АГРОНОМИЯ

Е.А. Калашникова, доктор биологических наук, профессор, https://orcid.org/0000-0002-2655-1789

Р.Н. Киракосян, кандидат биологических наук, https://orcid.org/0000-0002-5244-4311

Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева

РФ,127550, г. Москва, ул.Тимирязевская, 49

С.К. Темирбекова, доктор биологических наук, профессор, https://orcid.org/0000-0001-9824-6364

О.В. Мелешина, кандидат сельскохозяйственных наук

Всероссийский научно-исследовательский институт фитопатологии

РФ, 143050, Московская обл., Одинцовский р-н, п. Большие Вязёмы,

ул. Институт, вл. 5

Ю.В. Афанасьева, кандидат сельскохозяйственных наук, https://orcid.org/0000-0003-2982-919X

Федеральный научный селекционно-технологический центр садоводства и питомниководства

РФ, 115598, г. Москва, ул. Загорьевская, 4

М.М. Тареева, кандидат сельскохозяйственных наук, https://orcid.org/0000-0001-5817-0860

Федеральный научный центр овощеводства

РФ, 143072, Московская обл., Одинцовский р-н, п. ВНИИССОК, ул. Селекционная, 14

E-mail:sul20@yandex.ru

УДК 576.54

DOI: 10.30850/vrsn/2022/1/37-41

ПОЛУЧЕНИЕ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР CICHORIUM INTYBUS L. IN VITRO

КАК ИСТОЧНИКА ИНУЛИНА

Приводятся результаты по культивированию Cichorium intybus L. в культуре in vitro. Показано, что на процессы морфогенеза

существенно влияют условия выращивания, в частности, гормональный и минеральный состав питательной среды, а также

режимы освещения. Из листовых эксплантов, изолированных с растений C. intybus получали каллусную ткань. Листовые сег-

менты культивировали на питательной среде, содержащей минеральные соли по прописи МС, а также ауксины - индолил-3-

уксусную (ИУК), нафтилуксусную (НУК) и 2,4-дихлорфеноксиуксусную (2,4-Д) кислоты в концентрации 5,5-9,5 мг/л в сочета-

нии с цитокинином 6-бензиламинопурином (БАП) - 2 мг/л. Сформировавшуюся ткань пересаживали на свежую питательную

среду каждые четыре недели, учитывая цвет и консистенцию. Прирост каллуса определяли взвещиванием в ламинар-боксе

в начале и конце пассажа (мг). Каллусную ткань культивировали на агаризованной питательной среде в чашках Петри. Затем

помещали в светонепроницаемые гроутенты с излучением выровненным по плотности потока фотосинтетических фотонов

и различным соотношением его уровней в области 660 нм (R - красный) и 730 нм (FR - дальний красный). Контрольный вариант

размещали в световой комнате, где было создано освещение белыми линейно-люминесцентными лампами с интенсивностью

150 мкмоль/м²с. В конце цикла выращивания учитывали цвет, консистенцию каллуса и его прирост. Процесс каллусогенеза

зависит от применяемого ауксина и его концентрации. Максимальный прирост каллусной ткани получен на среде МС, содер-

жащей ИУК или НУК в концентрации 8,5 мг/л. В присутствии НУК формировался неморфогенный каллус, а при использовании

ИУК - морфогенный. Исследования показали, что условия освещения (FR>R, FR=R, FR<R) оказывают существенное стиму-

лирующее влияние на рост каллусной ткани, а также на накопление в ней инулина. Максимальное значение инулина в каллусной

ткани (7,55-7,95 %) получено в варианте FR>R, а также на питательной среде с содержанием ИУК.

Ключевые слова: цикорий, in vitro, каллусная ткань, питательная среда, гормоны.

E.A. Kalashnikova, Grand PhD in Biological sciences, Professor

R.N. Kirakosyan, PhD in Biological sciences

Russian State Agrarian University - MTAA

RF, 127550, g. Moskva, ul. Timiryazevskaya, 49

S.K. Temirbekova, Grand PhD in Biological sciences, Professor

O.V. Meleshina, PhD in Agricultural sciences

All-Russian Research Institute of Phytopathology

RF, 143050, Moskovskaya obl.,Odintsovskij r-n, p. B. Vyazemy

Yu.V. Afanas'yeva, PhD in Agricultural sciences

Federal Horticultural Center for Breeding, Agrotechnology and Nursery,

RF, 115598, g.Moskva, ul. Zagoryevskaya, 4

M.M. Tareeva, PhD in Agricultural sciences

Federal Scientific Vegetable Center

RF, 14307214, Moscovskaya obl., Odintsovskij r-n, ul. Selectsionnaya, p. VNIISSOK, 14

E-mail:sul20@yandex.ru

OBTAINING CELL CULTURES OF CICHORIUM INTYBUS L. IN VITRO,

AS A SOURCE OF INULIN

The results of cultivation of Cichorium intybus L. in culture in vitro are presented. It is shown that the processes of morphogenesis are

significantly influenced by growing conditions, in particular, the hormonal and mineral composition of the nutrient medium, as well as

lighting modes. Callus tissue was obtained from leaf explants isolated from C. intybus plants. Leaf segments were cultivated on a nutrient

medium containing mineral salts according to the MS prescription, as well as auxins - indolyl-3-acetic (IAA), naphthylacetic (NAA)

and 2,4-dichlorophenoxyacetic (2,4-D) acids at a concentration of 5.5-9.5 mg/l in combination with cytokinin 6-benzylaminopurine

АГРОНОМИЯ

(BAP) - 2 mg/l. The formed tissue was transplanted onto a fresh nutrient medium every four weeks, taking into account the color and

consistency. Callus growth was determined by weighing in a laminar box at the beginning and end of the passage (mg). Callus tissue was

cultured on agar nutrient medium in Petri dishes. Then they were placed in opaque grow tents with radiation aligned with the flux density

of photosynthetic photons and different ratios of its levels in the region of 660 nm (R - red) and 730 nm (FR - far red). The control variant

was placed in a light room, where illumination was created with white linear fluorescent lamps with an intensity of 150 μmol/m2s. At the end of

the growing cycle, the color, texture of the callus and its growth were taken into account. It is shown that the process of callus formation

depends on the auxin used and its concentration. The maximum increase in callus tissue was obtained on an MS medium containing

IAA or NAA at a concentration of 8.5 mg/l. In the presence of NAA, a non-morphogenic callus was formed, and when using IAA,

a morphogenic callus was formed. Studies have shown that the use of various lighting conditions (FR>R, FR=R, FR<R) have a significant

stimulating effect on the growth of callus tissue, as well as on the accumulation of inulin in it. Moreover, the maximum value of inulin in

the callus tissue (7.55-7.95 %) was obtained in the FR>R variant, as well as on a nutrient medium containing IAA.

Key words:chicory, in vitro, callus tissue, nutrient medium, hormones.

Развитие фарминдустрии - одно из приоритетных

быть представлена микроклонами, каллусными

направлений по производству качественных лекар-

и суспензионными культурами. Изменяя условия

ственных препаратов, характеризующихся безопасно-

их выращивания in vitro, можно управлять био-

стью и высокой эффективностью действия. Такие тех-

синтетическим потенциалом клеток и получать

нологии основываются на использовании раститель-

штаммы-суперпродуценты вторичных метаболи-

ного сырья, в частности, лекарственных растений. [1]

тов, в частности, инулина. К регуляторным факто-

Получение конкурентоспособных импортозамещаю-

рам относят гормональный и минеральный состав

щих лекарственных препаратов способствует успеш-

питательной среды, а также спектральный состав

ной реализации Государственных программ развития

света. [4, 6, 13] C. intybus в культуре in vitro иссле-

здравоохранения Российской Федерации. По про-

дуют в биотехнологических лабораториях разных

гнозам ВОЗ, через 15…20 лет доля фитопрепаратов в

стран (Индия, Иран, Казахстан, Украина и дру-

общем ассортименте лекарственных средств может

гие), работы направлены на изучение вторичных

возрасти до 60 %, что делает актуальными подобные

метаболитов и их биологической активности в тка-

исследования. [16]

нях культурных и диких растений C. intybus.[12, 14]

Лекарственные растения содержат биологически

Всестороннее изучение C. intybus in vitro - актуаль-

активные вещества и могут широко применяться в

ное направление в биотехнологии.

пищевой промышленности. Особое внимание уде-

Цель работы - установить степень влияния ус-

ляется производству продуктов питания диетическо-

ловий культивирования на морфогенетический

го и функционального назначения, в состав которых

потенциал клеточных культур C. intybus in vitro.

входят пищевые волокна, антиоксиданты, преби-

отики. [3, 5, 7, 11] Инулин - один из эффективных

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

пребиотиков. Он содержится в цикории (Cichorium

intybus L.) и топинамбуре (Helianthus tuberosus L.),

На кафедре биотехнологии РГАУ-МСХА имени

синтезируется в батате (Ipomoea batatas L.), спар-

К.А. Тимирязева (Москва, Россия) исследовали се-

же (Asparagus officinalis L.), одуванчике (Taraxacum

мена C. intybus, сорт Петровский.

officinale Wigg.) и других растениях. [8, 9]

Получение стерильной культуры. Семена стери-

В России при производстве функциональных

лизовали 0,1 % раствором сулемы (HgCl₂) в течение

продуктов питания используют в основном импорт-

9 мин., промывали трехкратно стерильной дистил-

ный инулин. Необходимо получать свою конкурен-

лированной водой и культивировали на безгормо-

тоспособную продукцию высокого качества.

нальной питательной среде (рН - 5,8) Мурасиге и

Особый интерес представляет цикорий

Скуга (МС) в световой комнате при температуре

обыкновенный (Cichorium intybus L.) - одно из са-

22…24°С. Освещение - белые люминесцентные

мых популярных растений, в котором большое

лампы

«OSRAM AG 36/25» с интенсивностью

количество инулина и биологически активных ве-

3 тыс. лк, фотопериодом 16 ч и плотностью потока

ществ. [5, 12] Корни C. intybus содержат: полисахарид

фотонов (ППФ) 150…180 мкмоль/м²сек.

инулин - 40…60 %; гликозид интибин - 0,032…0,2;

В работе следовали правилам, разработанным

лактуцин - 1…2; фруктозу - 4…10; пектиновые ве-

на кафедре биотехнологии РГАУ-МСХА имени

щества - 2…4; жирные кислоты (линолевая, пальми-

К.А. Тимирязева. [2]

тиновая, линоленовая, стеариновая) - 2…3; стерины

Влияние гормонального состава питательной сре-

(α-амирин, тараксастерол, β-ситостерол) - 3…5; смо-

ды на формирование каллусной ткани. Из листовых

лы и холин - 3…4; дубильные вещества; витамины

эксплантов, изолированных с растений C. intybus

(С - 0,02…0,03, Е - 0,02…0,04, В - 0,03…0,05, РР -

получали каллусную ткань. Листовые сегменты

0,24); белки - 1…2 и микроэлементы - никель (0,012),

культивировали на питательной среде, содержащей

цирконий (0,010), ванадий (0,009), железо (0,07), хром

минеральные соли по прописи МС, а также аукси-

(0,04), цинк (0,03), медь (0,03%). [5-7]

ны - индолил-3-уксусную (ИУК), нафтилуксус-

Применение методов биотехнологии позволяет

ную (НУК) и 2,4-дихлорфеноксиуксусную (2,4-Д)

не только размножать и получать высококаче-

кислоты в концентрации 5,5…9,5 мг/л в сочетании

ственный посадочный материал, но и создавать

с цитокинином 6-бензиламинопурином (БАП) -

клеточные культуры in vitro лекарственных рас-

2 мг/л. Сформировавшуюся ткань пересаживали на

тений с повышенным содержанием биологически

свежую питательную среду каждые четыре недели,

активных веществ. [1] Коллекция in vitro может

учитывая цвет и консистенцию. Прирост каллуса

ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ НАУКИ • № 1-2022

АГРОНОМИЯ

определяли взвешиванием в ламинар-боксе в начале

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

и конце пассажа (мг).

Выращивание каллусной ткани в условиях свето-

Для получения хорошо растущей культуры были

культуры. Каллусную ткань культивировали на агари-

выбраны режимы стерилизации. [10, 12-15] При-

зованной питательной среде в чашках Петри: мине-

менение в качестве стерилизующего агента HgCl₂

ральные соли по прописи МС + 2 мг/л БАП + 7,5 мг/л

(сулема) в концентрации 0,1 % привело к выходу

НУК; минеральные соли по прописи МС + 2 мг/л

94,7 % стерильных эксплантов. Семена C. intybus

БАП + 7,5 мг/л ИУК. Затем помещали в светонепро-

проращивали на безгормональной питательной

ницаемые гроутенты (Urban Grower 60x60x200 см)

среде МС в чашках Петри в условиях световой ком-

с излучением выровненным по плотности потока

наты. Экспериментально установлено, что прорас-

фотосинтетических фотонов и различным соотноше-

тание семян начиналось на 5-е сут., а на 16-е фор-

нием его уровней в области 660 нм (R - красный) и

мировались полноценные проростки. Последую-

730 нм (FR - дальний красный) (FR>R, FR=R, FR<R).

щее культивирование на питательной среде МС,

Контрольный вариант размещали в световой комнате

содержащей 1 мг/л БАП и 0,1 мг/л ИУК, приводило

с освещением белыми линейно-люминесцентными

к появлению первых настоящих листьев, а в базаль-

лампами, интенсивность - 150 мкмоль/м²с. В конце

ной части - адвентивных почек и побегов (фото 1а,

цикла выращивания учитывали цвет, консистенцию

2-я стр. обл.). Затем микрорастения делили на от-

каллуса и его прирост.

дельные сегменты (экспланты листовые, стеблевые,

Определение инулина проводили спектрофотоме-

корневые) и культивировали на питательной сре-

трическим методом (2 мг/мл резорцин + 96 % этанол

де для регенерации (1 мг/л БАП и 0,1 мг/л ИУК).

и концентрированная HCl в равных объемах). Опти-

Наибольшим морфогенетическим потенциалом

ческую плотность проб и стандартного раствора изме-

обладали стеблевые и листовые экспланты. В этих

ряли на спектрофотометре Cary-50 (Varian, США) при

вариантах наблюдали формирование морфогенного

длине волны 480 нм. Количество фруктозосодержа-

микрокаллуса, из которого образовывались рас-

щих сахаров в пробах рассчитывали по формуле:

тения-регенеранты - источники стерильных экс-

плантов для получения каллусной ткани (фото 1 б-г,

,∗

2-я стр. обл.).

Во всех вариантах пролиферацию каллусных

клеток наблюдали в местах среза и повреждений на

7…10 сутки. Существенное влияние на интенсив-

где Ap и As - оптическая плотность опытного образ-

ность образования каллусной ткани, ее консистен-

ца и стандартного раствора соответственно; Cs - кон-

цию и цвет оказывали применяемые ауксины и их

центрация стандартного раствора фруктозы (3 мг/мл);

концентрации.

Культивирование листовых эксплантов на пита-

mp^{- масса навески анализируемого образца, г.}

Применение аэропоники для адаптации микрокло-

тельной среде, содержащей ИУК в различных кон-

нов C. intybus к условиям ex vitro. Микроклоны (уко-

центрациях приводило к формированию каллус-

рененные и неукорененные микропобеги) адапти-

ной ткани ярко-желтого цвета, средней плотности,

ровали двумя способами: на аэропонной установке

с образованием меристематических очагов (фото 2а,

и непосредственно в почве.

2-я стр. обл.). Начало каллусогенеза отмечено уже

Аэропоника основана на выращивании растений

на 3-и сутки. При использовании НУК каллусная

в воздушной или туманной среде без использования

ткань имела плотную консистенцию и была бело-

почвы. Оборудование для адаптации микрорасте-

го или светло-желтого цвета (фото 2б, 2-я стр. обл.).

ний - аэропонный клонер GrowPlant X-Stream 120

Начало каллусогенеза - 7…10 сутки. На среде, содер-

(Нидерланды) с системой орошения корневой

жащей 2,4-Д, каллусная ткань бурого цвета с рыхлой

зоны черенков. Освещение - светодиодные лампы

консистенцией (фото 2в, 2-я стр. обл.), интенсивность

красного и синего спектра с интенсивностью до

каллусогенеза минимальная. В процессе культивиро-

300 мкмоль/м²с и 16-часовым фотопериодом. Пита-

вания сформировавшаяся каллусная ткань погибала,

тельный раствор - ¹/₂ нормы минеральных солей по

поэтому в дальнейших экспериментах питательные

прописи МС в сочетании с ИУК или ИМК концен-

среды с содержанием 2,4-Д не применяли.

трацией 1 мг/л.

Для характеристики каллусной ткани использо-

Субстрат при адаптации в почвенных условиях -

вали показатель интенсивности роста, который оце-

грунт «Универсальный» (Россия) торговой марки

нивали на 4-м и 5-м пассажах. Прирост определяли в

«Родная Земля» многоцелевого назначения на основе

зависимости от исследуемого ауксина и концентрации

торфа, полностью готовый к применению для выра-

(см. таблицу).

щивания растений разных таксономических групп.

Наибольшим и стабильным прирост каллусной

Состав субстрата (мг/л): общий азот (NH₄+NO₃) -

ткани был при добавлении в состав питательной среды

240, фосфор (P₂O₅) - 290, калий (K₂O) - 330.

НУК в концентрации 8,5 мг/л. На 4-м и 5-м пассажах

Исследования проводили в двух аналитических

он составил 1,32 и 1,24 г соответственно, что превы-

и десяти биологических повторностях. Результаты

шает данный показатель в варианте с ИУК (8,5 мг/л)

статистически обрабатывали в программах MS Excel

примерно в два раза. Но на среде, содержащей НУК,

и AGROS (версия 2.11, Россия). Данные в таблицах и

пролиферативная активность дедифференцирован-

диаграммах представлены в виде средней арифмети-

ных клеток уменьшалась с увеличением числа суб-

ческой со стандартной ошибкой (M±mM). Оценка

культивирований. В варианте с ИУК наблюдали

различий выборочных средних дана при значении

стабильный прирост каллусных клеток независимо

доверительной вероятности 0,95.

от пассажа и концентраций. В каллусной ткани отме-

АГРОНОМИЯ

Влияние различных концентраций ауксина

ство антацианов было в варианте освещения FR>R

на прирост каллусной ткани (г) на разных пассажах

(фото 3, 4, 2-я стр. обл.).

Действие изучаемых факторов оценивали по

Концентрация ауксина, мг/л

приросту каллусной ткани, который зависит не

Ауксин

5,5

6,5

7,5

8,5

9,5

только от спектрального состава света, но и от при-

4-й пассаж

меняемого ауксина (рис. 1). Во всех вариантах све-

ИУК

0,77±0,03

0,48±0,02

0,22±0,01

0,54±0,03

0,77±0,03

токультуры прирост каллусной ткани, полученной

НУК

0,78±0,03

1,56±0,41

1,08±0,38

1,32±0,51

0,66±0,03

на питательной среде с ИУК был выше контроль-

ного в 2…3 раза, НУК - 7…14 раз. Наилучшими для

5-й пассаж

формирования хорошо пролиферирующей каллусной

ИУК

0,92±0,04

0,84±0,04

1,24±0,58

0,69±0,03

0,91±0,04

ткани на среде содержащей ИУК, были условия

Гибель из-за

НУК

0,80±0,04

0,63±0,02

1,24±0,55

0,90±0,04

освещения FR<R, НУК - FR>R.

контаминации

Накопление инулина в каллусных клетках цико-

рия зависит от условий выращивания (рис. 2).

чено образование множественных меристематических

Во всех исследуемых вариантах освещения (FR>R,

очагов, из которых в дальнейшем формировались рас-

FR=R, FR<R) по сравнению с контрольным, инули-

тения-регенеранты.

на накапливалось существенно больше, особенно

Таким образом, для выращивания хорошо про-

при FR>R. Высокая способность каллусных клеток

лиферирующей, неморфогенной каллусной ткани

синтезировать и накапливать инулин получена при

необходимо присутствие в питательной среде НУК,

их выращивании на питательной среде, содержащей

а для получения растений-регенерантов из каллус-

ИУК (7,55…7,95 %). Вероятно, высокий биосинтети-

ной ткани - ИУК. Такие растения могут быть вклю-

ческий потенциал клеток к синтезу инулина связан

чены в селекционный процесс, направленный на

с тем, что именно в этих условиях формировалась

отбор новых форм C. intybus.

хорошо пролиферирующая и высокоморфогенная

Существенное влияние на интенсивность обра-

каллусная ткань.

зования каллусной ткани, ее консистенцию и цвет

Полученные растения-регенеранты переносили

оказывал спектральный состав света (FR>R, FR=R,

для адаптации на аэропонную установку или в почву.

FR<R).

Установлено, что гибель растений в первом случае

Экспериментально установлены некоторые за-

составила 1,8…3,5 %, во втором - 14,9…23,9 %. В ус-

кономерности каллусогенеза от соотношения FR

ловиях аэропоники наблюдали активный рост веге-

и R. На питательной среде с НУК формировалась

тативной части и корневой системы микроклонов,

ткань рыхлого типа, желтого цвета, сильно овод-

а к концу третьей недели - образование цветочных

ненная, легко распадающаяся на отдельные кле-

почек. Высота растений превышала контрольный

точные агрегаты, ИУК - зеленого цвета, с анта-

вариант в 1,5…2,5 раза, корневая система - 5,5 раза

циановой окраской, плотного типа, с множеством

(фото 5, 2-я стр. обл.). Полученные результаты до-

меристематических очагов по всей поверхности

стоверно значимы на 5 %-м уровне.

ткани. Отличия были установлены только по обра-

Таким образом, для адаптации C. intybus ex vitro

зованию антациановой окраски в каллусной ткани,

целесообразно применять аэропонные технологии,

полученной на среде с НУК. Наибольшее количе-

которые позволяют получать высококачественный

1,5

0,5

fluorescent lamps

FR>R

FR=R

FR<R

(control)

IAA

NAA

Рис. 1. Зависимость прироста каллусной ткани от условий выращивания.

IAA

NAA

fluorescent

FR>R

FR=R

FR<R

fluorescent

FR>R

FR=R

FR<R

lamps

(control)

Рис. 2. Влияние условий выращивания на накопление инулина в каллусной ткани: а -4-й пассаж, б -5-й пассаж.

ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ НАУКИ • № 1-2022

АГРОНОМИЯ

посадочный материал для восполнения фитогенных

LIST OF SOURCES

ресурсов. Известных в научно-технической и патент-

1. Kalashnikova, E.A. Kletochnaya inzheneriya rastenij: ucheb-

ной литературе способов с аналогичной технологией

nik i praktikum dlya vuzov. - M.: Yurajt, 2020. - 333 s.

не обнаружено.

2. Kalashnikova, E.A. Laboratornyj praktikum po kul’ture

kletok i tkanej / E.A. Kalashnikova, M.Yu. Cherednichen-

СПИСОК ИСТОЧНИКОВ

ko, R.N. Kirakosyani dr. - M.:KnoRus, 2017. - 163 s.

1. Калашникова, Е.А. Клеточная инженерия растений: учеб-

3. Barclay, T.G. Analysis of the hydrolysis of inulin using

ник и практикум для вузов. - М.: Юрайт, 2020. - 333 с.

real time 1H NMR spectroscopy / T.G. Barclay, M. Gin-

2. Калашникова, Е.А. Лабораторный практикум по культу-

ic-Markovic, M.R. Johnston et al.// Carbohyd. Res,

ре клеток и тканей/Е.А. Калашникова, М.Ю. Чередни-

2012. - P. 117-125.

ченко, Р.Н. Киракосян и др. - М.: КноРус, 2017. - 163 с.

4. Cioc, M. Different LED light intensities and 6-benzylad-

3. Barclay, T.G. Analys is of the hydrolys is of inulinus in greal time

enine concentrations in relation to shoot development,

1H NMR spectroscopy / T.G. Barclay, M. Ginic-Markovic,

leaf architecture, and photosynthetic pigments of Gerbera

M.R. Johnston et al.// Carbohyd. Res, 2012. - P. 117-125.

jamesonii Bolus in vitro/M. Cioc, A. Kalisz, M. Żupnik,

4. Cioc, M. Different LED light intensities and 6-benzylad-

B. Pawlowska// Agronomy. - 2019. - V. 9(7). - P. 16.

enine concentrations in relation to shoot development,

5. Fan, H. Isolation and identification of terpenoids from

leaf architecture, and photosynthetic pigments of Gerbera

chicory roots and their inhibitory activities against yeast

jamesonii Bolus in vitro/M. Cioc, A. Kalisz, M. Żupnik,

α-glucosidase/H. Fan, J. Chen, H. Lu et al.// Eur. Food

B. Pawlowska// Agronomy. - 2019. - V. 9(7). - P. 16.

Res. Technol. - 2017. - V. 243. - Р. 1009-1017.

5. Fan, H. Isolation and identification of terpenoids from

6. Hanus-Fajerska, E. Impact of Light-Emitting Diodes

chicory roots and their inhibitory activities against yeast

(LEDs) on propagation of orchids in tissue culture/ E. Ha-

α-glucosidase/H. Fan, J. Chen, H. Lu et al.// Eur. Food

nus-Fajerska, R. Wojciechowska // In Light Emitting Di-

Res. Technol. - 2017. - V. 243. - Р. 1009-1017.

odes for Agriculture; Gupta, S.D., Ed.; Springer: Singa-

6. Hanus-Fajerska, E. Impact of Light-Emitting Diodes

pore. - 2017. - P. 305-320.

(LEDs) on propagation of orchids in tissue culture/E. Ha-

7. Liu, H. Antimicrobial and antioxidant activities of Cicho-

nus-Fajerska, R. Wojciechowska// In Light Emitting Di-

riumintybus root extract using orthogonal matrix design/

odes for Agriculture; Gupta, S.D., Ed.; Springer: Singa-

H. Liu, Q. Wang, Y. Liu et al. // J. Food Sci.,2013. -

pore. - 2017. - P. 305-320.

R. 258.

7. Liu, H. Antimicrobial and antioxidant activities of Cicho-

8. McClelland, J.W. Bio-Medicinal Effect of Sweet Pota-

riumintybusroot extract using orthogonal matrix design/

to in People with Diabetes/ J.W. McClelland, J.C. Allen,

H. Liu, Q. Wang, Y. Liu et al.// J. Food Sci., 2013. - Р. 258.

S. Zakir // Journal of the American Dietetic Associa-

8. McClelland, J.W. Bio-Medicinal Effect of Sweet Potato in

tion. - 2007. - V. 107. - P. 104, https://doi.org/10.1016/j.

People with Diabetes/J.W. McClelland, J.C. Allen,S.Zakir//

jada.2007.05.396.

Journal of the American Dietetic Association. - 2007. -

9. Mohammad, Khairul Alam A comprehensive review of

V. 107. - P. 104, https://doi.org/10.1016/j.jada.2007.05.396

sweet potato (Ipomoea batatas [L.] Lam): Revisiting the

9. Mohammad Khairul Alam. A comprehensive review of sweet

associated health benefits/ KhairulAlam Mohammad //

potato (Ipomoea batatas [L.] Lam): Revisiting the associated

Trends in Food Science & Technology. - 2021. - V. 115. -

health benefits/Khairul Alam Mohammad // Trends in Food

P. 512-529.

Science & Technology. - 2021. - V. 115. - P. 512-529.

10. Poothong, S. Modeling the effects of mineral nutrition for

improving growth and development of micropropagated

red raspberries/ S. Poothong, B.M. Reed // Sci. Hortic. -

red raspberries/S. Poothong, B.M. Reed// Sci. Hortic. -

2014. - P. 132-141.

11. Radhakrishnan, S. Chemical and Biological Studies on

Cichoriumintybus L./ S. Radhakrishnan, R. Omarova,

Cichoriumintybus L./S. Radhakrishnan, R. Omarova,

U. Datkhayev, A. Ross Samir

// Natural Product

U. Datkhayev, A. Ross Samir // Natural Product Re-

Research. - 2018. - V. 32. - № 11. - P. 1343-1347.

search. - 2018. - V. 32. - № 11. - P. 1343-1347.

12. Regman, R.W. In vitro regeneration of witloof chicory from

leaf explants and acculmulation of esculin/ R.W. Regman,

M. Israr, P.S. Srivastava et al.

// In Vitro Cellular

M. Israr, P.S. Srivastava et al.// In Vitro Cellular Develop-

Developmental Biology-Plant. - 2003. - V. 69. - P. 442-446.

mental Biology-Plant. - 2003. - V. 69. - P. 442-446.

13. Shulgina, A.A. Influence of light conditions and medium

13. Shulgina, А.А. Influence of light conditions and medium

composition on morphophysiological characteristics of

Stevia rebaudianaBertoni in vitro and in vivo./ A.A. Shulgina,

Stevia rebaudianaBertoni in vitro and in vivo./А.А. Shulgi-

E.A. Kalashnikova, I.G. Tarakanov et al. // Horticulturae. -

na, Е.А. Kalashnikova, I.G. Tarakanovet al. // Horticultu-

2021. - V. 7(7). - P. 195.

rae. - 2021. - V. 7(7). - P. 195.

14. Velayutham, P. Fluence of photoperiod on in vitro flowering

14. Velayutham, P. Fluence of photoperiod on in vitro flower-

in Cichoriumintybus L. / P. Velayutham, B.D. Ranjitha

ing in Cichoriumintybus L. /P. Velayutham, B.D. Ranjitha-

Kumari // Indian Journal of Plant Physiology. - 2003. -

Kumari// Indian Journal of Plant Physiology. - 2003. -

V. 218. - P. 90-93.

15. Velayutham, P. An efficient in vitro plant regeneration

15. Velayutham, P. An efficient in vitro plant regeneration system

system for Cichoriumintybus L. - an important medicinal

for Cichoriumintybus L. - an important medicinal plant/P. Ve-

plant/ P. Velayutham, B.D. Ranjithakumari, P. Baskaran //

layutham, B.D. Ranjithakumari, P. Baskaran// Journal of Agri-

Journal of Agricultural Technology. - 2006. - V. 2(2). -

cultural Technology. - 2006. - V. 2(2). - P. 287-298.

P. 287-298.

16. WHO (2013). WHO traditional medicine strategy: 2014-2023.