Известия РАН. Серия биологическая, 2019, № 3, стр. 294-301

Оценка методом ЭПР-спектрометрии распределения в организме мышей внутривенно введенных наноалмазов

Е. В. Инжеваткин 1*, А. В. Барон 23, Н. Г. Максимов 4, М. Б. Волкова 13, А. П. Пузырь 2, В. С. Бондарь 2

1 Международный научный центр исследований экстремальных состояний организма Федерального исследовательского центра “Красноярский научный центр СО РАН”
660036 Красноярск, Академгородок, 50, Россия

2 Институт биофизики СО РАН Федерального исследовательского центра “Красноярский научный центр СО РАН”
660036 Красноярск, Академгородок, 50, стр. 50, Россия

3 Сибирский федеральный университет
660041 Красноярск, просп. Свободный, 79, Россия

4 Институт химии и химической технологии СО РАН Федерального исследовательского центра “Красноярский научный центр СО РАН”
660036 Красноярск, Академгородок, 50, стр. 24, Россия

* E-mail: inscience@mail.ru

Поступила в редакцию 12.09.2017
После доработки 27.03.2018
Принята к публикации 16.04.2018

Полный текст (PDF)

Аннотация

С использованием электронного парамагнитного резонанса (ЭПР-спектрометрии) исследовано распределение в организме мышей внутривенно введенных модифицированных наноалмазов (МНА) взрывного синтеза. Показано, что через 2.5 ч после инъекции МНА в хвостовую вену мышам наночастицы аккумулируются преимущественно в легких и печени животных, в почках и сердце обнаруживается на порядок меньшее количество наночастиц. Наличия МНА в образцах крови, селезенки, головного мозга и мышц бедра мышей в пределах чувствительности использованного метода не выявлено.

Развитие нанотехнологии открывает новые возможности решения множества биомедицинских задач (Vo-Dinh, 2006; Surendiran et al., 2009; Thanh, Green, 2010; Zamborini et al., 2012). Прогнозируется, что применение наноматериалов разной физико-химической природы, например, в биологии, медицине, фармакологии, экологии, токсикологии позволит повысить эффективность используемых методов. Разрабатываются подходы к использованию наноматериалов в технологиях эффективного разделения и выделения биомолекул (Bondar et al., 2004; Lynch, Dawson, 2008), создании средств индикации и диагностики (Artiles et al., 2011; Fisher, Fadley, 2012; Lad, Agrawal, 2012; Kaur, Badea, 2013), препаратов для нейтрализации токсикантов (Puzyr et al., 2007a), самостоятельных терапевтических агентов (Gutwein, Webster, 2002; Tran et al., 2009; Ishchenko et al., 2010; Xiao et al., 2013; Wang et al., 2013; Zhou, 2013; Ding et al., 2016), управляемых или целевых носителей лекарств (Jin-Wook et al., 2011; Plank et al., 2011; Morachis et al., 2012; Zhu et al., 2012; Zhang et al., 2013).

Исследователи, работающие в данной области, проявляют большой интерес к биомедицинскому применению разных форм наноуглерода (фуллерены, нанотрубки, графен) (Lamanna et al., 2012; Mendes et al., 2013; Monaco, Giugliano, 2014; Kumar, 2015; Zhang, Naik, 2015; Kozak et al., 2016; Maas, 2016). Один из перспективных материалов этой группы – наноалмазы, получаемые методом детонационного синтеза, который был впервые разработан российскими учеными (Danilenko, 2004).

Совокупность физико-химических свойств наноалмазов (прежде всего, химически активная полиморфная поверхность и возможности ее химической модификации, малая токсичность и высокая биосовместимость) открывает возможности и перспективы использования данных наночастиц в разнообразных биотехнологических и биомедицинских приложениях (Krueger, 2008; Schrand et al., 2009; Kharisov et al., 2010; Sung, Lin, 2010; Mochalin et al., 2011; Say et al., 2011; Shugalei et al., 2013; Slegerova et al., 2014), в частности в конструировании систем адресной доставки биологически активных субстанций и лекарственных препаратов, создании лечебных средств пролонгированного и комбинированного действия (Mochalin et al., 2011; Zhu et al., 2012; Kaur, Badea, 2013; Shugalei et al., 2013; Xiao et al., 2013; Wang et al., 2013; Zhang et al., 2013; Slegerova et al., 2014).

Важно подчеркнуть, что использование наноматериалов в медицине (средства адресной доставки лекарств, терапевтические и диагностические агенты) предполагает возможность введения нанообъектов в организм пациента. При этом ключевой аспект – четкое представление о характере распределения в организме введенных наночастиц, а также гарантия их биодеградации или элиминации после выполнения терапевтической (диагностической) функции. Это особенно важно при использовании нанообъектов, которые не подвергаются биодеструкции. Поскольку наноалмазы взрывного синтеза относятся именно к таким нанообъектам, возникает необходимость в изучении их межорганного распределения, накопления и путей элиминации после введения в организм. Важность таких исследований определяется возможностью возникновения нежелательных последствий при накоплении наночастиц в организме.

В Институте биофизики СО РАН (Красноярск) разработаны способы получения из наноалмазов детонационного синтеза модифицированных наноалмазов (МНА), обеспечивающие высокую коллоидную устойчивость наночастиц в водных суспензиях (включая стерилизацию) (Bondar, Puzyr, 2004; Puzyr, Bondar, 2005). Это позволило определить перспективы их использования в биомедицинских исследованиях и изучить применимость МНА в разработке технологий разделения и очистки биомолекул (Bondar et al., 2004; Puzyr et al., 2007b; Purtov et al., 2008; Baron et al., 2014; Purtov et al., 2015), конструировании индикаторных и диагностических тест-систем, включая системы многоразового действия (Ronzhin et al., 2013, 2017), для связывания и нейтрализации токсикантов (Puzyr et al., 2007a; Prokhorenkov et al., 2014; Vasilyeva et al., 2016), в создании новых лечебных средств пролонгированного и комбинированного действия (Mogilnaya, Bondar, 2012; Baron et al., 2016; Medvedeva et al., 2016).

Одно из перспективных биомедицинских приложений МНА связано с возможностью конструирования на их основе систем адресной доставки биологически активных веществ (Purtov et al., 2010). При этом следует отметить, что оценка распределения МНА в организме, например, после их внутривенного введения животным сопряжена с определенными методическими трудностями. Существует возможность маркировки наночастиц флуоресцентными или радиоактивными метками за счет их ковалентной пришивки на МНА (Purtov et al., 2015). Однако прямая детекция МНА представляется наиболее корректной, поскольку дает возможность получить объективную информацию при изучении их межорганного распределения. Она позволяет избежать ошибок в трактовке результатов, связанных с возможной десорбцией иммобилизованной метки с поверхности наночастиц в условиях биологической среды организма. Для прямой детекции МНА может быть использован метод электронного парамагнитного резонанса (ЭПР), который позволяет выявлять наночастицы с парамагнитными центрами. Известно, что у наноалмазов взрывного синтеза, в том числе МНА, есть парамагнитные центры (Puzyr et al., 2005; Солтамова и др., 2010).

Цель работы – оценить применимость метода ЭПР-спектрометрии для анализа распределения МНА в организме мышей после внутривенного введения.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Были использованы МНА со средним размером кластеров в гидрозолях d50 = 70.6 нм (Zetasizer Nano ZS, Malvern Instruments Ltd, Англия), полученные из взрывных наноалмазов российского производства (ООО “Реал-Дзержинск”) разработанным ранее способом (Bondar, Puzyr, 2004; Puzyr, Bondar, 2005). Исходный гидрозоль с концентрацией наночастиц 1 мг/мл готовили добавлением деионизованной воды (Milli-Q-system, Millipore, США) к навеске порошка МНА. Для модельных экспериментов in vitro из исходного гидрозоля МНА последовательными разведениями деионизованной водой готовили также ряд суспензий с уменьшающейся концентрацией наночастиц. В исследованиях in vitro и in vivo использовали мышей ICR (самцов массой 26–28 г), при работе с животными соблюдали принципы эвтаназии.

Модельные эксперименты in vitro проводили следующим образом: мышей усыпляли эфирным наркозом, и брали кровь из подключичной артерии. Затем животных умерщвляли цервикальной дислокацией и извлекали органы с помощью пластиковых и керамических инструментов для исключения контаминации биоматериалов частицами металла. Для исследований брали печень, селезенку, почки, сердце, головной мозг, мышцы бедра и легкие. Извлеченные органы помещали на лед и после удаления примесей соединительной и жировой тканей разрушали в дистиллированной воде с помощью ручного гомогенизатора (система стекло–стекло). При гомогенизации использовали следующие соотношения масса органа–объем воды: печень 1 : 1, селезенка 1 : 10, почки 1 : 4, сердце 1 : 10, головной мозг 1 : 3, мышцы бедра 1 : 3, легкие 1 : 6. К полученным гомогенатам и образцам крови добавляли приготовленные гидрозоли МНА с разной концентрацией наночастиц в соотношении 1 : 4 – 200 мкл гидрозоля к 800 мкл образца биоматериала. При этом финальная концентрация МНА в образцах составляла 200, 40, 8 и 1.6 мкг/мл. В контрольные образцы биоматериалов (гомогенаты и кровь) вместо суспензии МНА добавляли дистиллированную воду в указанном выше соотношении. Все образцы перемешивали, помещали в пластиковые контейнеры и замораживали в жидком азоте. После этого замороженные образцы извлекали из контейнеров и помещали при температуре жидкого азота в специальный держатель, который переносили в резонатор ЭПР-спектрометра Elexsys E580 (Bruker, Германия), и регистрировали ЭПР-спектры при температуре 85–90 К. ЭПР-исследования были выполнены в ЦКП ФИЦ КНЦ СО РАН.

В экспериментах in vivo водную суспензию МНА вводили мышам в хвостовую вену в дозе 40 мг наночастиц на 1 кг массы животного. Оценку распределения МНА в организме животных проводили через 2.5 ч после инъекции наночастиц. Получение образцов биоматериалов (кровь и гомогенаты органов) и регистрацию ЭПР-спектров осуществляли так, как отмечено выше.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

В предварительных экспериментах in vitro мы установили, что для выявления МНА в биоматериалах методом ЭПР-спектрометрии важное условие – глубокое замораживание исследуемого образца при низких температурах и увеличение его объема. В связи с этим были разработаны оригинальные пластиковые контейнеры, которые позволяют замораживать образцы в жидком азоте, и специальный держатель, позволяющий осуществлять перенос замороженных образцов из контейнеров при температуре жидкого азота. Применение держателя дало возможность использовать безампульный способ фиксации образца в резонаторе ЭПР-спектрометра и увеличить объем проб биоматериалов.

На начальном этапе исследований было показано (рис. 1а), что в ЭПР-спектрах гидрозолей МНА наблюдается характерный сигнал (g = 2.003, ΔH ≈ 10 Гс). Ранее мы отмечали (Puzyr et al., 2005), что в образцах МНА с разными размерами кластеров регистрируется симметричный ЭПР-сигнал при g = 2.003, который связан с наличием парамагнитных центров в данных наночастицах. Как следует из модельных экспериментов in vitro (рис. 1б), при добавлении суспензии МНА в образцы крови и гомогенатов органов мышей ЭПР-сигнал сохраняет свои основные характеристики. Это свидетельствует о том, что метод ЭПР-спектрометрии позволяет обнаруживать МНА в биологических материалах.

Рис. 1.

ЭПР-спектры водного золя модифицированных наноалмазов (МНА) (а) и гомогенатов селезенки (б) с добавлением МНА (концентрация наночастиц 0.04 мг/мл).

При ЭПР-исследованиях контрольных (не содержащих МНА) образцов всех биоматериалов в них было выявлено наличие собственных парамагнитных центров (радикалы, гемсодержащие белки и др.), сигналы которых накладываются на сигнал МНА. В то же время было установлено, что при тех объемах биообразцов, которые были использованы в экспериментах, значения их собственных ЭПР-сигналов, как правило, невелики и не оказывают влияния на точность детекции наночастиц. Тем не менее для большей корректности определения МНА в биоматериалах мы вычитали из значения ЭПР-сигнала опытного образца (с добавлением МНА) значение ЭПР-сигнала контрольного образца (без МНА).

В модельных экспериментах in vitro было установлено также, что интенсивность регистрируемого ЭПР-сигнала пропорциональна концентрации МНА как в гидрозолях, так и в образцах изучаемых биоматериалов (рис. 2). Как следует из представленных данных, линейность сигнала сохраняется в широком диапазоне концентраций МНА в биологических образцах – от 1.6 до 200 мкг наночастиц на 1 мл образца. Это дает возможность проводить количественную оценку содержания МНА в биоматериалах.

Рис. 2.

Интенсивность ЭПР-сигнала в зависимости от концентрации модифицированных наноалмазов (МНА) в гидрозолях, крови и гомогенатах тканей животных. 1 – головной мозг, 2 – селезенка, 3 – легкие, 4 – почки, 5 – печень, 6 – мышцы, 7 – сердце, 8 – вода, 9 – кровь.

Из представленных на рис. 2 данных видно, что при одинаковых концентрациях МНА в опытных образцах крови и гомогенатов печени регистрируются более высокие значения сигналов ЭПР по сравнению с другими исследованными образцами. При этом в большей степени такие различия проявляются при высокой (200 мкг/мл) концентрации наночастиц в образце биоматериала. Причины наблюдаемых различий пока неясны. Вероятно, они могут быть связаны с дополнительным образованием в образцах крови и гомогенатов печени собственных парамагнитных центров под действием МНА. Например, это может происходить при деструкции белых и красных клеток крови. В экспериментах in vitro ранее мы показали, что воздействие наноалмазов на красные и белые клетки крови вызывает их деструкцию и активацию образования активных радикалов кислорода клетками белого ряда (Puzyr et al., 2004). При этом было установлено, что эффект стимуляции образования радикалов кислорода дозозависим. Отмеченные факты позволяют предположить, что образование дополнительных парамагнитных центров в образцах крови и гомогенатах печени может происходить за счет увеличения пула свободного гемоглобина при деструкции эритроцитов и возрастания пула радикалов кислорода при деструкции клеток белого ряда.

Мы полагаем, что эта версия правомочна в обоих рассматриваемых случаях. Общеизвестно, что печень хорошо снабжается кровью, и гомогенаты этого органа могут содержать большое количество ее форменных элементов, а также, что в гепатоцитах содержится большое количество цитохромов, способных продуцировать кислородные радикалы. Тем не менее упомянутые выше предположения требуют отдельного анализа.

В наших исследованиях in vivo было показано (рис. 3а), что через 2.5 ч после внутривенной инъекции МНА мышам наибольшее их количество регистрируется методом ЭПР-спектрометрии в легких и печени животных. Расчеты, проведенные с учетом зависимостей ЭПР-сигналов от концентрации МНА в биообразцах (рис. 2), свидетельствуют о том, что от суммарной дозы введенных наночастиц через указанное время в легких и печени мышей их аккумулируется до 24 и 18% соответственно. Согласно полученным данным в сердце и почках животных выявляется значительно меньшее (на 1–1.5 порядка) количество наночастиц (рис. 3а). МНА в образцах крови, селезенки, головного мозга и мышц бедра в пределах чувствительности использованного ЭПР-метода не выявлены.

Рис. 3.

Суммарное (а) и расчетное (б) содержание модифицированных наноалмазов (МНА) в органах и в 1 г ткани органов животных соответственно через 2.5 ч после внутривенного ведения.

В пользу значительно большей эффективности накопления МНА в легочной ткани животных по сравнению с тканями других изучаемых органов свидетельствуют и расчеты содержания наночастиц на единицу массы органа (рис. 3б). Из них следует, что в ткани легкого МНА аккумулируются практически на порядок эффективнее, чем в ткани печени. Кроме того, наименьшая эффективность накопления МНА наблюдается в тканях почек и сердца.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, в модельных экспериментах in vitro установлена применимость метода ЭПР-спектрометрии для детекции и количественной оценки МНА в биологических материалах. Показано, что в содержащих МНА образцах крови и гомогенатах органов мышей наблюдается характерный ЭПР-сигнал (g = 2.003, ΔH ≈ 10 Гс), амплитуда которого линейно зависит от концентрации наночастиц (1.6–200 мкг на 1 мл биообразца). Методом ЭПР в биоматериалах выявлено наличие собственных парамагнитных центров, сигналы которых накладываются на сигнал МНА. Однако показано, что интенсивность данных сигналов мала, и это позволяет регистрировать МНА в биоматериалах методом ЭПР-спектрометрии с необходимой точностью. В исследованиях in vivo продемонстрирована возможность регистрации методом ЭПР-спектрометрии распределения МНА в организме животных после внутривенного введения наночастиц. Показано, что через 2.5 ч после инъекции МНА в хвостовую вену мышам наночастицы аккумулируются преимущественно в легких и печени животных. В почках и сердце обнаруживается значительно меньшее (на порядок) количество наночастиц. МНА в образцах крови, селезенки, головного мозга и мышц бедра мышей методом ЭПР-спектрометрии не выявлены. Полученные данные открывают перспективы использования метода ЭПР для изучения динамики межорганного распределения, накопления и элиминации наноалмазов взрывного синтеза после их внутривенного введения в организм экспериментальных животных.

Исследования выполнены при финансовой поддержке РФФИ (грант 16-04-00999).

Список литературы

  1. Солтамова А.А., Ильин И.В., Шахов Ф.М., Кидалов С.В., Вуль А.Я., Явкин Б.В., Мамин Г.В., Орлинский С.Б., Баранов П.Г. Обнаружение методом электронного парамагнитного резонанса гигантской концентрации азотно-вакантных дефектов в детонационных наноалмазах, подвергнутых спеканию // Письма в ЖЭТФ. 2010. Т. 92. Вып. 2. С. 106–110.

  2. Artiles M., Rout C.S., Fisher T.S. Graphene-based hybrid materials and devices for biosensing // Adv. Drug Deliv. Rev. 2011. V. 63. P. 1352–1360.

  3. Baron A.V., Osipov N.V., Olkhovskiy I.A., Puzyr A.P., Bondar V.S. Binding the immunoglobulins of human serum by nanodiamonds // Dokl. Biochem. Biophys. 2014. V. 457. P. 158–159.

  4. Baron A.V., Osipov N.V., Yashchenko S.V., Kokotukha Yu.A., Baron I.I., Puzyr A.P., Olkhovskiy I.A., Bondar V.S. Adsorption of viral particles from the blood plasma of patients with viral hepatitis on nanodiamonds // Dokl. Biochem. Biophys. 2016. V. 469. P. 244–246.

  5. Bondar V.S., Puzyr A.P. Nanodiamonds for biological investigations // Phys. Solid State. 2004. V. 46. P. 716–719.

  6. Bondar V.S., Pozdnyakova I.O., Puzyr A.P. Applications of nanodiamonds for separation and purification of proteins // Phys. Solid State. 2004. V. 46. P. 758–760.

  7. Carbon Nanomaterials for Biomedical Applications / Eds Zhang M., Naik R.R., Dai L. N.Y.: Springer, 2016. 576 p.

  8. Danilenko V.V. On the history of the discovery of nanodiamond synthesis // Phys. Solid State. 2004. V. 46. P. 595–599.

  9. Ding X., Liu J., Li J., Wang F., Wang Y., Song S., Zhang H. Polydopamine coated manganese oxide nanoparticles with ultrahigh relaxivity as nanotheranostic agents for magnetic resonance imaging guided synergetic chemo-/photothermal therapy // Chem. Sci. 2016. V. 7. P. 6695–6700.

  10. Fisher P., Fadley C.S. Probing nanoscale behavior of magnetic materials with soft X-ray spectroscopy // Nanotech. Rev. 2012. V. 1. P. 5–15.

  11. Gutwein L.G., Webster T.J. Osteoblast and chondrocyte proliferation in the presence of aluminia and titania nanoparticles // J. Nanopart. Res. 2002. V. 4. P. 231–238.

  12. Ishchenko L.A., Stolyar S.V., Ladygina V.P., Raikher Yu.L., Balasoiu M., Bayokov O.A., Iskhakov R.S., Inzhevatkin E.V. Magnetic properties and application of biomineral particles produced by bacterial culture // Phys. Procedia. 2010. V. 9. P. 279–282.

  13. Jin-Wook Y., Nishit D., Samir M. Adaptive micro and nanoparticles: temporal control over carrier properties of faciliate drug delivery // Adv. Drug Deliv. Rev. 2011. V. 63. P. 1247–1256.

  14. Kaur P., Badea I. Nanodiamonds as novel nanomaterials for biomedical applications: drug delivery and imaging // Int. J. Nanomed. 2013. V. 8. P. 203–220.

  15. Kharisov B.I., Kharissova O.V., Chavez-Guerrero L. Synthesis techniques, properties, and applications of nanodiamonds // Synth. React. Inorg., Metal-Org., Nano-Metal Chem. 2010. V. 40. P. 84–101.

  16. Kozak O., Sudolska M., Pramanik G. Cígler P., Otyepka M., Zbořil R. Photoluminescent carbon nanostructures // Chem. Mater. 2016. V. 28. P. 4085–4128.

  17. Krueger A. New carbon materials: biological applications of functionalized nanodiamond materials // Chem. Eur. J. 2008. V. 14. P. 1382–1390.

  18. Kumar A. Fullerenes for biomedical applications // J. Environ. Appl. Biores. 2015. V. 3. P. 175–191.

  19. Lad A., Agrawal Y.K. Nanodevices for monitoring toxicological behavior of therapeutic agent // Rev. Nanosci. Nanotech. 2012. V. 1. P. 217–227.

  20. Lamanna G., Battigelli A., Menard-Moyon C., Bianco A. Multifunctionalized carbon nanotubes as advanced multimodal nanomaterials for biomedical applications // Nanotech. Rev. 2012. V. 1. P. 17–29.

  21. Lynch I., Dawson K.A. Protein-nanoparticle interactions // Nano Today. 2008. V. 3. P. 40–47.

  22. Maas M. Carbon nanomaterials as antibacterial colloids // Materials. 2016. V. 9. P. 617–636.

  23. Medvedeva N.N., Zhukov E.L., Inzhevatkin E.V., Bezzabotnov V.E. Antitumor properties of modified detonation nanodiamonds and sorbed doxorubicin on the model of Ehrlich Ascites Carcinoma // Bull. Exp. Biol. Med. 2016. V. 160. P. 372–375.

  24. Mendes R.G., Bachmatiuk A., Buchner B. Carbon nanostructures as multi-functional drug delivery platforms // J. Mater. Chem. B. 2013. V. 1. P. 401–428.

  25. Mochalin V.N., Shenderova O., Ho D., Gogotsi Y. The properties and applications of nanodiamonds // Nat. Nanotechnol. 2011. V. 7. P. 11–23.

  26. Mogilnaya O.A., Bondar V.S. Antibacterial properties of lysozyme immobilized on nanodiamonds // Micro Nanosyst. 2012. V. 4. P. 41–47.

  27. Monaco A.M., Giugliano M. Carbon-based smart nanomaterials in biomedicine and neuroengineering // Beilstein J. Nanotechnol. 2014. V. 5. P. 1849–1863.

  28. Morachis J.M., Mahmoud E.A., Almutairi A. Physical and chemical strategies for therapeutic delivery by using polymeric nanoparticles // Pharmacol. Rev. 2012. V. 64. P. 505–519.

  29. Nanotechnology in biology and medicine: methods, devices, and applications / Ed. Vo-Dinh T. N.Y.: CRC Press., 2006. 792 p.

  30. Plank C., Zelphati O., Mykhalik O. Magnetically enhanced nucleic acid delivery // Adv. Drug Deliv. Rev. 2011. V. 63. P. 1300–1331.

  31. Prokhorenkov V.I., Vasil’eva E.Yu., Puzyr A.P., Bondar V.S. Effects of nanodiamonds of explosive synthesis on the skin of experimental animals locally exposed to cobalt and chrome ions // Bull. Exp. Biol. Med. 2014. V. 158. P. 264–267.

  32. Purtov K., Petunin A., Inzhevatkin E., Burov A., Ronzhin N., Puzyr A., Bondar V. Biodistribution of different sized nanodiamonds in mice // J. Nanosci. Nanotech. 2015. V. 15. P. 1070–1075.

  33. Purtov K.V., Burakova L.P., Puzyr A.P., Bondar V.S. Interaction of linear and ring forms of DNA molecules with nanodiamonds synthesized by detonation // Nanotechnology. 2008. V. 19. P. 1–3.

  34. Purtov K.V., Petunin A.I., Burov A.E., Puzyr A.P., Bondar V.S. Nanodiamonds as a carriers for address delivery of biologically active substances // Nanoscale Res. Lett. 2010. V. 5. P. 631–636.

  35. Puzyr A.P., Bondar V.S. Method of production of nanodiamonds of explosive synthesis with an increased colloidal stability // RU Patent № 2252192. 2005. Bull. № 14.

  36. Puzyr A.P., Bondar V.S., Bukayemsky A.A., Selyutin G.E., Kargin V.F. Physical and chemical properties of modified nanodiamonds // NATO Sci. Ser. II. Math. Phys. Chem. 2005. V. 192. P. 261–270.

  37. Puzyr A.P., Neshumayev D.A., Tarskikh S.V., Makarskaya G.V., Dolmatov V.Yu., Bondar V.S. Destruction of human blood cells in interaction with detonation nanodiamonds in experiments in vitro // Diam. Relat. Mater. 2004. V. 13. P. 2020–2023.

  38. Puzyr A.P., Purtov K.V., Shenderova O.A., Luo M., Brenner D.W., Bondar V.S. The adsorption of aflatoxin B1 by detonation-synthesis nanodiamonds // Dokl. Biochem. Biophys. 2007a. V. 417. P. 299–301.

  39. Puzyr A.P., Baron A.V., Purtov K.V., Bortnikov E.V., Skobelev N.N., Mogilnaya O.A., Bondar V.S. Nanodiamonds with novel properties: a biological study // Diam. Relat. Mater. 2007b. V. 16. P. 2124–2128.

  40. Ronzhin N.O., Puzyr A.P., Bondar V.S. On the applicability of nanodiamonds produced by detonation synthesis for phenol testing in aqueous media // Dokl. Chem. 2017. V. 475(1). P. 155–158.

  41. Ronzhin N.O., Baron A.V., Mamaeva E.S., Puzyr A.P., Bondar V.S. Nanodiamond-based tests systems for biochemical determination of glucose and cholesterol // J. Biomater. Nanobiotech. 2013. V. 4. P. 242–246.

  42. Say J.M., van Vreden C., Reilly D.J., Brown L.J., Rabeau J.R., King N.J.C. Luminescent nanodiamonds for biomedical applications // Biophys. Rev. 2011. V. 3. P. 171–184.

  43. Schrand A.M., Hens S.A.C., Shenderova O.A. Nanodiamond particles: properties and perspectives for bioapplications // Crit. Rev. Solid State Mater. Sci. 2009. V. 34. P. 18–74.

  44. Shugalei I.V., Voznyakovskii A.P., Garabadzhiu A.V., Tselinskii I.V., Sudarikov A.M., Ilyushin M.A. Biological activity of detonation nanodiamond and prospects in its medical and biological applications // Rus. J. Gen. Chem. 2013. V. 83. P. 851–883.

  45. Slegerova J., Rehor I., Havlik J. Raabova H., Muchova E., Cigler P. Nanodiamonds as intracellular probes for imaging in biology and medicine // Fundamental Biomedical Technologies 7, Intracellular Delivery II / Eds Prokop A., Iwasaki Y., Harada A. Dordrecht: Springer Science+Business Media, 2014. P. 363–401.

  46. Sung J.C., Lin J. Diamond nanotechnology: syntheses and applications. Singapore: Pan Stanford Publ. Pte. Ltd, 2010. 258 p.

  47. Surendiran A., Sandhiya S., Pradhan S.C., Adithan C. Novel applications of nanotechnology in medicine // Indian J. Med. Res. 2009. V. 130. P. 689–701.

  48. Thanh N.T.K., Green L.A.W. Functionalisation of nanoparticles for biomedical applications // Nano Today. 2010. V. 5. P. 213–230.

  49. Tran P.A., Zhang L., Webster T.J. Carbon nanofibers and carbon nanotubes in regenerative medicine // Adv. Drug Deliv. Rev. 2009. V. 61. P. 1097–1114.

  50. Vasilyeva E.Yu., Prokhorenkov V.I., Puzyr A.P., Bondar V.S. The effects of nanodiamonds at the action of colored metal ions on the skin of Guinea pigs // J. Biomater. Nanobiotech. 2016. V. 7. P. 214–224.

  51. Wang D.X., Tong Y.L., Li Y.Q., Tian Z.M., Cao R.X., Yang B.S. PEGylated nanodiamond for chemotherapeutic drug delivery // Diam. Relat. Mater. 2013. V. 36. P. 26–34.

  52. Xiao J., Duan X., Yin Q., Zhang Z., Yu H., Li Y. Nanodiamonds-mediated doxorubicin nuclear delivery to inhibit lung metastasis of breast cancer // Biomater. 2013. V. 34. P. 9648–9656.

  53. Zamborini F.P., Bao L., Dasari R. Nanoparticles in measurement science // Anal. Chem. 2012. V. 84. P. 541–576.

  54. Zhang X., Wang A.Q., Liu M., Hui J., Yang B., Tao L., Wei Y. Surfactant-dispersed nanodiamond: biocompatibility evaluation and drug delivery applications // Toxicol. Res. 2013. V. 2. P. 335–342.

  55. Zhou Z. Liposome formulation of fullerene-based molecular diagnostic and therapeutic agents // Pharmaceutics. 2013. V. 5. P. 525–541.

  56. Zhu Y., Li J., Zhang Y., Yang X., Chen N., Sun Y., Zhao Y., Fan C., Huang Q. The biocompatibility of nanodiamonds and their application in drug delivery systems // Teranostics. 2012. V. 2. P. 302–312.

Дополнительные материалы отсутствуют.