Нейрохимия, 2021, T. 38, № 3, стр. 235-241

Изучение модификации лекарственного центра I сывороточного альбумина человека гипохлоритом натрия методом разрешенной во времени флуоресцентой спектроскопии

Т. И. Сырейщикова 1, Н. В. Смолина 2, М. Г. Узбеков 2, В. И. Бриллиантова 2, Е. Д. Сыромятникова 1, Г. Е. Добрецов 3

1 Физический институт им. П.Н. Лебедева РАН
Москва, Россия

2 ФГБУ Московский научно-исследовательский институт психиатрии
Москва, Россия

3 ФГБУ ФНКЦ физико-химической медицины ФМБА
Москва, Россия

Поступила в редакцию 10.03.2021
После доработки 15.03.2021
Принята к публикации 17.03.2021

Аннотация

Проведено измерение кинетики затухания флуоресценции зонда K-35 и аминокислотного остатка триптофана (Trp) при добавлении гипохлорита натрия в альбуминовую фракцию сыворотки крови здорового донора (HSA). Флуоресцентный зонд К-35 (возбуждение 405 нм, флуоресценция 530 нм) связывается с I лекарственным центром альбумина. Во время эксперимента молярная концентрация альбумина во фракции изменялась от 0.3 до 20 мкМ. Окисление фракции гипохлоритом регистрировали по изменению флуоресценции Trp, также расположенного в I центре альбумина (возбуждение 290 нм, флуоресценция 350 нм). Было показано, что при молярной концентрации альбумина в сыворотке крови порядка 30 мкМ HSA проявляет антиоксидантную активность, позволяющую ему поддерживать свои функции даже после воздействия относительно больших количеств гипохлорита (до 50 молекул окислителя на молекулу белка). HSA сохраняет свою способность к связыванию лигандов , так как свойства зонда К-35 при окислении остались практически неизменными, зарегистрированы лишь незначительные изменения в характеристиках связывания. Добавленный гипохлорит в первую очередь расходуется на окисление аминокислот альбумина, в том числе на наблюдаемое в эксперименте окисление Trp. Для 14 сывороток доноров показано достоверное отличие флуоресценции триптофана, окисленного и нативного.

Ключевые слова: флуоресцентный зонд, аминокислотный остаток Trp, затухание флуоресценции, метод разрешенной во времени флуоресценции, гипохлорит натрия

DOI: 10.31857/S1027813321030122

Список литературы

  1. Colombo G., Clerici M., Giustarini D., Rossi R., Milzani A., Dalle_Donne // Antioxid. Redox Signal. 2012. V. 17. P. 1515–1527.

  2. Sozarukova M.M., Proskurnina E.V., Vladimirov Yu.A. // Bull. RSMU. 2016. № 1. P. 56–61.

  3. Pattison D.I., Davies M.J. // Curr. Med. Chem. 2006. V. 13. P. 3271–3290.

  4. Anraku M., Yamasaki K., Maruyama T., Kragh-Hansen U., Otagiri M. // Pharm. Res. 2001. V. 18. P. 632–639.

  5. Sudlow G., Birkett D.J., Wade D.N. // Mol. Pharmacol. 1975. V. 11. P. 824–832.

  6. Graziano Colombo, Marco Clerici, Alessandra Altomare, Francesco Rusconi, Aldo Milzani // J. Proteomics. 2017. V. 152. P. 22–32.

  7. Clare L. Hawkins, Michael J. Davies // Biochem. J. 1999. V. 340. P. 539–548 (Printed in Great Britain).

  8. Robaszkiewicz A., Bartosz G., Soszynki M. // Free Rad. Res. 2008. V. 42. P. 30–39.

  9. Chekanov A.V., Panasenko O.M., Osipov A.N., Matveeva N.S., Kazarinov K.D., Vladimirov Iu.A., Sergienko V.I. // Biophysics. 2005. V. 50. № 1. P. 13–19.

  10. Arnhold J., Hammerschmidt S., Wagner M., Mueller S., Arnold K., Grimm E. // Biomed. Biochim. Acta. 1990. V. 49. P. 991–997.

  11. Eduardo Lissi, M. Alicia Biasutti, Elsa Abuin, Luis Leyn // J. Photochemistry and Photobiology B: Biology. 2009. V. 94. P. 77–81.

  12. Asami Kawakami, Kazuyuki Kubota, Naoyuki Yamada, Uno Tagami, Kenju Takehana, Kenji Takehana, Ichiro Sonaka, Eiichiro Suzuki, Kazuo Hirayama // FEBS. 2006. V. 273. P. 3346–3357.

  13. Mohammad Reza, Ashrafi Kooshka, Reza Khodarahmi, Seyyed Arash Karimib, Mohammad Reza Nikbakhtc // J. Reports in Pharmaceutical Sciences. 2012. V. 1. № 2. P. 94–106.

  14. Gorinstein Sh., Goshev I., Moncheva S., Caspi A. // J. Protein Chem. 2000. V. 19. № 8. P. 637–642.

  15. Doumas B.T., Watsonand W.A., Biggs H.G. // Clin. Chim. Acta. 1971. V. 31. P. 87–96.

  16. Syrejshchikova T.I., Gryzunov Y.A., Smolina N.V., Komar A.A., Uzbekov M.G., Misionzhnik E.J., Maksimova N.M. // Laser Physics. 2010. V. 20. № 5. P. 1074–1078.

  17. Szabo A.G., Rayner D.M. // J. Am. Chem. Soc. 1980. V. 102. P. 2–4.

  18. Dobretsov G.E., Syrejshchikova T.I., Smolina N.V., Uzbekov M.G. // Nova Publishes. 2015. P. 129–173.

  19. Smolina N.V., Syrejshchikova T.I., Uzbekov M.G., Dobretsov G.E. // Eds.: Grigoriev A.I. and Vladimirov Yu.A. Moscow, MAKS Press. 2015. V. 2. P. 293–327.

  20. Добрецов Г.Е., Сырейщикова Т.И., Грызунов Ю.А., Смолина Н.В., Комар А.А. // Биофизика. 2010. Т. 55. № 2. С. 213–219.

  21. Добpецов Г.Е., Гpызунов Ю.А., Cыpейщикова Т.И., Смолина Н.В., Cветличный В.Ю., Поляк Б.М. // Биофизика. 2012. Т. 57. № 3. С. 405–409.

  22. Добрецов Г.Е., Сырейщикова Т.И., Смолина Н.В. // Биофизика. 2011. Т. 56. № 3. С. 403–406.

  23. Смолина Н.В., Добрецов Г.Е., Сырейщикова Т.И., Гамбург Ю.Д., Калинина В.В., Грызунов Ю.А // Эфферентная и физико-химическая медицина. 2012. № 3. С. 16–21.

  24. Dobretsov G., Polyak B., Smolina N., Babushkina T., Syrejshchikova T., Klimova T., Sverbil V., Peregudov A., Gryzunov Y., Sarkisov O. // J. Photochemistry and Photobiology, A: Chemistry. 2013. V. 251. P. 134–140.

Дополнительные материалы отсутствуют.