Молекулярная биология, 2022, T. 56, № 6, стр. 883-883

Редактирование геномов бактериофагов – модификация модельных фагов Т7, Т5 и Т3 при помощи рекомбиниринга и SpCas9 селекции

А. Исаев a*, А. Андриянов a, Е. Знобищева b, Е. Зорин a, Н. Морозова b, К. Северинов abc**

a Сколковский институт науки и технологий
143028 Сколково, Москва, Россия

b Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого
195251 Санкт-Петербург, Россия

c Waksman Institute of Microbiology
NJ 08854, Piscataway, USA

* E-mail: tcft18@gmail.com
** E-mail: severik@waksman.rutgers.edu

Поступила в редакцию 01.04.2022
После доработки 22.05.2022
Принята к публикации 22.05.2022

Полный текст (PDF)

Аннотация

Бактериофаги ‒ вирусы, инфицирующие бактериальные клетки, ‒ самые распространенные биологические объекты на Земле. Использование фагов в фундаментальных исследованиях и индустрии требует методов, позволяющих проводить редактирование их геномов. По сравнению с генетической инженерией бактерий, модификацию геномов фагов значительно затрудняет недостаток маркеров селекции и необходимость трудозатратной ручной проверки рекомбинантых/мутировавших вариантов. Развитие технологий CRISPR-Cas позволило решить эту проблему за счет использования принципа негативной селекции, т.е. подавления размножения фагов с родительским вариантом генома. В данной статье мы опишем методы, используемые для редактирования геномов фагов, а также их варианты, сопряженные с использованием технологий CRISPR-Cas. Мы также приводим собственные результаты применения данных технологий, позволивших внести точечные мутации, делеции и инсерции в геномы модельных фагов Escherichia coli T7, T5 и T3.

Ключевые слова: бактериофаг, CRISPR-Cas, редактирование генома, рекомбиниринг, фаговая терапия, гомологичная рекомбинация, “перезагрузка” фага, T7, T5, T3

Статья представлена авторами на английском языке.

Дополнительные материалы отсутствуют.