1. На главную
  2. Электронные версии
  3. Журнал аналитической химии
  4. T. 77, № 10, 2022

Журнал аналитической химии, 2022, T. 77, № 10, стр. 931-937

Сравнение лиофилизации с последующей дериватизацией и микросорбционного концентрирования в шприце (MEPS) для анализа конденсата выдыхаемого воздуха человека методом газовой хроматографии-масс-спектрометрии

А. И. Ревельский a, *, А. С. Козырь a, А. С. Самохин a, Э. Х. Анаев b, И. А. Ревельский a

a Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, химический факультет
119991 Москва, Ленинские горы, 1, стр. 3, ГСП-1, Россия

b Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова
117997 Москва, ул. Островитянова, 1, Россия

* E-mail: sorbent@yandex.ru

Поступила в редакцию 12.01.2022
После доработки 09.03.2022
Принята к публикации 09.03.2022

Полный текст (PDF)

Аннотация

Проведено сравнение двух подходов к пробоподготовке образцов конденсата выдыхаемого воздуха (КВВ) человека (здоровых добровольцев) для обнаружения следов низкомолекулярных органических соединений методом газовой хроматографии-масс-спектрометрии: лиофилизации с последующей дериватизацией и микросорбционного концентрирования в шприце (micro extraction by packed sorbent, MEPS). В виде силильных производных зарегистрирован ряд жирных, гидрокси-, дикарбоновых кислот, мочевина, в образцах также зафиксирован деканаль. В виде изобутоксикарбониловых эфиров зарегистрированы аланин, глицин, валин, пролин, изолейцин. Микросорбционное концентрирование с применением в качестве сорбента силикагеля с привитыми октадецильными группами позволило зарегистрировать в образцах КВВ ряд жирных кислот, алканов, спиртов, аминов, из альдегидов – деканаль. Примененные подходы к пробоподготовке для обнаружения следов неизвестных низкомолекулярных органических соединений в КВВ подтверждают и дополняют друг друга.

Ключевые слова: конденсат выдыхаемого воздуха, лиофилизация, дериватизация, силилирование, изобутилхлорформиат, микросорбционное концентрирование в шприце (Micro Extraction by Packed Sorbent (MEPS)), газовая хромато-масс-спектрометрия.

Выявление низкомолекулярных органических веществ, отражающих особенности биохимических процессов в организме человека (область метаболомики), представляет научный и практический интерес на протяжении последних двух десятилетий. Результат поиска литературы по базе Web of Science по ключевому слову “metabolomic” показал следующую картину: в начале 2000-х годов встречаются единичные работы, в 2006 г. зарегистрировано более 100 работ, начиная с 2009 г. количество публикаций увеличивается на 100 и более практически каждый год.

Разработке алгоритмов анализа биологических образцов человека, полученных с помощью неинвазивных методик отбора (моча, пот, слюна, выдыхаемых воздух, конденсат выдыхаемого воздуха), на сегодняшний день уделяется большое внимание. В случае метаболомного анализа таких образцов искомые аналиты необходимо определять на следовом уровне на фоне сложной многокомпонентной матрицы. По этой причине для таких образцов применяют высокоселективные и высокочувствительные методы анализа многокомпонентных смесей (хромато-масс-спектрометрию, в частности) в сочетании с эффективными способами пробоподготовки [1].

Анализ выдыхаемого воздуха ограничен летучими органическими соединениями. Он не охватывает многие полярные и нелетучие низкомолекулярные органические вещества, отражающие биохимические процессы в организме человека. Наблюдаются потери определяемых веществ при пробоотборе [2].

Конденсат выдыхаемого воздуха позволяет при проботборе охватить более широкий спектр потенциальных маркеров заболевания (в том числе неорганических, полярных и нелетучих низкомолекулярных органических веществ, высокомолекулярных веществ), но при этом вещества находятся в образце на следовом уровне [3–6].

Рост количества публикаций, отражающих результаты научных исследований образцов конденсата выдыхаемого воздуха, заметен с начала 2000-х годов, начиная с 2008 г. и по настоящее время количество ежегодных публикаций не уменьшается.

В 2005 г. от имени специальной комиссии Американского торакального общества (ATS) и Европейского респираторного общества (ERS) была выпущена статья, в которой представлено руководство по проведению отбора образцов КВВ (и их анализа) с рекомендациями по использованию такого подхода к диагностике и описанием путей дальнейшего развития с целью его стандартизации [7].

Авторы обзора [8] рассмотрели пути развития подхода к диагностике заболеваний, основанного на анализе образцов КВВ, начиная с упомянутой выше статьи с рекомендациями ATS/ERS по 2013 г. Представлено многообразие коммерческих устройств для отбора конденсата выдыхаемого воздуха, среди которых и прибор EcoScreen (производитель “Erich Jaeger”, Германия), с помощью которого отбирали образцы КВВ и в нашем исследовании. Сбор образцов КВВ у каждого пациента или добровольца с помощью этой установки занимает 10−15 мин. Объем каждой пробы составляет от 1.5 до 2.5 мл. При этом акцентируется внимание на хорошей воспроизводимости значений объема отобранных образцов КВВ. Говоря о новых подходах к анализу конденсата выдыхаемого воздуха (в том числе и с точки зрения повышения воспроизводимости результатов), авторы делают акцент на метаболомном анализе.

Cтандартизация пробоотбора КВВ и анализа для применения в клинической практике не завершена и дальнейшие исследования представляют интерес [8, 9].

Следует отметить, что в большинстве случаев в КВВ здоровых добровольцев содержание низкомолекулярных органических соединений находится на более низком уровне, чем при патологиях [10].

Как и в случаях других биологических жидкостей, при пробоподготовке КВВ используют жидкостно-жидкостную и твердофазную экстракцию. Авторы публикации [11] сравнили эти два варианта пробоподготовки для анализа образцов КВВ здоровых добровольцев методом газовой хроматографии-масс-спектрометрии (ГХ-МС) высокого разрешения. Остатки воды в растворах, полученных после проведения жидкостно-жидкостной экстракции и стадии десорбции твердофазной экстракции, вымораживали. Органическую фазу отделяли. В качестве сорбента для твердофазной экстракции использовали силикагель с привитыми октадецильными группами. Исследовав образцы КВВ 50 здоровых добровольцев с применением обоих методов пробоподготовки, авторы выделили жидкостно-жидкостную экстракцию (обнаружен 51 компонент по сравнению с 39 после применения твердофазной экстракции). В качестве растворителя для экстракции выбран гексан. Среди обнаруженных соединений ряд жирных кислот, фенол, бензиловый спирт, индол, триэтилцитрат, альдегидов не обнаружено.

В работе [12] почти тот же коллектив авторов применил для поиска низкомолекулярных органических соединений в КВВ здоровых волонтеров метод высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией высокого разрешения. Сравнивали результаты анализа с применением для пробоподготовки твердофазной экстракции на гидрофильном и липофильном (силикагель с октадецильными группами) сорбентах и лиофилизации. Авторам удалось обнаружить 49 соединений, включая аминокислоты, жирные кислоты, амиды, жирные альдегиды, имидазолы, дикарбоновые кислоты, гидроксикислоты. Применение твердофазной экстракции с сорбентом С18 позволило обнаружить в КВВ в два раза больше веществ (22) по сравнению с гидрофильным сорбентом (9) (шесть компонентов совпадают в обеих группах). Наибольшее количество компонентов удалось обнаружить в случае применения для пробоподготовки лиофилизацию образцов КВВ.

При анализе КВВ используют различные варианты миниатюризации методов пробоподготовки. Так, методом твердофазной микроэкстракции (ТФМЭ) удалось определить в образцах КВВ здоровых добровольцев нормальные и разветвленные углеводороды, спирты, кетоны, альдегиды, карбоновые кислоты. При этом авторы концентрировали аналиты не только из паровой фазы над образцами КВВ, но и непосредственно из жидкой фазы образов. В последнем случае удалось извлечь большее количество компонентов [13]. ТФМЭ с использованием графен/полианилинового покрытия позволила определить ряд альдегидов в образцах здоровых волонтеров и пациентов с раком легких [14].

Микросорбционное концентрирование в шприце (англ. microextraction by packed sorbent, MEPS) – также один из вариантов миниатюризации твердофазной экстракции [15]. Основные особенности метода связаны с количеством сорбента, применяемым для экстракции, и техникой эксперимента пробоподготовки. Обычно для экстракции применяют очень небольшое количество сорбента (до 4 мг), в коммерческом варианте упакованного в герметичный картридж, смонтированный на игле шприца, который, в свою очередь, находится в дозаторе с программируемым управлением (скорость потока образца, количество циклов кондиционирования, сорбции, промывки, элюирования). В отличие от твердофазной экстракции, когда поток жидкого образца (или элюента) проходит в одном направлении (сверху вниз) и однократно, при микросорбционном концентрировании в шприце применяюет технику эксперимента, основанную на многократном (около 10 раз) пропускании раствора через сорбент в двух направлениях (вверх и вниз) [16].

Применяя несколько циклов прокачки образца в двух направлениях, удается повысить степень извлечения следов аналитов из образца. Благодаря малому количеству сорбента и правильному подбору состава элюента компоненты матрицы при этом незначительно задерживаются на сорбенте (сорбент регенерируется между анализами), что позволяет использовать иглу с картриджем многократно. Малое количество сорбента дает возможность значительно, до десятков микролитров, уменьшить количество элюента при десорбции, что, в свою очередь, не только значительно уменьшает разбавление пробы, но и позволяет ввести десорбированные аналиты непосредственно в кран-дозатор жидкостного хроматографа или в инжектор с программированием температуры газового хроматографа. Коммерчески доступны иглы с картриджами с широким спектром сорбентов, список которых постоянно пополняется. MEPS успешно используют для анализа водных матриц и различных биологических жидкостей, таких как моча, плазма, сыворотка, слюна и кровь. Литературные данные по анализу конденсата выдыхаемого воздуха с использованием MEPS нами не обнаружены.

Цель данной работы − сравнение методов пробоподготовки образцов КВВ здоровых волонтеров для обнаружения низкомолекулярных органических веществ методом ГХ-МС. Сравнивали лиофилизацию с последующей дериватизацией (в качестве реагентов использовали бис(триметилсилил)трифторацетамид-N,O (БСТФА) и изобутилхлорформиат) и микросорбционное концентрирование в шприце (MEPS).

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Образцы КВВ отбирали с помощью установки ECoScreen (Jaeger, Würzburg, Германия) у здоровых добровольцев с нормальными показаниями функции легких, с отсутствием в анамнезе указаний на атопию, хронические заболевания легких, других органов и систем, а также с отсутствием острых респираторных симптомов в течении последних двух месяцев. Отобранный конденсат переливали в стеклянные виалы объемом 1.5 по 1 мл и замораживали. Исследовали образцы восьми добровольцев (по три-четыре образца для каждого). Аликвоты образцов, пробоподготовка которых была основана на дериватизации, лиофилизировали. Силилирование сухого остатка образцов КВВ после лиофилизации проводили, добавляя 50 мкл БСТФА и выдерживая реакционную смесь при 80°С в течение 30 мин. Далее раствор остужали, упаривали в токе азота и добавляли 50 мкл метил-трет-бутилового эфира. При другом варианте дириватизации к образцам КВВ после лиофильной сушки последовательно добавляли 50 мкл ацетонитрила, 2 мкл пиридина и 1 мкл изобутилхлорформиата. Условия взяты из работы [17], в которой изучали дериватизацию жирных кислот [17]. Реакция проходила при комнатной температуре в течение минуты.

Микросорбционное концентрирование в шприце проводили с помощью электронного дозатора MEPS-eVol с возможностью программирования условий работы (SGE Analytical Science, Австралия). В дозатор вставляли стеклянный шприц для проведения микросорбционного концентрирования объемом 50 мкл (SGE Analytical Science, Австралия), к шприцу подсоединяли сменные иглы с встроенными картриджами с сорбентом (силикагель с привитой фазой С18). Размер частиц силикагеля – 45 мкм, размер пор – 60 Å. Масса сорбента – 4 мг (SGE Analytical Science, Австралия). До отбора образцов КВВ сорбент кондиционировали, пропуская в обоих направлениях последовательно метанол, дистиллированную воду, 0.1%-ную муравьиную кислоту (3 × 50 мкл, скорость – 900 мкл/мин для каждого их растворителей). Выбирая условия сорбции и десорбции, отталкивались от результатов нашего исследования [18] более сложных с точки зрения матрицы образцов сыворотки крови.

Анализировали аликвоты образцов КВВ здоровых добровольцев объемом 300 мкл. На стадии сорбции пропускали через картридж с сорбентом в обе стороны аликвоты образца, равные 50 мкл (объем шприца), 15 раз со скоростью 300 мкл/мин. Далее сорбент промывали 1%-ной муравьиной кислоты (два раза по 20 мкл, скорость 500 мкл/мин). На следующей стадии высушивали сорбент, прокачивая через него воздух (20 раз по 50 мкл, скорость 900 мкл/мин). Десорбировали аналиты диэтиловым эфиром (пять раз по 20 мкл, скорость 600 мкл/мин). Упаривали полученный раствор до 50 мкл в токе азота.

Все последовательности действий с образцами КВВ при сравниваемых вариантах пробоподготовки, повторяли для холостого опыта (дистиллированная вода).

Растворы реакционных смесей после проведения реакций дериватизации и элюаты после стадии десорбции микросорбционного концентрирования анализировали с помощью газового хроматографа (7890A, Agilent), соединенного с времяпролетным масс-спектрометром Pegasus HT (GC-TOFMS – LECO Corporation). Объем анализируемой пробы составлял 1 мкл. Ввод пробы осуществляли в режиме с делением/без деления потока в инжектор, нагретый до 250°С. Делитель потока открывался через 30 с после ввода пробы в инжектор. Вещества разделяли на колонке VF-5ms длиной 30 м, внутренним диаметром 0.25 мм, толщиной неподвижной фазы (5% фенил-, 95% метилполисилоксан) 0.25 мкм в режиме программирования температуры (изотерма 50°С (5 мин), нагревание термостата со скоростью 10 °С/мин до 250°С (изотерма 10 мин)). Скорость потока газа-носителя гелия 1 мл/мин. Аналитические сигналы регистрировали в режиме полного ионного тока, энергия электронов 70 еВ. Диапазон сканирования – от 50 до 600 а.е.м.. Масс-спектры обнаруженных компонентов сравнивали с библиотечными (NIST).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Дериватизацию сухого остатка образцов КВВ применили с целью расширения потенциального перечня аналитов, определяемых методом ГХ-МС, и снижения пределов их обнаружения. Наряду с широко используемым силилированием продуктов лиофилизации использовали реакцию с изобутилхлорформиатом. Обычно хлорформиаты применяют для дериватизации аналитов по аминным и карбоксильным группам в водной среде. Примеров применения таких реагентов для дериватизации продуктов лиофилизации КВВ в литературе не обнаружено. Базируясь на условиях дериватизации жирных кислот в безводной среде [17], провели пробоподготовку лиофилизатов образцов КВВ с применением изобутилхлоформиата. В виде N-изобутоксикарбонил-, изобутиловых эфиров и изобутиловых эфиров обнаружили ряд полярных соединений, включающий жирные, дикарбоновые и аминокислоты (табл. 1), а в недериватизированном виде – деканаль.

Таблица 1.

Сравнение результатов анализа образцов конденсата выделяемого воздуха здоровых волонтеров методом газовой хромато-масс-спектрометрии с применением различных вариантов пробоподготовки

№ Обнаруженное вещество Лиофилизация, БСТФА* Лиофилизация, изобутилхлорформиат** MEPS
1 Фенол – – +
2 Гексановая кислота – + –
3 3-Гидроксибутановая кислота + – –
4 Гептановая кислота + + +
5 2-Гидроксипентановая кислота + – –
6 Деканаль + + +
7 Мочевина, N,N’ + – –
8 Бензойная кислота + + –
9 Октановая кислота + + +
10 Бутандиовая кислота + + +
11 Бензиловый спирт – – +
12 Нонановая кислота + + +
13 Декановая кислота + + –
14 2-Гидроксиоктановая кислота + – –
15 Аланин – + –
16 Глицин – + –
17 Валин – + –
18 Пролин – + –
19 Изолейцин – + –
20 Гександиовая кислота + + –
21 Додекановая кислота + – +
22 Деканол – – +
23 Гептандиовая кислота – + –
24 Октандиовая кислота – + –
25 Нонандиовая кислота + + –
26 Гексадекановая кислота + + –

* Вещества зарегистрированы в виде триметилсиловых эфиров (за исключением деканаля); ** вещества зарегистрированы в виде N-изобутоксикарбонил-, изобутиловых эфиров (аминокислоты) и изобутиловых эфиров (за исключением деканаля).

В виде силильных производных зарегистрировали бензойную кислоту, мочевину, жирные, дикарбоновые и гидроксикислоты (табл. 1). Также обнаружили деканаль.

С помощью микросорбционного концентрирования в шприце с применением миллиграммовых количеств силикагеля с привитыми октадецильными группами в образцах КВВ здоровых добровольцев обнаружили ряд среднелетучих органических соединений (СЛОС).

Разделение термостабильных низкомолекулярных органических соединений на летучие и среднелетучие условно и связано с их температурами кипения. Летучие органические соединения легко испаряются при нормальных условиях. Нижняя граница температур кипения среднелетучих органических соединений отличается в разных источниках. От чуть больше 100°С (например, пиридин − 115.6°С) [19] до 250°С [20].

СЛОС характеризуют и давлением паров при температуре окружающей среды. Диапазоны значений давлений паров веществ, относимых к СЛОС, представленные в различных источниках, также отличаются: от 10 до 10–6 (10–9) Па [21, 22]; от 10–1 (10–2) до 10–6 Па [23, 24].

С точки зрения техники эксперимента причина, по которой термостабильные низкомолекулярные органические вещества делят на летучие и среднелетучие, связана с толщиной неподвижной фазы капиллярных колонок, используемых для разделения соединений. Для летучих органических соединений это обычно микрометры (1.0–3.0), для среднелетучих – доли микрометра (0.1–0.25). В данном исследовании использовали колонку, на которой эффективно и селективно разделяют и СЛОС, и производные нелетучих низкомолекулярных органических соединений.

В перечень среднелетучих органических соединений, выделенных с помощью микросорбционного концентрирования в шприце, попали жирные кислоты, фенол, деканол, бензиловый спирт и деканаль. Зарегистрировали ряд веществ экзогенного происхождения.

Обнаруженные среднелетучие органические соединения различной полярности и нелетучие органические соединения представлены в табл. 1. В таблицу внесены только те вещества, которые обнаружили у всех волонтеров. Отношение сигнал/шум для хроматографических пиков выбранных веществ составляло не менее 100/1. Различия в содержании от образца к образцу не учитывали, так как на данном этапе исследования проводили только качественный анализ и при указанном соотношении сигнал/шум коэффициент разбавления аналитов в образцах КВВ не должен был влиять на их обнаружение.

Как видно из табл. 1, рассмотренные методы пробоподготовки дополняют друг друга. Большинство обнаруженных соединений согласно литературным данным входит в перечень веществ, идентифицированных в образцах КВВ здоровых добровольцев с применением газовой хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения [11]. При этом ряд полярных соединений, в том числе дикарбоновые, гидроксикислоты, аминокислоты, обнаруженные в нашем исследовании, расширяют этот список. Сравниваемые варианты пробоподготовки позволили также обнаружить в КВВ деканаль.

Обычно при сочетании пробоподготовки, результатом которой является раствор органических веществ, и газовой хроматографии в инжектор хроматографа вводят количество аналитов, содержащихся в 1−2 мкл экстракта. В нашем предыдущем исследовании [25] мы вводили в инжектор количество аналитов, содержащихся в 100 мкл органического раствора, полученного в результате жидкостно−жидкостной экстракции из образцов КВВ, используя один из вариантов ввода больших по объему проб (large volume injection). Аналиты вводили в инжектор ГХ посредством термодесорбции после предварительного удаления растворителя. Такой вариант ввода пробы заметно снижал предел обнаружения и увеличивал возможность обнаружения большего числа среднелетучих органических веществ в образцах по сравнению с вводом 1 мкл экстракта. Результаты получили для 10 образцов КВВ здоровых волонтеров. При такой технике ввода пробы в образцах здоровых добровольцев обнаружили ряд жирных кислот от гексановой до октадекановой. При этом содержание тех жирных кислот, которые удалось зарегистрировать в настоящей работе (от гексановой до декановой, додекановая и гексадекановая), было заметно выше остальных. В результате обоих исследований обнаружены фенол, деканаль, деканол, бензиловый спирт.

Это сравнение показывает перспективность сочетания MEPS с коммерческим вариантом ввода больших по объему проб в инжектор газового хроматографа с программированием температуры для обнаружения СЛОС.

Заметим, что возможность варьирования сорбентов в этом методе позволит охватить более широкий спектр следовых количеств низкомолекулярных органических соединений различной полярности. Вероятно, достоинства этого метода концентрирования проявятся и при целевом анализе биомаркеров.

* * *

Применение двух вариантов пробоподготовки образцов КВВ здоровых добровольцев (дериватизации лиофилизатов образцов и микросорбционного концентрирования в шприце (MEPS)) для ГХ-МС-анализа позволило обнаружить 26 низкомолекулярных среднелетучих и нелетучих органических соединений. Метод микросорбционного концентрирования в шприце впервые применен для анализа КВВ, миллиграммовые количества наиболее распространенного сорбента для обычной твердофазной экстракции – силикагеля с привитыми октадецильными группами – позволили выделить и сконцентрировать ряд среднелетучих органических соединений, характерных для КВВ здоровых добровольцев. Представляет интерес дальнейшее исследование КВВ с применением рассмотренных вариантов пробоподготовки, но с использованием инжектора с программированием температуры для ввода больших по объему проб в ГХ-МС и более современного оборудования с пределом детектирования на уровне десятков фемтограмм.

Исследование было выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 20-03-00894.

Работа выполнена с использованием оборудования, приобретенного за счет средств Программы развития Московского университета.

Список литературы

  1. Maniscalco M., Paris D., Melck D.J., Molino A., Fuschillo S., Motta A. Metabolomics of exhaled breath condensate by nuclear magnetic resonance spectroscopy and mass spectrometry: A methodological approach // Curr. Med. Chem. 2020. V. 27. P. 2381. https://doi.org/10.2174/0929867325666181008122749

  2. Prado C., Marín P., Periago J.F. Application of solid-phase microextraction and gas chromatography-mass spectrometry to the determination of volatile organic compounds in end-exhaled breath samples // J. Chromatogr. A. 2003. V. 1011. № 1–2. P. 125. https://doi.org/10.1016/S0021-9673(03)01103-8

  3. Анаев Э.Х., Чучалин А.Г. Исследование конденсата выдыхаемого воздуха в пульмонологии (обзор зарубежной литературы) // Пульмонология. 2002. № 2. С. 57.

  4. Quimbar M.E., Davis S.Q., Al-Farra S.T., Hayes A., Jovic V., Masuda M., Lippert A.R. Chemiluminescent measurement of hydrogen peroxide in the exhaled breath condensate of healthy and asthmatic adults // Anal. Chem. 2020. V. 92. P. 14594. https://doi.org/10.1021/acs.analchem.0c02929

  5. Rahimpour E., Khoubnasabjafari M., Jouyban-Gharamaleki V., Jouyban A. Non-volatile compounds in exhaled breath condensate: Review of methodological aspects // Anal. Bioanal. Chem. 2018. V. 410. P. 6411. https://doi.org/10.1007/s00216-018-1259-4

  6. Hayes S.A., Haefliger S., Harris B., Pavlakis N., Clarke S.J., Molloy M.P., Howell V.M. Exhaled breath condensate for lung cancer protein analysis: A review of methods and biomarkers // J. Breath Res. 2016. V. 10. Article 034001. https://doi.org/10.1088/1752-7155/10/3/034001

  7. Horváth I., Hunt J., Barnes P.J. Exhaled breath condensate: Methodological recommendations and unresolved questions // Euro. Respir. J. 2005. V. 26. P. 523. https://doi.org/10.1183/09031936.05.00029705

  8. Ahmadzai H., Huang S., Hettiarachchi R., Lin J.L., Thomas P.S., Zhang Q. Exhaled breath condensate: A comprehensive update // Clin. Chem. Lab. Med. 2013. V. 51. P. 1343. https://doi.org/10.1515/cclm-2012-05939

  9. Połomska J., Bar K., Soza’nska B. Exhaled breath condensate — A non-invasive approach for diagnostic methods in asthma // J. Clin. Med. 2021. V. 10. Article 2697. https://doi.org/10.3390/jcm10122697

  10. Konstantinidi E.M., Lappas A.S., Tzortzi A.S., Behrakis P.K. Exhaled breath condensate: Technical and diagnostic aspects // Sci. World J. 2015. Article 435160. https://doi.org/10.1155/2015/435160

  11. Peralbo-Molina A., Calderón-Santiago M., Priego-Capote F., Jurado-Gámez B., Luque de Castro M.D. Development of a method for metabolomic analysis of human exhaled breath condensate by gas chromatography–mass spectrometry in high resolution mode // Anal. Chim. Acta. 2015. V. 887. P. 118. https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.07.008

  12. Fernández-Peralbo M.A., Calderón Santiago M., Priego-Capote F., Luque de Castro M.D. Study of exhaled breath condensate sample preparation for metabolomics analysis by LC–MS/MS in high resolution mode // Talanta. 2015. V. 144. P. 1360. https://doi.org/10.1016/j.talanta.2015.08.010

  13. Aksenov A.A., Zamuruyev K.O., Pasamontes A., Brown J.F., Schivo M., Foutouhi S., Weimer B.C., Kenyon N.J., Davis C.E. Analytical methodologies for broad metabolite coverage of exhaled breath condensate // J. Chromatogr. B. 2017. V. 1061–1062. P. 17. https://doi.org/10.1016/j.jchromb.2017.06.038

  14. Xu Y.L.H. Development of a novel graphene/polyaniline electrodeposited coating for on-line in-tube solid phase microextraction of aldehydes in human exhaled breath condensate // J. Chromatogr. A. 2015. V. 1395. C. 35. https://doi.org/10.1016/j.chroma.2015.03.058

  15. Yang L., Said R., Abdel-Rehim M. Sorbent, device, matrix and application in microextraction by packed sorbent (MEPS): A review // J. Chromatogr. B. 2017. V. 1043. P. 33

  16. Moein M.M., Abdel-Rehim A., Abdel-Rehim M. Microextraction by packed sorbent (MEPS) // Trends Anal. Chem. 2015. V. 67. P. 34. https://doi.org/10.1016/j.trac.2014.12.003

  17. Hušek P., Rijks J.A., Leclercq P.A., Cramers C.A. Fast esterification of fatty acids with alkyl chloroformates. Optimization and application in gas chromatography // J. High Resolut. Chromatogr. 1990. V. 13. P. 633. https://doi.org/10.1002/jhrc.1240130910

  18. Pautova A.K., Sobolev P.D., Revelsky A.I. Analysis of phenylcarboxylic acid-type microbial metabolites by microextraction by packed sorbent from blood serum followed by GC–MS detection // Clin. Mass Spectrom. 2019. V. 14 (A). P. 46. https://doi.org/10.1016/j.clinms.2019.05.005

  19. EPA, Method 8270 https://www.epa.gov/sites/default/files/2020-10/documents/method_8270e_update_vi_06-2018_0.pdf (26.05.2022).

  20. EPA, Technical Overview of Volatile Organic Compounds, https://www.epa.gov/indoor-air-quality-iaq/ technical-overview-volatile-organic-compounds (26.05. 2022).

  21. Bidleman T.F. Atmospheric processes: Wet and dry deposition of organic compounds are controlled by their vapor-particle partitioning // Environ. Sci. Technol. 1988. V. 22. P. 361. https://doi.org/10.1021/es00169a002

  22. Weschler C.J., Nazaroff W.W. Semivolatile organic compounds in indoor environments // Atmos. Environ. 2008. V. 42. P. 9018. https://doi.org/10.1016/j.atmosenv.2008.09.052

  23. Wania F., Shunthirasingham C. Passive air sampling for semi-volatile organic chemicals // Environ. Sci.: Processes Impacts. 2020. V. 22. P. 1925. https://doi.org/10.1039/D0EM00194E

  24. Cousins I.T., Beck A.J., Jones K.C. A review of the processes involved in the exchange of semi-volatile organic compounds (SVOC) across the air–soil interface // Sci. Total Environ. 1999. V. 288. P. 5. https://doi.org/10.1016/S0048-9697(99)00015-7

  25. Родионов А.А., Ревельский А.И., Ревельский И.А., Анохина Т.Н., Анаев Э.Х. Хроматомасс-спектрометрическое определение среднелетучих органических веществ в конденсате выдыхаемого воздуха // Масс-спектрометрия. 2007. Т. 4. № 2. С. 143. (Rodionov A.A., Revelsky A.I., Revelsky I.A., Anokhina T.N., Anaev E.Kh. Determination of semivolatile organic compounds in exhaled breath condensate by gas chromatography–mass spectrometry // J. Anal. Chem. 2014. V. 69. № 14. P. 1330. )https://doi.org/10.1134/S1061934814140081

Дополнительные материалы отсутствуют.

Инструменты

следующая статья выпуска предыдущая статья выпуска содержание выпуска

Журнал аналитической химии

Архивы выпусков Информация о журнале Отправить рукопись в журнал