0

3,2

3,8

МС ¹/₂+ ИМК 0,5мг/л + 1,0 мг/л ПЖВМ

94,7

3,5

5,6

МС ¹/₂+ ИМК 0,5мг/л + 2,0 мг/л ПЖВМ

100

4,2

6,8

МС ¹/₂+ ИМК 0,5мг/л + 3,0 мг/л ПЖВМ

98,6

4,3

6,7

МС ¹/₂+ ИМК 0,5мг/л + 4,0 мг/л ПЖВМ

88,9

4,0

5,8

НСР₀₅

1,7

Приживаемость адаптируемых укорененных ми-

органы мышей / А.С. Осокина, Е.А. Михеева, Т.В. Ба-

крочеренков земляники сорта Брайтон достовер-

бинцева // Вестник Новосибирского государствен-

но, в сравнении с контролем (96,3 %), увеличилась

ного аграрного университета. - 2018. - № 2 (47). -

при обработке растений водным раствором ПЖВМ

С. 91-101.

в дозе 6,0 мг/л до 99,8 %, НСР₀₅ 2,8 %. Все адапти-

5. Технология получения оздоровленного от вирусов

рованные микрорастения земляники к концу этапа

посадочного материала плодовых и ягодных культур:

соответствовали ГОСТ Р 54051-2010, то есть число

метод. указания. - М.: ФГБНУ «Росинформагротех»,

нормально развитых листьев было не менее 3,0 шт/

2013. - 92 с.

раст., а высота розеток - не менее 2,0 см.

6. Subin , A. Adaptation of regenerated strawberry plants to ex

Таким образом, в период пролиферации коэффи-

vitro using biological preparations / A. Subin, G. Tkalen-

циент размножения сорта Корона существенно уве-

ko, V. Boroday, A. Likhanov // Агробіологія. - 2016. -

личился с внесением в питательную среду ПЖВМ

№ 2 (128). - С. 85-90.

в дозах 4,0 и 6,0 мг/л и составил 4,2 и 3,8 шт/экспл.

соответственно; у Брайтона коэффициент значи-

LIST OF SOURCES

тельно возрос при дозе ПЖВМ 2,0 мг/л - 4,6 шт/

1. Dykman, L.A. Vzaimodejstvie rastenij s nanochasticami

экспл. Укореняемость микрочеренков земляники

blagorodnyh metallov / L.A. Dykman, S.Yu. Shchegolev //

обоих сортов значительно увеличилась с внесени-

Sel'skohozyajstvennaya biologiya. - 2017. - T. 52. -

ем в питательную среду ПЖВМ во всех изучаемых

№ 1. - S. 13-24.

дозах: Корона - 86,4…100, Брайтон - 88,9…100 %.

2. Markova, M.G. Sposob ukoreneniya remontantnoj zemly-

Максимальная приживаемость адаптируемых ми-

aniki v kul'ture in vitro / M.G. Markova, E.N. Somova,

крочеренков земляники сорта Корона - 100 %, Брай-

A.S. Osokina, L.M. Kolbina - patent № 2715695 Rossi-

тон - 99,8 % при опрыскивании водным раствором

jskaya Federaciya. № 2019116042: zayavl. 24.05.2019;

ПЖВМ в дозе 4,0 и 6,0 мг/л соответственно.

opubl. 02.03.2020. Byul. № 7.

3. Osokina, A.S. Biologicheskie osnovy razvedeniya bol'shoj

СПИСОК ИСТОЧНИКОВ

voskovoj moli (Galleria mellonella L.) kak istochnika

1. Дыкман, Л.А. Взаимодействие растений с наночасти-

biologicheski aktivnyh veshchestv

/A.S. Osokina,

цами благородных металлов / Л.А. Дыкман, С.Ю. Ще-

L.M. Kolbina, A.V. Gushchin - monografiya. Izhevsk:

голев // Сельскохозяйственная биология. - 2017. -

Izdatel'stvo Anny Zeleninoj. - 2019. - 166 s. ISBN 978-

Т. 52. - № 1. - С. 13-24.

5-6042106-5-9.

2. Маркова, М.Г. Способ укоренения ремонтантной зем-

4. Osokina, A.S. Vliyanie spirtovogo ekstrakta bol'shoj vosk-

ляники в культуре in vitro / М.Г. Маркова, Е.Н. Сомова,

ovoj moli (Galleria mellonella) na vnutrennie organy mys-

А.С. Осокина, Л.М. Колбина - патент № 2715695 Рос-

hej / A.S. Osokina, E.A. Miheeva, T.V. Babinceva // Vest-

сийская Федерация. № 2019116042: заявл. 24.05.2019;

nik Novosibirskogo gosudarstvennogo agrarnogo universi-

опубл. 02.03.2020. Бюл. № 7.

teta. - 2018. № 2 (47). - S. 91-101.

3. Осокина, А.С. Биологические основы разведения

5. Tekhnologiya polucheniya ozdorovlennogo ot virusov

большой восковой моли (Galleria mellonella L.) как ис-

posadochnogo materiala plodovyh i yagodnyh kul'tur:

точника биологически активных веществ /А.С. Осоки-

metod. ukazaniya. - M.: FGBNU «Rosinformagrotekh»,

на, Л.М. Колбина, А.В. Гущин - монография. Ижевск:

2013. - 92 s.

Издательство Анны Зелениной. - 2019. - 166 с. ISBN

6. Subin, A. Adaptation of regenerated strawberry plants to ex

978-5-6042106-5-9.

vitro using biological preparations / A. Subin, G. Tkalen-

4. Осокина, А.С. Влияние спиртового экстракта боль-

ko, V. Boroday, A. Likhanov // Agrobіologіya. - 2016. -

шой восковой моли (Galleria mellonella) на внутренние

№ 2 (128). - S. 85-90.

ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ НАУКИ • № 4-2020