Экология, 2020, № 2, стр. 83-89
Азотное питание растений альпийской лишайниковой пустоши в условиях обогащения почвы элементами минерального питания
М. И. Макаров a, *, Н. Г. Лавренов a, В. Г. Онипченко a, А. В. Тиунов b, Т. И. Малышева a, Р. В. Сабирова a
a Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
119234 Москва, Ленинские горы, 1, стр. 12, Россия
b Институт проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова
119071 Москва, Ленинский просп., 33, Россия
* E-mail: mmakarov@soil.msu.ru
Поступила в редакцию 28.08.2018
После доработки 05.12.2018
Принята к публикации 25.08.2019
Аннотация
Результаты долговременного эксперимента с обогащением почвы альпийской лишайниковой пустоши элементами минерального питания показали, что при внесении кальция и снижении кислотности почвы не изменяются ее азотный режим и закономерности азотного питания растений. Повышение доступности фосфора способствует мобилизации азота органических соединений почвы и изменению роли микоризы в азотном питании растений, что приводит к формированию у них более тяжелого изотопного состава азота. У азотфиксирующего вида бобовых (Oxytropis kubanensis) при этом снижается интенсивность азотфиксации. Повышение доступности азота приводит к его активному поглощению всеми изученными видами растений, за исключением Oxytropis kubanensis, и “утяжелению” изотопного состава азота растений. Однако изменение азотного статуса у разных видов растений выражено в разной степени.
Азот и фосфор – одни из ключевых биогенных элементов, лимитирующих продукцию многих наземных экосистем, включая высокогорные [1, 2]. Продукция горных фитоценозов умеренной зоны мало лимитирована фосфором и калием, так как эти элементы поступают в почву в достаточном количестве при выветривании горных пород. Чаще развитие растений ограничено недостатком азота, иммобилизованного в органическом веществе [3, 4].
Высокогорные экосистемы привлекают интерес исследователей как объекты, малозатронутые антропогенной деятельностью и чувствительные к изменениям климата [5]. При увеличении температуры в почвах могут ускориться процессы минерализации органического азота и нитрификации, что может заметно изменить как биогеохимические циклы азота, так и азотный режим отдельных видов растений [6, 7]. Однако в высокогорных экосистемах умеренного пояса, отличающихся от других наземных экосистем особым температурным и азотным режимами, эти явления изучены недостаточно [5].
Для исследования азотного режима растений и азотного статуса экосистем часто проводят эксперименты с внесением элементов минерального питания. При долговременном повышении доступности элементов биомасса и участие отдельных видов в составе высокогорных растительных сообществ изменяются [3, 8]. Однако не исследовано, как меняется при этом азотный режим отдельных видов и функциональных групп растений (злаков, осок, разнотравья, бобовых). Мы предположили, что изменение азотного состояния растений при повышении концентрации подвижных форм элемента в почве может быть не только следствием прямого их поглощения, но и результатом изменения закономерностей функционирования микробного сообщества, микоризного симбиоза и симбиотической азотфиксации в связи с изменяющейся доступностью азота и фосфора. Поскольку особенно ярко индивидуальные реакции видов растений при повышении доступности элементов минерального питания должны проявляться в наиболее лимитированных экосистемах, то в качестве модельного сообщества для проверки гипотезы выбрана альпийская лишайниковая пустошь, почва которой содержит наименьшее количество доступного азота в сравнении с другими сообществами альпийского пояса [9].
ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ
Исследование выполнено в альпийском поясе Тебердинского государственного заповедника, где в 1998 г. был заложен эксперимент с ресурсным манипулированием. Эксперимент включает пять вариантов: 1) контроль; 2) ежегодное внесение азота (9 г/м2) в виде карбамида с δ15N = 0.11 ± 0.09‰ (вариант N); 3) ежегодное внесение фосфора (2.5 г/м2) в составе двойного суперфосфата (вариант P); 4) ежегодное внесение совместно азота и фосфора в тех же дозах и тех же соединениях (вариант NP); 5) раз в три года известкование гашеной известью (52 г/м2) (вариант Ca). Все удобрения вносятся в твердом виде на поверхность почвы вскоре после схода снежного покрова в мае. Экспериментальные площадки представляют собой квадрат со стороной 1.5 м. Каждый вариант эксперимента заложен в четырехкратной повторности. Детальное описание эксперимента приведено в прежних публикациях [8, 10].
Альпийские лишайниковые пустоши (класс Juncetea trifidi) формируются на обдуваемых хребтах с минимальным накоплением снега в зимний период. Их отличительная особенность заключается в высокой доле участия кустистых лишайников в растительном сообществе. Для исследования было выбрано семь видов сосудистых растений: Anemone speciosa, Antennaria dioica, Campanula tridentata, Carex umbrosa, Festuca ovina, Oxitropis kubanensis, Trifolium polyphyllum. Основными критериями при выборе видов были высокое участие, равномерная встречаемость на площадках эксперимента и систематическое разнообразие. Виды относятся к четырем функциональным группам: разнотравье (Anemone speciosa, Antennaria dioica, Campanula tridentata), злаки (Festuca ovina), осоки (Carex umbrosa) и бобовые (Oxitropis kubanensis, Trifolium polyphyllum).
Во всех вариантах эксперимента в 2016 г. отбирали листья растений – по одному образцу с каждого квадрата и дополнительно один образец с квадрата с наибольшей встречаемостью вида (всего по пять образцов вида с каждого варианта, суммарно 175 образцов). Отобранные образцы высушивали в течение 10 ч при температуре 45°C, измельчали на вибрационной мельнице Retsch MM 200 и анализировали на общее содержание и изотопный состав азота (δ15N) на элементном анализаторе Thermo Flash 1112 и изотопном масс-спектрометре Thermo Delta VPlus в Институте проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова РАН.
Одновременно отбирали образцы почвы из слоя 0‒10 см ‒ по два с каждого квадрата (всего по 8 образцов каждого варианта, суммарно 40 образцов), в которых определяли следующие показатели: кислотность (pH) в почвенной суспензии, общее содержание C и N (Cобщ и Nобщ), содержание экстрагируемого фосфора (Pподв) по Кирсанову и концентрации разных форм C и N, экстрагируемых 0.05 М K2SO4 (углерод органических соединений (Сорг), общий азот (Nэкстр), N-N${\text{H}}_{4}^{ + }$ и N-N${\text{O}}_{3}^{ - }$). Экстрагируемый азот органических соединений (Nорг) рассчитывали по разности между Nэкстр и суммой N-N${\text{H}}_{4}^{ + }$ + N-N${\text{O}}_{3}^{ - }$. Для определения концентрации N-N${\text{H}}_{4}^{ + }$ использовали салицилат-нитропрусидный метод [11], а N-N${\text{O}}_{3}^{ - }$ определяли после восстановлении N${\text{O}}_{3}^{ - }$ до N${\text{O}}_{2}^{ - }$ на кадмиевой колонке и получения окрашенного азосоединения [12]. Фосфор определяли аскорбиновым методом по Мэрфи и Райли.
Концентрации Cорг и Nэкстр измеряли на анализаторе TOC-VCPN; неорганические формы азота и фосфор ‒ на спектрофотометре GENESYSTM 10UV; общее содержание C и N ‒ на элементном анализаторе Thermo Flash 1112 в Институте проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова РАН.
Для проверки значимости влияния фактора “вариант” на изучаемые показатели использовали параметрические и непараметрические критерии. Если распределение данных не отличалось от нормального и их дисперсии были равны, то для дальнейшего исследования использовали дисперсионный анализ (ANOVA). Если распределение данных не отличалось от нормального, но дисперсии были неравными, то применяли дисперсионный анализ (ANOVA) с коррекцией Уилча. В случае отличия распределения данных от нормального для анализа выбирали непараметрический тест Краскела-Уоллиса (Kruskal-Wallis test).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Влияние длительного внесения элементов на свойства почвы
Горно-луговая почва альпийской лишайниковой пустоши кислая (pH 5.06), содержит большое количество органического вещества и азота (11% Собщ и 0.97% Nобщ). Соотношение C/N составляет 11.3. Несмотря на большое содержание Nобщ, количество подвижных форм элемента невелико. В составе неорганического N преобладает N-N${\text{H}}_{4}^{ + }$ (16.3 мг/кг), а N-N${\text{O}}_{3}^{ - }$ всего 2.2 мг/кг. Содержание экстрагируемого Nорг также небольшое (9.5 мг/кг). Соотношение C/N в экстрагируемом органическом веществе (9.8) меньше, чем в общем органическом веществе почвы (11.3). Содержание подвижного фосфора составляет 10.8 мг/кг (табл. 1).
Таблица 1.
Вариант | Cобщ | Nобщ | Cобщ/Nобщ | P, мг/кг | pH | N-N${\text{H}}_{4}^{ + }$ | N-N${\text{O}}_{3}^{ - }$ | Сорг | Nорг | Сорг/Nорг |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
% | мг/кг | |||||||||
Контроль | 11.0 ± 1.3а | 0.97 ± 0.12а | 11.3 ± 0.8а | 10.8 ± 6.0а | 5.06 ± 0.15а | 16.3 ± 4.8а | 2.2 ± 0.5а | 91.4 ± 19.8аб | 9.5 ± 2.5а | 9.8 ± 1.3а |
Ca | 11.1 ± 1.8а | 0.97 ± 0.15а | 11.4 ± 0.7а | 9.5 ± 2.7а | 5.44 ± 0.13б | 23.5 ± 9.3аб | 2.9 ± 1.1а | 124.4 ± 42.1а | 12.0 ± 4.2а | 10.5 ± 2.2аб |
P | 10.8 ± 1.7а | 0.94 ± 0.12а | 11.4 ± 0.6а | 133.6 ± 99.7б | 4.98 ± 0.14ав | 18.2 ± 3.1а | 2.1 ± 1.1а | 85.7 ± 5.8б | 7.3 ± 0.9б | 11.8 ± 1.0б |
N | 11.1 ± 2.0а | 0.99 ± 0.21а | 11.3 ± 1.1а | 6.9 ± 4.7а | 4.88 ± 0.12в | 34.5 ± 12.9б | 5.2 ± 3.8б | 107.3 ± 29.1аб | 11.4 ± 3.9а | 9.7 ± 1.7аб |
NP | 10.9 ± 1.5а | 0.95 ± 0.15а | 11.5 ± 0.4а | 73.8 ± 37.3б | 4.91 ± 0.28ав | 28.5 ± 11.8б | 3.1 ± 1.2аб | 105.0 ± 22.6а | 11.8 ± 3.5а | 9.2 ± 1.2а |
Во всех вариантах экспериментального воздействия не изменилось содержание Cобщ и Nобщ и соотношение между ними, что свидетельствует об устойчивости накопленных в горно-луговой альпийской почве запасов органического вещества к длительному интенсивному воздействию (см. табл. 1). Отсутствие повышения концентрации Nобщ при существенном поступлении азота может быть связано с тем, что при поверхностном внесении мочевины значительная часть аммиака, образующегося при ее разложении, улетучивается в атмосферу [13].
Лабильные показатели состояния почвы (обеспеченность минеральными формами элементов питания, кислотность, экстрагируемое органическое вещество) изменились. При этом изменения носят преимущественно ожидаемый характер и являются следствием прямого влияния вносимых элементов на их концентрации в почве. Так, внесение в почву азота привело к повышению содержания Nэкстр с 28.0 до 51.1 мг/кг в варианте N и до 43.3 мг/кг в варианте NP. Главный компонент, ответственный за такое повышение, ‒ это N-N${\text{H}}_{4}^{ + }$, концентрация которого возросла примерно в 2 раза (в варианте N ‒ до 34.5 мг/кг, в варианте NP ‒ до 28.5 мг/кг). В содержании N-N${\text{O}}_{3}^{ - }$ прослеживается такая же тенденция ‒ значимое увеличение концентрации (до 5.2 мг/кг) наблюдается в варианте N, в варианте NP увеличение не столь велико – 3.1 мг/кг (см. табл. 1).
Заметно изменяется содержание Pподв в вариантах с внесением этого элемента. В варианте P концентрация увеличилась в 12 раз (133 мг/кг), а в варианте NP – почти в 7 раз (74 мг/кг) (см. табл. 1). Причиной меньшей концентрации Pподв (как и неорганических соединений азота) во втором случае может быть большее вовлечение элемента в прирост биомассы при одновременном внесении двух элементов питания [3] и большее последующее его закрепление в составе органического вещества почвы.
Кислотность почвы значимо уменьшилась при известковании: величина pH повысилась до 5.44. В варианте с внесением азота, напротив, наблюдается подкисление почвы (значимое уменьшение pH до 4.9). Подкисление почвы связано как с потенциальной физиологической кислотностью карбамида, так и последующей нитрификацией образующегося из него аммония.
Из непрямых воздействий вызывают интерес изменения, произошедшие с лабильным органическим веществом. Так, наблюдается тенденция к увеличению концентраций экстрагируемых Cорг и Nорг в вариантах с известкованием, внесением азота и азота совместно с фосфором (см. табл. 1). Вероятно, это может быть результатом мобилизации органического вещества при повышении микробной активности в почвах после нейтрализации кислотности (Ca) и увеличения доступности элементов питания (N, NP). Однако наиболее выраженное изменение в этом компоненте почвы произошло при внесении фосфора. В этом случае наблюдается значимое снижение концентрации Nорг с 9.5 до 7.3 мг/кг и увеличение отношения Cорг/Nорг с 9.8 до 11.8. Хотя концентрация Cорг и не отличается значимо от контроля, но она значимо меньше, чем в вариантах Ca и NP. Вероятно, в условиях высокой доступности фосфора почвенные микроорганизмы начинают в большей степени испытывать недостаток в азотном питании и более активно утилизируют лабильные органические соединения, прежде всего азотсодержащие.
Концентрация и изотопный состав азота в альпийских растениях
Изученные виды растений альпийской лишайниковой пустоши заметно различаются по содержанию и изотопному составу азота в листьях (табл. 2). Меньшие концентрации азота (1.14‒1.29%) характерны для злаков и осок (Festuca ovina, Carex umbrosa), больше элемента (1.42‒2.31%) содержится в листьях видов разнотравья (Anemone speciosa, Antennaria dioica, Campanula tridentata), а максимальные концентрации (2.29‒3.25%) характеризуют листья бобовых растений. При этом в листьях Trifolium polyphyllum, не обладающего симбиотической азотфиксацией [14, 15], концентрация азота (2.29%) близка к видам разнотравья (Anemone speciosa, Antennaria dioica). В то же время у Oxitropis kubanensis, активно фиксирующего атмосферный азот [14], концентрация элемента (3.25%) значимо превышает концентрации у всех других видов.
Таблица 2.
Вид | Вариант | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
контроль | Ca | P | N | NP | ||||||
N, % | δ15N, ‰ | N, % | δ15N, ‰ | N, % | δ15N, ‰ | N, % | δ15N, ‰ | N, % | δ15N, ‰ | |
Anemone speciosa | 1.96 ± 0.12ав | –1.59 ± 0.43А | 1.89 ± 0.07а | –1.40 ± 0.36АБ | 1.85 ± 0.16а | –0.81 ± 0.26Б | 2.47 ± 0.05б | 0.14 ± 1.22БВ | 2.28 ± 0.25бв | 1.31 ± 1.71В |
Antennaria dioica | 1.42 ± 0.05а | –4.63 ± 0.48А | 1.41 ± 0.05а | –4.37 ± 0.52АБ | 1.43 ± 0.08аб | –3.73 ± 0.50АБ | 1.86 ± 0.40б | –2.45 ± 1.56Б | 1.95 ± 0.47б | –3.99 ± 0.27АБ |
Campanula tridentata | 2.31 ± 0.21а | –4.34 ± 0.82А | 2.34 ± 0.11а | –4.55 ± 0.55А | 2.35 ± 0.30а | –3.45 ± 1.15АВ | 3.55 ± 0.85б | 1.47 ± 2.53Б | 2.35 ± 0.55а | –1.17 ± 2.42БВ |
Carex umbrosa | 1.29 ± 0.03а | –0.59 ± 0.51А | 1.31 ± 0.07а | 0.32 ± 0.33Б | 1.31 ± 0.06а | 0.74 ± 0.61Б | 1.91 ± 0.16б | 0.14 ± 1.34АБ | 1.68 ± 0.23б | 1.57 ± 2.04АБ |
Festuca ovina | 1.14 ± 0.10а | –3.57 ± 0.41А | 1.16 ± 0.05а | –3.59 ± 0.41А | 1.07 ± 0.11а | –1.77 ± 0.70Б | 1.72 ± 0.38б | –1.33 ± 2.36АБВ | 2.40 ± 0.30в | 2.42 ± 1.68В |
Oxitropis kubanensis | 3.25 ± 0.41а | –0.78 ± 0.17А | 3.17 ± 0.31а | –0.90 ± 0.24А | 2.67 ± 0.17б | –2.32 ± 0.80Б | 2.86 ± 0.25аб | –0.87 ± 0.55А | – | – |
Trifolium polyphyllum | 2.29 ± 0.34а | –3.08 ± 0.76А | 2.15 ± 0.11а | –2.93 ± 0.77А | 2.28 ± 0.28а | –2.28 ± 1.29А | 3.45 ± 0.25б | –1.28 ± 1.64А | 2.78 ± 0.17в | –1.45 ± 1.2А 9 |
Изотопный состав азота (δ15N) в листьях разных видов растений также заметно различается, в том числе в пределах групп разнотравья и бобовых. Наиболее тяжелым азотом (наименее отрицательное (‒0.59‰) значение δ15N) среди всех изученных видов растений характеризуется Carex umbrosa, у Festuca ovina азот в листьях значительно легче (δ15N = ‒3.57‰). Заметное варьирование величины δ15N характерно для разнотравья, среди которого есть виды с легким изотопным составом азота (Antennaria dioica, Campanula tridentata) и более тяжелым (Anemone speciosa).
Такое разнообразие может объясняться тем, что изотопный состав азота в растениях зависит от ряда факторов, среди которых можно назвать использование разными растениями разных источников азота (N${\text{H}}_{4}^{ + }$, N${\text{O}}_{3}^{ - }$, Nорг) или одного источника из разных почвенных горизонтов, разную дискриминацию тяжелого изотопа при поглощении и ассимиляции разными видами растений, влияние микоризы [16‒19].
Изотопный состав азота у бобовых растений также заметно различается. Trifolium polyphyllum, который не обладает симбиотической азотфиксацией, характеризуется величиной δ15N, близкой к большинству других изученных видов с арбускулярной микоризой (‒3.08‰). В отличие от него у Oxitropis kubanensis с активно функционирующим азотфиксирующим симбиозом величина δ15N (‒0.78‰) намного ближе к показателю атмосферного азота, что позволило рассчитать вклад симбиотической азотфиксации в азотное питание этого вида бобовых, превысивший 70% [14].
Влияние длительного внесения элементов на N и δ15N в растениях
Изменение условий минерального питания сказалось на концентрации и изотопном составе азота в листьях растений (см. табл. 2). При этом разные экспериментальные воздействия по-разному повлияли на изученные показатели. Например, в результате известкования не изменились концентрации и изотопный состав азота ни у одного из изученных видов растений. Это согласуется с тем, что уменьшение кислотности почвы (на ~0.4 ед. рН) не привело к значимому влиянию на какие-либо показатели ее азотного состояния (см. табл. 1).
Влияние фосфора
Внесение в почву фосфора привело к более выраженным изменениям азотного статуса растений, которые почти не проявились в концентрациях азота, но ярко выразились в его изотопном составе. Единственным видом, у которого при повышении доступности фосфора изменилась концентрация азота (значимо уменьшилась с 3.25 до 2.67%), оказался Oxitropis kubanensis. Одновременно у него значимо уменьшилась величина δ15N (от ‒ 0.78 до ‒2.32‰), приблизившись к показателям, характерным для видов разнотравья. Направленность изменения обоих показателей говорит о том, что повышение доступности фосфора могло привести к снижению активности симбиотической азотфиксации. Поскольку считается, что, напротив, низкая доступность фосфора может лимитировать активность азотфиксации [20], то для объяснения полученного результата требуется дополнительное исследование. В отношении другого вида бобовых (Trifolium polyphyllum) мы предполагали, что низкая доступность фосфора в почве может быть причиной отсутствия формирования симбиоза с клубеньковыми бактериями. Однако T. polyphyllum не начинает проявлять признаки азотфиксации (увеличение концентрации азота и величины δ15N) при значительном повышении доступности фосфора в почве, что свидетельствует о другой причине отсутствия азотфиксации у этого вида бобовых.
У всех других изученных видов растений концентрация азота при внесении в почву фосфора не изменилась, но при этом возросла величина δ15N (значимо у четырех видов). Прямая связь между концентрацией фосфора и величиной δ15N в листьях, отмеченная для некоторых болотных растений, интерпретировалась ранее как результат влияния доступности фосфора на фракционирование изотопов азота растением [21]. Однако наши данные свидетельствуют о том, что изменение δ15N может быть связано с изменениями в азотном питании растений. Это подтверждается трансформацией азотного состояния почвы при внесении фосфора ‒ уменьшение концентрации Nорг и обеднение азотом экстрагируемого органического вещества (увеличение соотношения Cорг/Nорг) хорошо объясняют изменение изотопного состава азота растений. Известно, что лабильный органический азот и его важный источник – азот микробной биомассы ‒ представляют собой наиболее “тяжелые” по изотопному составу пулы азота почвы [19, 22, 23]. Видимо, в условиях высокой доступности фосфора растения начинают в большей степени испытывать недостаток в азотном питании и утилизировать органические фракции. Однако маловероятно, что это могут быть продукты их минерализации, поскольку микроорганизмы в условиях высокой доступности фосфора также испытывают недостаток азота и преимущественно иммобилизуют его. Более вероятно, что повышение величины δ15N может быть связано с изменившейся ролью микоризы в азотном питании растений. При этом два противоположных объяснения соответствуют полученному результату.
С одной стороны, микориза может обеспечить поглощение “тяжелых” органических соединений азота в условиях повышения его дефицита. Хотя арбускулярная микориза (АРМ), характерная для большинства растений альпийской лишайниковой пустоши [24], традиционно рассматривается в связи с участием в фосфорном питании растений, появляется все больше данных о возможности ее участия в азотном питании. В том числе АРМ способна поглощать аминокислоты и аминосахара, особенно в условиях низкой доступности минеральных соединений азота [25, 26].
С другой стороны, в условиях высокой доступности фосфора участие АРМ в азотном питании растений может снизиться. Значительное уменьшение колонизации корней АРМ в результате 6‑летнего применения фосфорных удобрений показано на примере степных сообществ Внутренней Монголии [27]. Преимущественный транспорт 14N от АРМ к растениям-хозяевам и формирование легкого изотопного состава азота листьев, подобно тому, как это происходит у растений с эрикоидной микоризой и эктомикоризой [28, 29], подтверждаются обеднением листьев и обогащением корней растений с АРМ изотопом 15N [30, 31]. Если же участие АРМ в азотном питании растений снижается, то фракционирование изотопов и формирование легкого изотопного состава азота в листьях уменьшаются.
В связи с наличием такой неопределенности необходимы дополнительные исследования для установления причины формирования более тяжелого изотопного состава азота в растениях альпийской лишайниковой пустоши при повышении доступности фосфора.
Влияние азота
Как и следовало ожидать, наибольшие изменения в азотном состоянии растений произошли при внесении азота либо совместно азота и фосфора. Изменились концентрация элемента в листьях растений и его изотопный состав.
Концентрация азота увеличилась у всех изученных видов, кроме Oxitropis kubanensis, и ее рост был гораздо более выражен в варианте N в сравнении с NР. Это свидетельствует об активном потреблении внесенного азота растениями, а меньшие концентрации при совместном внесении азота и фосфора могут объясняться его разбавлением в большем приросте биомассы в варианте NР [3]. При этом реакция отдельных видов на обогащение почвы азотом отличается. Так, у Antennaria dioica меньше, чем у других видов, повышается концентрация и изменяется изотопный состав азота. Вероятно, это связано с меньшей конкурентной способностью этого вида разнотравья, который не изменял биомассу при повышении доступности азота [8]. Напротив, Carex umbrosa активно накапливает дополнительный азот, что хорошо соотносится с максимальным приростом биомассы этого вида [8].
Не обладающий симбиотической азотфиксацией Trifolium polyphyllum при обогащении почвы элементом проявляет реакцию, близкую к видам разнотравья: он эффективно поглощает вносимый азот, концентрация которого в вариантах N и NP возрастает почти в 1.5 раза. Концентрация же азота у Oxitropis kubanensis не изменилась. Это свидетельствует о том, что при повышении доступности азота в почве у O. kubanensis, вероятно, уменьшается вклад азотфиксации в азотный баланс.
У всех растений, кроме O. kubanensis, величина δ15N увеличилась, т.е. содержание тяжелого изотопа азота возросло. Однако из-за достаточно большого варьирования этого показателя статистически значимые различия с контролем отмечены не для всех видов. Такая направленность изменения изотопного состава азота вполне объяснима. Так, δ15N аммонийного азота, преобладающего в составе минеральных форм элемента в почве альпийской лишайниковой пустоши, составляет от ‒4 до ‒7‰ [18, 32] и, вероятно, являясь основным источником азота для растений, контролирует изотопный состав элемента у многих видов. У карбамида, который используется в эксперименте в качестве дополнительного источника азота, δ15N составляет ~0‰. При разложении карбамида на поверхности почвы и улетучивании изотопно-легкого азота с аммиаком поступающий в почву аммонийный азот должен быть еще более тяжелым. Вклад этого привнесенного тяжелого азота в питание растений и определяет увеличение δ15N растений. Нам не удалось зарегистрировать значимых различий в содержании 15N в листьях Trifolium polyphyllum, однако тренд к утяжелению в вариантах N и NP явно прослеживается, что также свидетельствует об интенсивном потреблении вносимого азота этим бобовым растением.
Теоретически утяжеление изотопного состава азота в листьях растений с ростом его доступности может быть связано и с изменением условий функционирования микоризы (снижение участия в питании растений), подобно тому, как это происходит при повышении доступности фосфора. Поскольку участие микоризы в транспорте азота растениям-хозяевам может снижаться в условиях высокой доступности элемента [25, 26, 31], то снижается и ее значение в формировании легкого изотопного состава в листьях. Например, обеднение изотопом 15N листьев ряда видов травяных растений с АРМ наблюдалось в условиях менее богатой почвы, тогда как при повышении доступности азота различия в изотопном составе между корнями и листьями отсутствовали [33]. Также и в эксперименте по колонизации корней Alnus incana АРМ грибом Rhizophagus irregularis обеднение листьев и обогащение корней изотопом 15N были характерны только для варианта с дефицитом азотного питания [31]. Хотя эксперимент с удобрениями во Внутренней Монголии не выявил существенного влияния внесения азота на колонизацию корней АРМ, но обнаружено сильное влияние на состав микоризного сообщества [27], что также может сказаться на участии микоризы в азотном питании растений. Однако на фоне предполагаемого существенного утяжеления изотопного состава привносимого азота роль микоризы в изменении величины δ15N в листьях растений в вариантах N и NP все же представляется вторичной.
У Oxitropis kubanensis величина δ15N не изменилась при внесении азота. Предположительно изотопный состав азота у этого вида, как и у других, должен был стать более тяжелым, так как вклад привнесенного тяжелого изотопа азота в питание должен возрасти. Однако стабильная концентрация азота в листьях Oxitropis kubanensis при повышении доступности элемента в почве может свидетельствовать об изменении баланса почвенного и атмосферного питания, что требует дополнительного исследования.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Повышение доступности азота и фосфора в горно-луговой почве альпийской лишайниковой пустоши приводит к изменению азотного питания растений не только вследствие прямого поглощения минеральных соединений, но, вероятно, и в результате изменения закономерностей функционирования микробного сообщества, микоризного симбиоза и симбиотической азотфиксации. В наибольшей степени такое косвенное влияние на азотное питание растений выражено при повышении доступности фосфора, которая способствует мобилизации азота органических соединений почвы микроорганизмами и, возможно, изменению роли микоризы в азотном питании растений. Влияние повышения доступности фосфора на симбиотическую азотфиксацию оказалось неожиданным – произошло снижение интенсивности азотфиксации у азотфиксирующего вида бобовых (Oxytropis kubanensis) и не выявлено признаков ее появления у Trifolium polyphyllum, не фиксирующего азот. Реакция отдельных видов растений на обогащение почвы азотом отличается и может быть связана с разной конкурентной способностью за ресурс, а также, возможно, с изменением роли микоризы в азотном питании растений.
Работа выполнена при поддержке РНФ (проект № 16-14-10208).
Список литературы
Billings W.D. Adaptations and origins of alpine plants // Arctic Alpine Research. 1974. V. 6. P. 129‒142.
Bowman W.D., Seastedt T.R. Structure and function of an alpine ecosystem: Niwot Ridge, Colorado. Oxford, New York: Oxford University Press, 2001. 337 p.
Эльканова М.Х., Ахметжанова А.А., Елумеева Т.Г., Онипченко В.Г. Изменение структуры надземной фитомассы альпийской пустоши Северо-Западного Кавказа при долговременном внесении элементов минерального питания // Бюл. МОИП. Отд. биол. 2016. Т. 121. №. 2. С. 47‒58.
Körner C. Alpine plant life: functional plant ecology of high mountain ecosystems. Berlin, Heidelberg: Springer-Verlag, 2003. 344 p.
Dawes M.A., Schleppi P., Hagedorn F. The fate of nitrogen inputs in a warmer alpine treeline ecosystem: a 15N labeling study // J. Ecology. 2017. V. 105. P. 1723‒1737.
Chapin F.S., Shaver G.R., Giblin A.E. et al. Responses of Arctic tundra to experimental and observed changes in climate // Ecology. 1995. V. 76. P. 694‒711.
Bai E., Li S., Xu W. et al. A meta-analysis of experimental warming effects on terrestrial nitrogen pools and dynamics // New Phytol. 2013. V. 199. P. 441‒451.
Onipchenko V.G., Makarov M.I., Akhmetzhanova A.A. et al. Alpine plant functional group responses to fertilizer addition depend on abiotic regime and community composition // Plant Soil. 2012. V. 357. P. 103‒115.
Макаров М.И., Леошкина Н.А., Ермак А.А., Малышева Т.И. Сезонная динамика минеральных форм азота в горно-луговых альпийских почвах // Почвоведение. 2010. № 8. С. 969‒978.
Лавренов Н.Г., Заузанова Л.Д., Онипченко В.Г. Параметры семенного размножения альпийских растений в зависимости от обогащения почвы // Экология. 2017. № 6. С. 454‒460.
Kandeler E. Ammonium // Methods in soil biology. Berlin, Heidelberg: Springer-Verlag, 1996. P. 406‒408.
Dorich R.A., Nelson D.W. Evaluation of manual cadmium reduction methods for determination of nitrate in potassium chloride extracts of soils // J. Soil Sci. Soc. Amer. 1984. V. 48. P. 72‒75.
Макаров В.И. Влияние доз карбамида и норм орошения на эмиссию аммиака из агродерново-подзолистой среднесуглинистой почвы // Вестник Алтайского гос. аграрного ун-та. 2017. № 6. С. 54‒60.
Макаров М.И., Малышева Т.И., Ермак А.А. и др. Симбиотическая азотфиксация в сообществе альпийской лишайниковой пустоши Северо-Западного Кавказа (Тебердинский заповедник) // Почвоведение. 2011. № 12. С. 1504‒1512.
Soudzilovskaia N.A., Aksenova A.A., Makarov M.I. et al. Legumes affect alpine tundra community composition via multiple biotic interactions // Ecosphere. 2012. V. 3. Article Number UNSP 33.
Miller A.E., Bowman W.D. Variation in nitrogen-15 natural abundance and nitrogen uptake traits among co-occurring alpine species: do species partition by nitrogen form? // Oecologia. 2002. V. 130. P. 609–616.
Макаров М.И. Изотопный состав азота в почвах и растениях: использование в экологических исследованиях (обзор) // Почвоведение. 2009. № 12. С. 1432‒1445.
Makarov M.I., Malysheva T.I., Cornelissen J.H.C. et al. Consistent patterns of 15N distribution through soil profiles in diverse alpine and tundra ecosystems // Soil Biol. Biochem. 2008. V. 40. P. 1082‒1089.
Craine J.M., Brookshire E.N.J., Cramer M.D. et al. Ecological interpretations of nitrogen isotope ratios of terrestrial plants and soils // Plant Soil. 2015. V. 396. P. 1‒26.
Sulieman S., Tran L.S.P. (eds.). Legume nitrogen fixation in soils with low phosphorus availability: Adaptation and regulatory implication. Springer, 2017. 287 p.
Clarkson B.V., Schipper L.A., Moyersoen B., Silvester W.B. Foliar 15N natural abundance indicates phosphorus limitation of bog species // Oecologia. 2005. V. 144. P. 550‒557.
Dijkstra P., Ishizu A., Doucett R. et al. 13C and 15N natural abundance of the soil microbial biomass // Soil Biol. Biochem. 2006. V. 38. P. 3257‒3266.
Portl K., Zechmeister-Boltenstern S., Wanek W. et al. Natural 15N abundance of soil N pools and N2O reflect the nitrogen dynamics of forest soils // Plant Soil. 2007. V. 295. P. 79‒94.
Onipchenko V.G., Zobel M. Mycorrhiza, vegetative mobility and responses to disturbance of alpine plants in the Northwestern Caucasus // Folia Geobotanica. 2000. V. 35. P. 1‒11.
Veresoglou S.D., Chen B., Rillig M.C. Arbuscular mycorrhiza and soil nitrogen cycling // Soil Biol. Biochem. 2012. V. 46. P. 53‒62.
Hodge A., Storer K. Arbuscular mycorrhiza and nitrogen: implications for individual plants through to ecosystems // Plant Soil. 2015. V. 386. P. 1‒19.
Chen Y.-L., Zhang X., Ye J.-S. et al. Six-year fertilization modifies the biodiversity of arbuscular mycorrhizal fungi in a temperate steppe in Inner Mongolia // Soil Biol. Biochem. 2014. V. 69. P. 371‒381.
Hobbie E.A., Högberg P. Nitrogen isotopes link mycorrhizal fungi and plants to nitrogen dynamics // New Phytol. 2012. V. 196. P. 367‒382.
Makarov M.I., Onipchenko V.G., Malysheva T.I. et al. Determinants of 15N natural abundance in leaves of co-occurring plant species and types within an alpine lichen heath in the Northern Caucasus // Arctic, Antarctic Alpine Research. 2014. V. 46. P. 581‒590.
Макаров М.И. Роль микоризы в трансформации соединений азота в почве и в азотном питании растений (обзор) // Почвоведение. 2019. № 2. С. 220‒233.
Schweiger P.F. Nitrogen isotope fractionation during N uptake via arbuscular mucorrhizal and ectomycorrhizal fungi into grey alder // J. Plant Physiol. 2016. V. 205. P. 84‒92.
Макаров М.И., Малышева Т.И., Меняйло О.В. Изотопный состав азота и трансформация азотсодержащих соединений в горно-луговых альпийских почвах // Почвоведение. 2019. № 9. С. 1039‒1048.
Dijkstra P., Williamson C., Menyailo O. et al. Nitrogen stable isotope composition of leaves and roots of plants growing in a forest and a meadow // Isotopes Environ. Health Studies. 2003. V. 39. P. 29‒39.
Дополнительные материалы отсутствуют.