Молекулярная биология, 2022, T. 56, № 6, стр. 914-914
Репарация двухцепочечных разрывов ДНК, генерируемых CRISPR-Cas9 в Pseudomonas putida KT2440
Н. Шараев a, L. Chacon-Machado a, c, О. Мушарова a, b, Е. Савицкая a, К. Северинов a, b, *
a Сколковский институт науки и технологий
143028 Москва, Россия
b Институт молекулярной генетики
119334 Москва, Россия
c Department of Microbiology, Cornell University
NY 14850, Ithaca, USA
* E-mail: severik@waksman.rutgers.edu
Поступила в редакцию 03.05.2022
После доработки 30.05.2022
Принята к публикации 30.05.2022
- EDN: KCGNSQ
- DOI: 10.31857/S0026898422060180
Аннотация
Pseudomonas putida KT2440 ‒ это метаболически универсальная бактерия со значительными перспективами в качестве основного штамма для производства и переработки сложных органических соединений. В отличие от большинства бактерий, P. putida KT2440 кодирует белки Ku и LigD, участвующие в негомологичном соединении концов (NHEJ). Этот путь восстановления двухцепочечных разрывов (DSB) в ДНК обладает мутагенным потенциалом, который может быть использован в сочетании с доступными в настоящее время инструментами редактирования генома, генерирующими программируемые DSB. В этой работе мы исследовали эффект делеции или сверхэкспрессии NHEJ-ассоциированных ферментов P. putida KT2440 на мутациях, генерируемых при репарации Cas9-опосредованных DSB, с двойной целью ‒охарактеризовать NHEJ и изучить, как он функционально взаимодействует с текущим “золотым стандартом” редактирования генов. Результаты нашей работы проливают свет на нематричные механизмы репарации DSB у P. putida KT2440. Представленная информация послужит основой для расширения инструментария генной инженерии этого важного микроорганизма.
Статья представлена авторами на английском языке.
Список литературы отсутствует.
Дополнительные материалы отсутствуют.
Инструменты
Молекулярная биология


