РАСТЕНИЕВОДСТВО И СЕЛЕКЦИЯ

УДК: 633.18: 577.2

DOI: 10.31857/2500-2082/2023/3/19-23, EDN: FJIDBC

СОЗДАНИЕ С ПОМОЩЬЮ ДНК-МАРКЕРОВ НОВЫХ ГЕНОТИПОВ РИСА,

ТОЛЕРАНТНЫХ К ДЛИТЕЛЬНОМУ ЗАТОПЛЕНИЮ ВОДОЙ*

Елена Викторовна Дубина^{1, 2}, доктор биологических наук, ORCID: 0000-0002-8010-0137

Сергей Александрович Лесняк¹, аспирант, ORCID: 0000-0002-7273-2716

Сергей Валентинович Гаркуша^{1, 2}, доктор сельскохозяйственных наук, ORCID: 0000-0002-3974-9153

Юлия Александровна Макуха¹, аспирант, ORCID: 0000-0003-3770-0783

Арина Александровна Кутищева²

¹ФГБНУ «Федеральный научный центр риса», г. Краснодар, Россия

²ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина», г. Краснодар, Россия

E-mail: lenakrug1@rambler.ru

Аннотация. Цель работы - поиск информативных молекулярных маркеров для идентификации гена Sub1A в селекцион-

ном материале риса. Проведены исследования по выявлению специализированных ДНК-маркерных систем, обеспечивающих

четкий контроль наследования целевого локуса по признаку толерантности к длительному затоплению водой, как факто-

ру борьбы с сорными растениями. Из исследуемого набора микросателлитных маркеров (13 SSR) высокую эффективность

в выявлении полиморфизма между сортами-донорами и сортами отечественной селекции показали RM 7481 и PrC3. На их

основе проанализирована ДНК полученных гибридных растений риса сегрегирующей F₂популяции на данный признак и вы-

полнен лабораторный экспресс-метод для оценки по фенотипу. При проведении статистического анализа установлено,

что оба SSR-маркера сонаследуемы с признаком толерантности к длительному затоплению и на их основе отобраны рас-

тения, имеющие в генотипе целевой ген в гомозиготном состоянии, которые переданы в селекционный процесс для изучения

по морфометрическим характеристикам и хозяйственно ценным признакам.

Ключевые слова: рис, толерантность к длительному затоплению, ПЦР, SSR-маркеры, селекция, гены устойчивости

CREATION OF NEW RICE GENOTYPES TOLERANT

TO LONG-TERM WATER FLOODING USING DNA MARKERS

E.V. Dubina^{1, 2}, Grand PhD in Biological Sciences

S.A. Lesnyak¹, PhD Student

S.V. Garkusha^{1, 2}, Grand PhD in Agricultural Sciences

Yu.A. Makukha¹, PhD Student

A.A. Kutischeva²

¹Federal Scientific Rice Centre, Krasnodar, Russia

²Kuban State Agrarian University, Krasnodar, Russia

E-mail: lenakrug1@rambler.ru

Abstract. The aim of this work is to search for informative molecular markers for the identification of the Sub1A gene in rice breeding

material. Studies have been carried out to identify specialized DNA marker systems that provide a clear control of the inheritance

of the target locus on the basis of tolerance to prolonged flooding with water, as a factor in the fight against weeds. Of the studied set

of microsatellite markers (13 SSRs), two SSR markers (RM 7481, PrC3) showed high efficiency in detecting polymorphism between

donor varieties and varieties of domestic selection. Based on them, the DNA of the obtained hybrid rice plants of the F2 segregating

population was analyzed for this trait and a laboratory express method was performed to evaluate the phenotype. During the statistical

analysis, it was found that both SSR markers are co-heritable with the trait of tolerance to prolonged flooding under water, and

on their basis, plants were selected that have the target gene in the genotype in the homozygous state, which were transferred to the

breeding process for study by morphometric characteristics and economically valuable traits. .

Keywords: rice, submergence tolerance, PCR, SSR markers, breeding, resistance genes

Рис - стратегически важная продовольственная

рируют с культурой за свет, элементы минерального

культура в мире и стоит на третьем месте по валово-

питания, пространство. [2]

му производству. Краснодарский край - крупней-

Несмотря на то, что рис возделывают на за-

ший регион рисосеяния в Российской Федерации,

топляемых полях в анаэробных условиях, он чув-

где сосредоточено более 80% посевных площадей

ствителен к длительному и глубоководному по-

страны. Один из основных лимитирующих стресс-

гружению под воду. [8] Во многих странах Южной

факторов, препятствующих получению высоких

и Юго-Восточной Азии, Индии, Индонезии и дру-

урожаев риса, - сорные растения, которые конку-

гих в результате глобального изменения климата

* Исследование выполнено при финансовой поддержке Кубанского научного фонда в рамках научного проекта МФИ-20.1/1 /

The research was carried out with the financial support of the Kuban Science Foundation in the framework of the scientific project

№ 20.1/1.

РАСТЕНИЕВОДСТВО И СЕЛЕКЦИЯ

самое опасное стихийное бедствие - наводнения,

ты образцы из коллекции генетических ресур-

которые делятся на два типа (внезапное и глубоко-

сов ФНЦ риса: Swarna-Sub1, TDK-1, IR-64, CR

водное). Они имеют разные молекулярные механиз-

1009, Inbara-3, BR-11, имеющие в генотипе ген-

мы. Во время внезапного наводнения устойчивые

интереса. Материнские формы - отечественные

растения, которые полностью погружены под воду не

сорта риса (Ленарис, КП-25, КП-163, КП-24-15).

более двух недель, перестают расти (удлиняться) из-

В применяемых селекционных схемах растения

за подавления действия гиббереллиновой кислоты

донорных и реципиентных форм, а также гибрид-

этиленом, экономя запасы углеводов, потребления

ные растения ВС-поколений высаживали в вегета-

энергии, которая необходима для возобновления

ционные сосуды в камеры искусственного климата

роста, когда вода спадет. При глубоководном зато-

(или на вегетационную площадку, в зависимости

плении, глубина воды достигает нескольких метров

от сезона года) в трех повторностях с промежутком

в течение месяца, наоборот, устойчивые растения

10 дн. для совмещения цветения. Гибридизацию

риса способны удлинять междоузлия, чтобы листья

растений риса проводили методом пневмокастра-

находились над поверхностью воды и, таким обра-

ции, опыление - «ТВЕЛЛ»-методом. [3]

зом, обеспечивалось бы дыхание и фотосинтез. [19]

Для идентификации генов Sub1A в гибридных

Это способствует истощению энергетических ре-

растениях риса при постановке реакции ампли-

зервов растения, приводя к снижению его продук-

фикации использовали микросателлитные моле-

тивности и даже гибели.

кулярные маркеры со специфичными праймерами

Историческим моментом в селекции риса на

(табл. 1), связанными с локусом, отвечающим за

устойчивость к внезапному наводнению (длительное

устойчивость к длительному погружению риса под

затопление) стало открытие азиатскими учеными

воду.

локуса Submergence1 или Sub1, который контролиру-

Амплификацию проводили в ДНК-амплифика-

ет данный признак [18] и содержит три гена (Sub1A,

торе «Терцик» при условиях: первый этап - денату-

Sub1B и Sub1C), но только Sub1A усиливает у расте-

рация в течение 5 мин. при 94°С, второй - 35 циклов

ний толерантность к погружению под воду. [11]

по протоколу: денатурация - 35 с при 94°С; отжиг

Несмотря на то, что в России проблем наводне-

праймеров - 45 с при 60°С; синтез - 30 с при 72°С,

ний, связанных с длительным затоплением рисовых

третий - один цикл синтеза при 72°С в течение 5 мин.

полей пока нет, этот ген можно использовать как

Разделяли продукты реакции амплификации

фактор борьбы со злостными сорняками рисовых

методом электрофореза в 2%-м агарозном геле при

полей - виды Echinochloa.

Введение генов (функции) устойчивости к дан-

Τаблица 1.

ному стрессору в отечественные сорта риса, адап-

Ηуклеοтидная пοследοвательнοсть праймерοв

для идентификации гена Sub1А

тированные к местным агроклиматическим усло-

виям, позволит получить большое разнообразие

Маркер

Ηуклеοтидная пοследοвательнοсть праймерοв (5’-3’)

материала с геном Sub1A. Применение специали-

GАTGTGTGGАGGАGААGTGА

зированных ДНК-маркеров, при помощи которых

Sub1А203

можно четко детектировать не только целевой ген

GGTАGАTGССGАGААGTGTА

в гибридном селекционном материале, но и его

GАTGTGTGGАGGАGААGTGА

Sub1А_6

аллельное состояние, повышает отбор перспек-

GGTАGАTGССGАGААGTGTА

тивных генотипов, что значительно упрощает

GАTGTGTGGАGGАGААGTGА

и ускоряет селекционную работу. Внедрение таких

Sub1А_7

GGTАGАTGССGАGААGTGTА

сортов в производство позволит бороться с сорной

CGACCCAATATCTTTCTGCC

растительностью рисовых полей щадящим эко-

RM7481

логически безопасным методом (при затоплении

CATTGGTCGTGCTCAACAAG

сорняки погибают), по сравнению с химическими

CTGTGGGCCCAATATGTCAC

RM285

препаратами. Это поднимет экологический и эко-

GGCGGTGACATGGAGAAAG

номический статус отрасли.

СGTСGGАTGАTGTАААGССT

Цель работы - создать на основе ДНК-технологий

RM219

САTАTСGGСАTTСGССTG

отечественный пул сортов риса с генами устойчиво-

AACGGGCACATTCTGTCTTC

сти к данному признаку, а также провести исследова-

RM 464A

TGGAAGACCTGATCGTTTCC

ния по выявлению информативных SSR-маркеров,

ассоциированных с локусом толерантности к зато-

CTGTGGGCCCAATATGTCAC

RM 285

плению Sub1A для надежной идентификации интро-

GGCGGTGACATGGAGAAAG

грессированного целевого гена.

CAGGAATAAGTAGGCACATCA

Sub1A

Данное исследование имеет большое значение

GGACCAAGAACAAAGTCAAA

для развития фундаментальных и теоретических

AGGCGGAGCTACGAGTACCA

основ, а также практических подходов к использо-

AEX

GCAGAGCGGCTGCGA

ванию ДНК-маркеров в селекции риса.

TTGC GAGCTAGCTGTCTGAA

PrC1

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

TAGTCCACGCGCTAATGTGA

CAATAAGACTCGGGCTGTGC

PrC3

Донор для введения гена толерантности к дли-

TAGTCCACGCGCTAATGTGA

тельному затоплению Sub 1A - сорт азиатской се-

CTTCTTGCTCAACGACAACG

лекции Khan Dan. Для изучения полиморфизма

GnS2

TCGATGGGGTCTTGATCTCT

13 SSR в качестве устойчивых сортов были взя-

ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ НАУКИ • № 3-2023

РАСТЕНИЕВОДСТВО И СЕЛЕКЦИЯ

напряжении 120…130 В 30 мин. Для визуализации

в 2021 году. Результаты анализа ДНК некоторых

продукта электрофореза пластину из агарозного

гибридных растений F2 на наличие в их генотипах

геля помещали в прибор GelDocXR+, используя

целевого гена Sub1A и его аллельного состояния

специальную программу, согласно инструкции, ис-

с использованием маркерной системы представлены

следуемый гель фотографировали в ультрафиолето-

на рисунке 2.

вом свете и анализировали полученные данные.

На электрофореграмме (рис. 2) можно увидеть,

Семена гибридных растений и родительских

что образцы №№ 124, 125, 129-131, 152,153,156,

форм проращивали в пробирках в термостате при

158,159, 162-165 имеют в своем ДНК-профиле

температуре 28°С с увлажнением. [5] Когда семена

специфичный для гена Sub1A ПЦР-продукт. Образ-

проклевывались, пробирки помещали в камеру ис-

цы №№ 121-123,126-128, 132-135, 160, 161 - ге-

кусственного климата при световом режиме: день

терозиготы по данному локусу, а №№ 151, 154,155,

и ночь по 12 ч при 30°С. Затем, когда проростки

157 - рецессивные гомозиготы (несут материнскую

достигали длины 2…3 см, растения в пробирках за-

аллель) выбракованы. Растения с геном Sub1A ото-

ливали водой, и через 15 дн. проводили их оценку на

браны для дальнейшей работы. В 2021-2022 годах

толерантность к затоплению.

проводили возвратные скрещивания с реккурент-

Данные статистически обрабатывали с помо-

ной родительской формой для получения гибридных

щью пакетов прикладных компьютерных программ

растений, у которых период вегетации не превышал

Microsoft Office Excel 2010 и STATISTICA 10.0 for

120…125 дн. На каждом этапе после анализа ДНК

Windows.

отбирали те растения, которые имели в генотипе до-

Частоту рекомбинации между геном толерантно-

норный аллель. В настоящее время получена BC₂F₂ -

сти к длительному затоплению и ДНК-маркерами

популяция.

определяли как отношение числа растений с на-

На рисунке 3 (3-я стр. обл.) представлены ре-

личием или отсутствием ДНК-маркера, несоответ-

зультаты апробации по локусу PrC3, где также чет-

ствующих фенотипическому проявлению признака

ко видна аллельная разница между устойчивыми

толерантности к длительному затоплению, общему

и неустойчивыми генотипами. Данный маркер был

числу растений, умноженное на 100.

внедрен в селекционную программу по созданию

генотипов риса, толерантных к длительному зато-

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

плению, как фактору борьбы с сорными растения-

ми. Толерантные формы в ДНК-профиле характе-

Необходимость создания генисточников сель-

ризуются по данной маркерной системе наличием

скохозяйственных растений, предлагаемых для

аллеля размером 710 п.н., а восприимчивые - двумя

возделывания по природосберегающим техноло-

аллелями 360 и 220 п.н.

гиям, постоянно увеличивается. Ген Sub1A усили-

В сегрегирующей F2-популяции получено

вает у растений риса толерантность к длительному

184 растения, которые по локусу RM 7481 имели

затоплению, которую можно использовать в каче-

соотношение: 39 растений - доминантные гомо-

стве экологически безвредного фактора для борьбы

зиготы, 104 - гетерозиготы, у 41 растения в гено-

с сорными растениями рисовых полей.

типе рецессивный аллель. По локусу PrC3: 37 рас-

На первом этапе работы в 2020 году был проведен

тений - доминантные гомозиготы (у двух из всей

поиск информации, сделана выборка молекуляр-

выборки не проходила амплификация), 104 - гете-

ных (микросателлитные) маркеров из литературных

розиготы и 41 растение имело в генотипе рецессив-

источников и базы данных NCBI (www.ncbi.nih.gov)

ный аллель.

для идентификации гена Sub1А методом ПЦР в до-

Для проверки достоверности результатов мо-

норной и реципиентной формах риса. Для каждой

лекулярно-генетических исследований проводили

специфичной пары праймеров разработаны про-

фенотипический анализ родительских форм лабо-

токолы оптимального состава реакционной смеси

раторным экспресс-методом. Были отмечены фор-

и программы реакции амплификации, в результа-

мы, которые в режиме полного затопления останав-

те которой при проведении SSR-анализа продукты

ливались в росте, а после того, как воду сливали на

амплификации четко визуализировались (рис. 1, 2,

15-е сут., через два-три дня они восстанавливали

3-я стр. обл.). Апробировали каждый молекуляр-

свои жизненные функции.

ный маркер на контрастных сортах (устойчивые -

По данным молекулярно-генетических исследо-

Khan Dan, TDK-1, CR 1009, Swarna, IR-64, BR-11,

ваний и оценки по фенотипу сегрегирующей F₂ по-

Inbara-3, неустойчивые - КП-23, Контакт, Боярин,

пуляции рассчитали частоту рекомбинаций между

КП-25, КП-163, Флагман, Ленарис) к длительному

геном толерантности к длительному затоплению

погружению растений под воду.

водой Sub1A и локусами RM 7481, PrC3 по гибрид-

При апробации молекулярного маркера RM 7481

ной комбинации КП-163 ´ Khan Dan (табл. 2).

на рисунке 1 четко видна аллельная разница между

Молекулярные маркеры RM 7481 и PrC3 насле-

устойчивыми (№№ 1-7) и неустойчивыми образ-

дуются моногенно и сцепленно, поскольку среди

цами риса (№№ 8-14). Сортообразцы №№ 1-7

184 растений F₂-популяции отмечена их сегрегация

имеют в своем ДНК-профиле специфичный для

в соотношении 1:2:1, частота рекомбинаций - 22

гена Sub1A ПЦР-продукт размером 102 п.н., а вос-

и 23% соответственно. Они представляют интерес

приимчивые к длительному погружению под воду

для использования при детектировании донорных

сорта риса (№№ 8-14) - ПЦР-продукт размером

аллей в селекционном материале.

86 п.н. Чтобы установить сцепленность маркера

Таким образом, с помощью методов молекуляр-

с признаком он был использован для анализа се-

ного маркирования в сочетании с традиционной

грегирующей F2-популяции, которая получена

селекцией получен гибридный материал риса, в ге-

РАСТЕНИЕВОДСТВО И СЕЛЕКЦИЯ

Таблица 2.

Наследование SSR-маркеров RM7481 и PrC3 среди сегрегирующей

по толерантности к длительному затоплению растений риса F2-популяции

Сегрегирующая F2-популяция

ДНК-маркер

SSR-маркер

SSR-маркер/ толерантность к длительному затоплению

Частота рекомбинаций, %

+ : ±: -

χ²

R/+

S/+

R/-

S/-

χ²

RM 7481

39:104:41

0,05

102

69,08

PrC3

37:104:41

3,87

100

66,20

Примечание. R - устойчивость; S - неустойчивость; «+» - присутствие и «-» - отсутствие SSR-маркера. Для вероят-

ности ошибки p  0,05 и d.f. = 2 критическое значение χ² = 5,99, а для d.f. = 3 χ² = 7,81.

нотипе которого интрогрессированные гены толе-

9. Hattori Y., Nagai K., Furukawa S. et al. The ethylene re-

рантности к длительному затоплению водой. После

sponse factors Snorkel1 and Snorkel2 allow rice to adapt to

всех этапов селекционного процесса и государ-

deep water. Nature. 2009; 460: 1026-1031.

ственного сортоиспытания они могут внедряться

10. Jena K.K., Moon H.P., Mackill D.J. Marker assisted selec-

в производство, что позволит сократить примене-

tion - a new paradigm in plant breeding. Korean J. Breed.

ние химических средств защиты от сорно-полевой

2003; 35: 133-140.

растительности и снизить пестицидную нагрузку на

11. Mackill D.J., Ni J. Molecular mapping and marker-assist-

экосистему.

ed selection for major-gene traits in rice. Rice genetic. Pro-

Выводы. Предлагаемая ускоренная схема соз-

ceeding of the fourth international rice genetic symposium.

дания современного набора линий риса, несущих

Los Banos, 2001. Р. 137-151.

целевые гены, даст возможность в дальнейшем соз-

12. Murray M.G. Rapid isolation of high molecular weight

дать сорта, соответствующие агроклиматическим

plant DNA. Genomt. 1980; 40: 379-378.

условиям Юга России, обладающие повышенной

13. Sano Y., Katsumata M., Okuno K. Genetic studies of spe-

урожайностью, толерантностью к длительному за-

ciation in cultivated rice. Inter-and intraspecific differenti-

топлению водой как фактору борьбы с сорными

ation in the waxy gene expression of rice. Euphytica. 1986;

растениями. Это будет способствовать производ-

35 (1): 1-9.

ству экологически безопасной продукции, эконо-

14. Septiningsih E.M., Kretzschmar Τ. Anaerobic germina-

мии денежных средств рисопроизводящим пред-

tion-tolerant plants and related materials and methods.

приятиям, так как позволит значительно снизить

2015. WO 2015087282 A1.

использование ядохимикатов, что повысит эколо-

15. Steffens B., Wang J., Sauter M. Interactions between eth-

гический статус отрасли рисоводства и экономику

ylene, gibberellin and abscisic acid regulate emergence and

региона.

growth rate of adventitious roots in deepwater rice. Planta.

2006; 5: 604-612.

СПИСОК ИСТОЧНИКОВ

16. Suh J.P, Jeung J.U., Lee J.I. et al. Identification and anal-

1. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта (с основами

ysis of QTLs controlling cold tolerance at the reproductive

статистической обработки результатов исследований).

stage and validation of effective QTLs in cold-tolerant gen-

Изд. 4-е, перераб. и доп. M: Колос, 1979. 416 с.

otypes of rice (Oryza sativa L.). Theor, and Appl. Genetics.

2. Дубина Е.В., Шиловский В.Н., Костылев П.И. и др.

2009; 120: 985-995.

Ген Sub1A в селекции риса на толерантность к зато-

17. Vergara B.S., Jackson M.B., De Datta S.K. Deepwater rice

плению, как фактор борьбы с сорными растениями //

and its response to deep-water stress. In: Climate and Rice.

Рисоводство. 2017. № 2. С. 20-26.

International Rice Research Institute, Los Banos, Philip-

3. Лось Г.Д. Перспективный способ гибридизации риса

pines, 1976. С. 301.

Сельскохозяйственная биология

// Сельскохозяй-

18. Xu K., Xu X., Ronald P.C. and Mackill D.J. A high-reso-

ственная биология. 1987. № 12. С. 15-17.

lution linkage map in the vicinity of the rice submergence

4. Практическое руководство по интенсивной техноло-

tolerance locus Sub1. Mol. Gen. Genet. 2000; 263: 681-689.

гии возделывания риса в Краснодарском крае. Крас-

19. Yoko Hattori, Keisuke Nagai and Motoyuki Ashikari. Rice

нодар, 1986. 38 с.

growth adapting to deepwater / Current Opinion in Plant Bi-

5. Скаженник М.А., Воробьев Н.В,, Досеева О.А,, Ме-

ology 2011, 14: 100-105. DOI: 10.1016/j.pbi.2010.09.008.

тоды физиологических исследований в рисоводстве.

Краснодар: ARRRI, 2009. 23 с.

REFERENCES

6. Catling H.D. Rice in deep water. International Rice Re-

1. Dospekhov B.A. Metodika polevogo opyta (s osnovami

search Institute, Manila, Philippines. Macmillan, London,

statisticheskoj obrabotki rezul'tatov issledovanij). Izd. 4-e,

1992. 542 с.

pererab. i dop. M: Kolos, 1979. 416 с.

7. Dubina E.V., Alabushev A.V., Kostylev P.I. et al. Introduc-

2. Dubina E.V., Shilovskij V.H., Kostylev P.I. i dr. Gen Su-

tion of the Sub1 gene into the Russian rice varieties using

b1A v selekcii risa na tolerantnost' k zatopleniyu, kak faktor

the polymerase chain reaction (PCR) methods African

bor'by s sornymi rasteniyami // Risovodstvo. 2017. № 2.

Journ. of Agricult. Res. 2018; 13 (48): 2757-2762. DOI:

S. 20-26.

10.5897/AJAR2018.13563.

3. Los' G.D. Perspektivnyj sposob gibridizacii risa Sel'sko-

8. Fukao T., Yeung El., and Bailey-Serres J. The submer-

hozyajstvennaya biologiya // Sel'skohozyajstvennaya bi-

gence tolerance regulator sub1a mediates crosstalk between

ologiya. 1987. № 12. S. 15-17.

submergence and drought tolerance in rice. The Plant Cell.

4. Prakticheskoe rukovodstvo po intensivnoj tekhnologii vozde-

2011. V. 23. P. 412-427.

lyvaniya risa v Krasnodarskom krae. Krasnodar, 1986. 38 s.

ВЕСТНИК РОССИЙСКОЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ НАУКИ • № 3-2023

РАСТЕНИЕВОДСТВО И СЕЛЕКЦИЯ

5. Skazhennik M.A., Vorob'yov N.V., Doseeva O.A. Metody

13. Sano Y., Katsumata M., Okuno K. Genetic studies of spe-

fiziologicheskih issledovanij v risovodstve. Krasnodar: AR-

ciation in cultivated rice. Inter-and intraspecific differenti-

RRI, 2009. 23 s.

ation in the waxy gene expression of rice. Euphytica. 1986;

6. Catling H.D. Rice in deep water. International Rice Re-

35 (1): 1-9.

search Institute, Manila, Philippines. Macmillan, London,

14. Septiningsih E.M., Kretzschmar Τ. Anaerobic germina-

1992. 542 s.

tion-tolerant plants and related materials and methods.

7. Dubina E.V., Alabushev A.V., Kostylev P.I. et al. Introduc-

2015. WO 2015087282 A1.

tion of the Sub1 gene into the Russian rice varieties using

15. Steffens B., Wang J., Sauter M. Interactions between eth-

the polymerase chain reaction (PCR) methods African

ylene, gibberellin and abscisic acid regulate emergence and

Journ. of Agricult. Res. 2018; 13 (48): 2757-2762. DOI:

growth rate of adventitious roots in deepwater rice. Planta.

10.5897/AJAR2018.13563.

2006; 5: 604-612.

8. Fukao T., Yeung El., and Bailey-Serres J. The submer-

16. Suh J.P, Jeung J.U., Lee J.I. et al. Identification and anal-

gence tolerance regulator sub1a mediates crosstalk between

ysis of QTLs controlling cold tolerance at the reproductive

submergence and drought tolerance in rice. The Plant Cell.

stage and validation of effective QTLs in cold-tolerant gen-

2011. V. 23. P. 412-427.

otypes of rice (Oryza sativa L.). Theor, and Appl. Genetics.

9. Hattori Y., Nagai K., Furukawa S. et al. The ethylene re-

2009; 120: 985-995.

sponse factors Snorkel1 and Snorkel2 allow rice to adapt to

17. Vergara B.S., Jackson M.B., De Datta S.K. Deepwater rice

deep water. Nature. 2009; 460: 1026-1031.

and its response to deep-water stress. In: Climate and Rice.

10. Jena K.K., Moon H.P., Mackill D.J. Marker assisted selec-

International Rice Research Institute, Los Banos, Philip-

tion - a new paradigm in plant breeding. Korean J. Breed.

pines, 1976. S. 301.

2003; 35: 133-140.

18. Xu K., Xu X., Ronald P.C. and Mackill D.J. A high-resolu-

11. Mackill D.J., Ni J. Molecular mapping and marker-assist-

tion linkage map in the vicinity of the rice submergence tol-

ed selection for major-gene traits in rice. Rice genetic. Pro-

erance locus Sub1. Mol. Gen. Genet. 2000; 263: 681-689.

ceeding of the fourth international rice genetic symposium.

19. Yoko Hattori, Keisuke Nagai and Motoyuki Ashika-

Los Banos, 2001. P. 137-151.

ri. Rice growth adapting to deepwater / Current Opin-

12. Murray M.G. Rapid isolation of high molecular weight

ion in Plant Biology 2011, 14: 100-105. DOI: 10.1016/j.

plant DNA. Genomt. 1980; 40: 379-378.

pbi.2010.09.008.

Поступила в редакцию 21.02.2023

Принята к публикации 07.03.2023