Микробиология, 2023, T. 92, № 5, стр. 441-452

Ancylobacter crimeensis sp. nov. – новый вид аэробных метилотрофных бактерий, выделенных из филлосферы дуба

А. А. Белова a*, Е. Н. Капаруллина a, Н. В. Агафонова a, Д. С. Груздев b, Д. С. Копицын c, А. В. Мачулин a, Н. В. Доронина a

a ФИЦ ПНЦБИ РАН Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина Российской академии наук
142290 Пущино, Россия

b SciBear OU
10115 Таллинн, Эстония

c ФГАОУ ВО РГУ нефти и газа (НИУ) им. И.М. Губкина
119991 Москва, Россия

* E-mail: alina.belova2023@gmail.com

Поступила в редакцию 29.03.2023
После доработки 20.04.2023
Принята к публикации 22.04.2023

Аннотация

Из филлосферы дуба пушистого (Quercus pubescens Willd.) на среде с метанолом выделен новый факультативный метилотроф – штамм 6x-1Т. Изолят представлен аэробными грамотрицательными неспорообразующими неподвижными короткими овоидными палочками, размножается бинарным делением. Оптимально растет при 25‒29°С и pH 7.0‒7.5, рост ингибируется при 1.5% NaCl. В жирнокислотном составе клеток преобладают C18:1ω7c и C19:0cyclo кислоты. Доминирующими фос-фолипидами являются фосфатидилэтаноламин, фосфатидилмонометилэтаноламин и дифосфатидилглицерин. Основной убихинон – Q10. Нуклеотидная последовательность гена 16S рРНК штамма 6x-1T имеет наибольший уровень сходства с таковыми у представителей рода Ancylobacter (97.0‒97.4%). Анализ геномов штамма 6x-1T и ближайших представителей рода Ancylobacter показал, что уровни ANI (80.7‒83.5%), dDDH (22.4‒23.3%), AAI (72.0‒78.0%) и POCP (62.0‒69.0%) ниже рекомендованных пороговых значений для разделения видов прокариот. Размер генома штамма 6x-1T составляет 4.29 млн п.о., содержание (Г + Ц) в ДНК ‒ 67.3%. На основании результатов филогенетического, филогеномного, фенотипического и хемотаксономического анализов штамм 6x-1T (=ВКМ В-3256T=ССUG 72401T=КСТС 92567T) представляет новый вид рода Ancylobacter, для которого предложено название Ancylobacter crimeensis sp. nov.

Ключевые слова: Ancylobacter crimeensis sp. nov., факультативный метилотроф, новый вид, метанол

Список литературы

  1. Агафонова Н.В., Капаруллина Е.Н., Доронина Н.В., Троценко Ю.А. Фосфатсолюбилизирующая активность аэробных метилобактерий // Микробиология. 2014. Т. 83. С. 28‒32.

  2. Agafonova N.V., Kaparullina E.N., Doronina N.V., Trotsenko Y.A. Phosphatesolubilizing activity of aerobic methylobacteria // Microbiology (Moscow). 2013. V. 82. P. 864–867.

  3. Порошина М.Н., Доронина Н.В., Капаруллина Е.Н., Ковалевская Н.П., Троценко Ю.А. Галофильные и галотолерантные аэробные метилобактерии из техногенных биотопов // Микробиология. 2013. Т. 84. С. 473‒482.

  4. Poroshina M.N., Doronina N.V., Kaparullina E.N., Kovalevskaya N.P., Trotsenko Y.A. Halophilic and halotolerant aerobic methylobacteria from the technogenic Solikamsk biotopes // Microbiology (Moscow). 2013. V. 82. P. 490‒498.

  5. Чемодурова А.А., Капаруллина Е.Н., Мачулин А.В., Spröer C., Lang E., Доронина Н.В. Ancylobacter lacus sp. nov. и Ancylobacter plantiphilus sp. nov. ‒ новые аэробные факультативно-метилотрофные бактерии, использующие метанол // Микробиология. 2020. Т. 89. С. 42‒51.

  6. Chemodurova A.A., Kaparullina E.N., Machulin A.V., Spröer C., Lang E., Doronina N.V. Ancylobacter lacus sp. nov. and Ancylobacter plantiphilus sp. nov. ‒ novel aerobic facultative methylotrophic bacteria // Microbiology (Moscow). 2020. V. 89. P. 35‒43.

  7. Чемодурова А.А., Решетников А.С., Агафонова Н.В., Доронина Н.В. Гены, кодирующие НАД+-зависимые формиатдегидрогеназы, в таксономии аэробных метилотрофных бактерий рода Ancylobacter // Микробиология. 2023. Т. 92. С. 98‒102.

  8. Chemodurova A.A., Reshetnikov A.S., Agafonova N.V., Doronina N.V. Genes of NAD+-dependent formate dehydrogenases in taxonomy of aerobic methylotrophic bacteria of the genus Ancylobacter // Microbiology(Moscow). 2022. V. 91. P. 834‒838.

  9. Agafonova N., Kaparullina E., Trotsenko Y., Doronina N. Ancylobacter sonchi sp. nov., a novel methylotrophic bacterium from roots of Sonchus arvensis L. // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2017. V. 67. P. 4552‒4558.

  10. Aziz R.K., Bartels D., Best A.A., De Jongh M., Disz T., Edwards R.A., Zagnitko O. The RAST Server: rapid annotations using subsystems technology // BMC Genomics. 2008. V. 9. P. 1‒15.

  11. Banik A., Mukhopadhaya S.K., Dangar T.K. Characterization of N2-fixing plant growth promoting endophytic and epiphytic bacterial community of Indian cultivated and wild rice (Oryza spp.) genotypes // Planta. 2016. V. 243. P. 799–812.

  12. Bankevich A., Nurk S., Antipov D., Gurevich A., Dvorkin M., Kulikov A., Lesin V., Nikolenko S., Pham S., Prjibelski A., Pyshkin A., Sirotkin A., Vyahhi N., Tesler G., Alekseyev M., Pevzner P. SPAdes: A new genome assembly algorithm and its applications to single-cell sequencing // J. Comput. Biol. 2012. V. 19. P. 455‒477.

  13. Bolger A.M., Lohse M., Usadel B. Trimmomatic: a flexible trimmer for Illumina sequence data // Bioinformatics. 2014. V. 30. P. 2114‒2120.

  14. Chaumeil P.A., Mussig A.J., Hugenholtz P., Parks D.H. GTDB-Tk: a toolkit to classify genomes with the Genome Taxonomy Database // Bioinformatics. 2020. V. 36. P. 1925–1927.

  15. Chun J., Oren A., Ventosa A., Christensen H., Arahal D.R., daCosta M.S., Rooney A.P., Yi H., Xu X.-W., De Meyer S., Trujillo M.E. Proposed minimal standards for the use of genome data for the taxonomy of prokaryotes // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2018. V. 68. P. 461–466.

  16. Dimise E.J., Widboom P.F., Bruner S.D. Structure elucidation and biosynthesis of fuscachelins, peptide siderophores from the moderate thermophile Thermobifida fusca // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2008. V. 105. P. 15311‒15316.

  17. Doronina N.V., Chemodurova A.A., Grouzdev D.S., Koziaeva V.V., Shi W., Wu L., Kaparullina E.N. Ancylobacter moscoviensis sp. nov., facultatively methylotrophic bacteria from activated sludge and the reclassification of Starkeya novella (Starkey 1934) Kelly et al. 2000 as Ancylobacter novellus comb. nov., Starkeya koreensis Im et al. 2006 as Ancylobacter koreensis comb. nov., Angulomicrobium tetraedrale Vasil’eva et al. 1986 as Ancylobacter tetraedralis comb. nov., Angulomicrobium ammanitiforme Fritz et al. 2004 as Ancylobacter ammanitiformis comb. nov. // Antonie van Leeuwenhoek. 2023. V. 116. P. 153‒170.

  18. Doronina N.V., Gogleva A.A., Trotsenko Y.A. Methylophilus glucosoxydans sp. nov., a restricted facultative methylotroph from rice rhizosphere // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2012. V. 62. P. 196‒201.

  19. Firsova J., Doronina N., Lang E., Spröer C., Vuilleumier S., Trotsenko Y. Ancylobacter dichloromethanicus sp. nov. ‒ a new aerobic facultatively methylotrophic bacterium utilizing dichloromethane // Syst. Appl. Microbiol. 2009. V. 32. P. 227–232.

  20. Gordon S.A., Weber R.P. Colorimetric estimation of indoleacetic acid // Plant Physiol. 1951. V. 26. P. 192–195.

  21. Härtig C. Rapid identification of fatty acid methyl esters using a multidimensional gas chromatography–mass spectrometry database // J. Chromatogr. A. 2008. V. 1177. P. 159‒169.

  22. Hoang D.T., Chernomor O., von Haeseler A., Minh B.Q., Vinh L.S. UFBoot2: improving the ultrafast bootstrap approximation // Mol. Biol. Evol. 2018. V. 35. P. 518–522.

  23. Kalyaanamoorthy S., Minh B.Q., Wong T.K.F., von Haeseler A., Jermiin L.S. ModelFinder: Fast model selection for accurate phylogenetic estimates // Nature Methods. 2017. V. 14. P. 587–589.

  24. Kaparullina E.N., Trotsenko Yu.A., Doronina N.V. Methylobacillus methanolivorans sp. nov., a novel non-pigmented obligately methylotrophic bacterium // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2017. V. 67. P. 425‒431.

  25. Kim M., Oh H.-S., Park S.-C., Chun J. Towards a taxonomic coherence between average nucleotide identity and 16S rRNA gene sequence similarity for species demarcation of prokaryotes // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2014. V. 64. P. 346–351.

  26. Konstantinidis K.T., Roselló-Móra R., Amann R. Uncultivated microbes in need of their own taxonomy // ISME J. 2017. V. 11. P. 2399–2406.

  27. Lane D.J. 16S/23S rRNA sequencing // Nucleic acid Techniques in Bacterial Systematics / Eds. Stackebrandt E., Goodfellow M. Chichester: John Wiley and Sons, 1991. P. 115–175.

  28. Lang E., Swiderski J., Stackebrandt E., Schumann P., Spröer C., Sahin N. Description of Ancylobacter oerskovii sp. nov. and two additional strains of Ancylobacter polymorphus // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2008. V. 58. P. 1997–2002.

  29. Lu P., Jin L., Liang B., Zhang J., Li S., Feng Z., Huang X. Study of biochemical pathway and enzyme involved in metsulfuronmethyl degradation by Ancylobacter sp. XJ-412-1 isolated from soil // Curr. Microbiol. 2011. V. 62. P. 1718–1725.

  30. Meier-Kolthoff J.P., Auch A.F., Klenk H.-P., Göker M. Genome sequence-based species delimitation with confidence intervals and improved distance functions // BMC Bioinform. 2013. V. 14. Art. 60.

  31. Nguyen L.T., Schmidt H.A., von Haeseler A., Minh B.Q. IQ-TREE: a fast and effective stochastic algorithm for estimating maximum-likelihood phylogenies // Mol. Biol. Evol. 2015. V. 32. P. 268–274.

  32. Nie W., Zheng X., Wang S., Ahmad I., Zhu B. Genome resource of Ancylobacter pratisalsi E130T: a novel plant-growth-promoting bacterium isolated from the rhizosphere // Phytopathol. 2022. V. 112. P. 729–731.

  33. Ørskov J. Beschreibung eines neuen Mikroben, Microcyclus aquaticus, mit eigentuemlicher Morphologie // Zentralbl Bakteriol Parasitenkd Infektionskr Hyg Abt I. 1928. V. 107. P. 180–184 (in German).

  34. Raj H.D. Proposal of Ancylobacter gen. nov. as a substitute for the bacterial genus Microcyclus Ørskov 1928 // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 1983. V. 33. P. 397–398.

  35. Schwyn B., Neilands J.B. Universal chemical assay for the detection and determination of siderophores // Anal. Biochem. 1987. V. 160. P. 47–56.

  36. Slobodkina G.B., Merkel A.Y., Novikov A.A., Bonch-Osmolovskaya E.A., Slobodkin A.I. Pelomicrobium methylotrophicum gen. nov., sp. nov. a moderately thermophilic, facultatively anaerobic, lithoautotrophic and methylotrophic bacterium isolated from a terrestrial mud volcano // Extremophiles. 2020. V. 24. P. 177–185.

  37. Staley J.T., Jenkins C., Konopka A.E. Ancylobacter // Bergey’s Manual of Systematics of Archaea and Bacteria / Eds. Trujillo M.E., Dedysh S., DeVos P., Hedlund B., Kämpfer P., Rainey F.A., Whitman W.B., 2015. https://doi.org/10.1002/9781118960608.gbm00811

  38. Suarez Ch., Ratering S., Spröer J., Schnell S. Ancylobacter pratisalsi sp. nov. with plant growth promotion abilities from the rhizosphere of Plantago winteri Wirtg. // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2017. V. 67. P. 4500‒4506.

  39. Tamura K., Peterson D., Peterson N., Stecher G., Nei M., Kumar S. MEGA5: molecular evolutionary genetics analysis using maximum likelihood, evolutionary distance, and maximum parsimony methods // Mol. Biol. Evol. 2011. V. 28. P. 2731–2739.

  40. Tatusova T., DiCuccio M., Badretdin A., Chetvernin V., Nawrocki E.P. NCBI prokaryotic genome annotation pipeline // Nucl. Acids Res. 2016. V. 44. P. 6614–6624.

  41. Thompson J.D., Gibson T.J., Plewniak F., Jeanmougin F., Higgins D.G. The ClustalX windows interface: flexible strategies for multiple sequence alignment aided by quality analysis tools // Nucl. Acids Res. 1997. V. 25. P. 4876–4882.

  42. van den Wijngaard A.J., Prins J., Smal A.J., Janssen D.B. Degradation of 2-chloroethylvinylether by Ancylobacter aquaticus AD25 and AD27 // Appl. Environ. Microbiol. 1993. V. 59. P. 2777–2783.

  43. van den Wijngaard A.J., van der Kamp K.W., van der Ploeg J., Pries F., Kazemier B., Janssen D.B. Degradation of 1,2-dichloroethane by Ancylobacter aquaticus and other facultative methylotrophs // Appl. Environ. Microbiol. 1992. V. 58. P. 976–983.

  44. Varghese N.J., Mukherjee S., Ivanova N., Konstantinidis K.T., Mavrommatis K., Kyrpides N.C., Pati A. Microbial species delineation using whole genome sequences // Nucl. Acids Res. 2015. V. 43. P. 6761–6771.

  45. Xin Y.H., Zhou Y.G., Chen W.X. Ancylobacter polymorphus sp. nov. and Ancylobacter vacuolatus sp. nov. // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2006. V. 56. P. 1185–1188.

  46. Xin Y.H., Zhou Y.G., Zhou H.L., Chen W.X. Ancylobacter rudongensis sp. nov., isolated from roots of Spartina anglica // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2004. V. 54. P. 385–388.

  47. Wang P., Sheng H., Hong Yi, Debnath S.Ch., Cen Yan, Li K., Chen G., Xu J., Wu F., Guo Zh., Zheng D. Ancylobacter gelatini sp. nov., isolated from beach sediment of Zhairuo Island, China // Arch. Microbiol. 2022. V. 204. Art. 430.

Дополнительные материалы отсутствуют.