Онтогенез, 2023, T. 54, № 3, стр. 232-238

Получение нулевой мутации гена toothrin методом направленной гомологичной рекомбинации у Drosophila melanogaster

Е. Е. Куваева a, Д. А. Куликова a, О. Б. Симонова a*, И. Б. Мерцалов a

a Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН
119334 Москва, ул. Вавилова, 26, Россия

* E-mail: osimonova@hotmail.com

Поступила в редакцию 16.01.2023
После доработки 10.05.2023
Принята к публикации 13.05.2023

Аннотация

Ген toothrin (tth) дрозофилы является родственным консервативному семейству генов d4, кодирующих специфические факторы транскрипции у многоклеточных животных. В предыдущих работах мы исследовали эффект оверэкспрессии гена tth и охарактеризовали специфический паттерн его экспрессии в нервной системе, но мутации в гене tth до сих пор не были обнаружены. Нулевые мутанты необходимы для анализа функций генов и скрининга их генов-партнеров. В работе мы описываем получение первых дрозофил, нокаутных по гену tth, с помощью метода гомологичной рекомбинации и впервые характеризуем фенотип летальных эмбрионов, вызванный потерей функции этого гена.

Ключевые слова: нокаут гена, семейство генов d4, toothrin, Drosophila melanogaster

Список литературы

  1. Симонова О.Б., Куликова Д.А., Мерцалов И.Б. и др. Исследование суперэкспрессии нового гена toothrin у дрозофилы // Генетика. 2005. Т. 41. № 2. С. 196–202.

  2. Ashburner M., Golic K.G., Hawley R.S. Drosophila: A Laboratory Handbook. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2005. 1409 p.

  3. Buchman V.L., Ninkina N.N., Bogdanov et al. Differential splicing creates a diversity of transcripts from a neurospecific developmentally regulated gene encoding a protein with new zinc-finger motifs // Nucleic Acids Res. 1992. V. 20(21). P. 5579–5585.

  4. Gong W.J., Golic K.G. Ends-out, or replacement, gene targeting in Drosophila // PNAS. 2003. V. 100(5). P. 2556–2561.

  5. Ishizaka A., Mizutani T., Kobayashi K. et al. Double plant homeodomain (PHD) finger proteins DPF3a and -3b are required as transcriptional co-activators in SWI/SNF complex-dependent activation of NF-κB RelA/p50 heterodimer // J. Biol. Chem. 2012. V. 287(15). P. 11924–11933.

  6. Kulikova D.A., Mertsalov I.B., Simonova O.B. d4 family genes: genomic organization and expression // Russ. J. Dev. Biol. 2013. V. 44. P. 1–6.

  7. Kuvaeva E.E., Kulikova D.A., Simonova O.B., Mertsalov I.B. Studying the specific localization of Toothrin protein from related D4 family in Drosophila melanogaster // Rus. J. Dev. Biol. 2022. V. 53. № 2. P. 145–149.

  8. Nabirochkina E.N., Simonova O.B., Mertsalov I.B. et al. Expression pattern of dd4, a sole member of the d4 family of transcription factors in Drosophila melanogaster // Mech. Dev. 2002. V. 114. P. 119–123.

  9. Nefedova L.N. Drosophila melanogaster as a model of developmental genetics: modern approaches and prospects // Russ. J. Dev. Biol. 2020. V. 51. P. 201–211.

  10. Turan S., Galla M., Ernst E. et al. Recombinase-mediated cassette exchange (RMCE): traditional concepts and current challenges // J. Mol. Biol. 2011. V. 407(2). P. 193–221.

  11. Will E., Klump H., Heffner N. et al. Unmodified Cre recombinase crosses the membrane // Nucleic Acids Res. 2002. V. 30(12):e59.

Дополнительные материалы отсутствуют.