1. На главную
  2. Электронные версии
  3. Успехи современной биологии
  4. T. 142, № 6, 2022

Успехи современной биологии, 2022, T. 142, № 6, стр. 650-655

Композит хитозана с аспарагиновой кислотой и его влияние на свертывание крови в условиях in vitro и in vivo

Л. А. Ляпина 1, *, М. Е. Григорьева 1, Т. Ю. Оберган 1, Т. А. Шубина 1

1 Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, биологический факультет
Москва, Россия

* E-mail: lyapinal@mail.ru

Поступила в редакцию 18.04.2022
После доработки 14.05.2022
Принята к публикации 14.05.2022

Полный текст (PDF)

Аннотация

Созданы композиты хитозана с аспарагиновой кислотой при разных весовых соотношениях компонентов и изучено их влияние на состояние первичного и плазменного гемостаза в условиях in vitro с целью выявления наиболее перспективного из них. Эксперименты также проведены на здоровых животных при многократном в течение 14 сут ежедневном пероральном введении выявленного in vitro коагулянтного композита хитозан–аспарагиновая кислота в дозе 102 мкг/кг массы тела крыс. Установлено, что через 20 ч после последнего введения композита и его составных частей в эквивалентном количестве параметры первичного (уровень агрегации тромбоцитов) и плазменного (активированное частичное тромбопластиновое время, тромбиновое время, протромбиновое время, фибринолиз, уровень фактора XIIIa, концентрация фибриногена, процесс полимеризации фибрина) гемостаза свидетельствовали о повышении свертываемости крови и предупреждении геморрагических осложнений в организме крыс. Делается вывод о перспективности изучения хитозана и его композита с аспарагиновой кислотой в условиях патологически сниженной свертываемости крови с последующим их внедрением в клиническую практику.

Ключевые слова: хитозан, композит хитозан–аспарагиновая кислота, система гемостаза

ВВЕДЕНИЕ

Применение фармакологических препаратов на основе аминокислот – общепринятая практика, используемая на протяжении последних десятилетий специалистами различных направлений. Известно, что аминокислоты выполняют роль нейромедиаторов, способствуют адекватной реализации функций макро- и микроэлементов, а также витаминов. Современные данные свидетельствуют о том, что биосинтез заменимых кислот в количествах, полностью обеспечивающих потребности организма, невозможен.

Одна из заменимых аминокислот – аспарагиновая кислота – синтезируется в организме из аспарагина. Она входит в состав животных и растительных белков, относится к эндогенным биоспецифическим соединениям, содержащимся в ЦНС, особенно в головном мозге, и не считается остро токсичной после перорального воздействия даже в большой дозе – 2 г/кг (Стручкова, Брилкина, 2016; Delaney et al., 2008). Аспарагиновая кислота обладает иммуномодулирующим действием – ускоряет процесс образования иммуноглобулинов и антител; участвует в синтезе ДНК и РНК – основных носителей генетической информации; повышает физическую выносливость; нормализует баланс возбуждения и торможения в ЦНС. Она выполняет важнейшую роль в различных метаболических реакциях и способствует трансформации углеводов в глюкозу с последующим созданием запасов гликогена, в результате чего повышается сопротивляемость организма усталости (Лысиков, 2012). Аспарагиновая кислота входит в состав гемостатического гидрогеля, включающего полиаспарагиновую кислоту (polyaspartic acid, PASA) и дополнительно неорганический полифосфат и диальдегид. Этот гидрогель показал биосовместимость и адгезию к эндотелию тканей с высокими коагулянтными характеристиками. Так, на артерии уха кролика, используемой в качестве модели гемостаза in vivo, продемонстрировано, что гидрогель PASA может остановить кровотечение травматической раны и значительно уменьшить кровопотерю. В целом гидрогели PASA демонстрируют большой потенциал в биомедицинском применении, особенно в раневых перевязочных материалах и в восстановлении тканей (Chen et al., 2022).

Получены биоматериалы из биоактивных гемостатических средств, включающих не только аспарагиновую кислоту, но и хитозан. Они имеют отличные коагулянтные свойства при контакте с кровью человека благодаря активации тромбоцитов, подтвержденной тестами на свертываемость крови и микрофотографиями, показавшими прилипание клеток крови к поверхности биоматериалов. Кроме того, эти биоматериалы биосовместимы с дермальными фибробластами человека и обладают превосходными антибактериальными свойствами при борьбе как с золотистым стафилококком Staphylococcus aureus, так и с кишечной палочкой Escherichia coli. Материалы на основе хитозана с гемостатическими свойствами обладают большим потенциалом при применении как в стерильных, так и в загрязненных условиях (Radwan-Pragłowska et al., 2019), поскольку известно, что замедленная коагуляция, хроническое воспаление, бактериальная инфекция и медленная пролиферация клеток препятствуют эффективному ранозаживлению.

Хитозан – это полисахарид, полученный из хитина, который обладает отличными ранозаживляющими свойствами, сочетающимися с антимикробной и гемостатической активностью. По сравнению с обычной марлевой повязкой, хитозановая повязка влияет на первичный (возрастание агрегации тромбоцитов) и плазменный гемостаз (ускорение протромбинового времени и активированного частичного тромбопластинового времени). Хитозановая повязка ингибирует рост бактерий до 8 дней после операции и является эффективным антимикробным и прокоагулянтным средством, способствуя заживлению ран и обеспечивая подходящую среду для полезной микробиоты (Wang et al., 2021). Хитозан – один из наиболее исследованных биополимеров, он активно применяется для ранозаживления благодаря своей биосовместимости, биоразлагаемости, нетоксичности и антимикробной активности. Кроме того, хитозан и его производные привлекают большое внимание из-за его легкой перерабатываемости в различные формы (гели, пены, мембраны и шарики) и способности доставки лекарств/генов к месту назначения. Все эти свойства делают материалы на основе хитозана особенно универсальными и перспективными в применении для раневых повязок (Moeini et al., 2020; Ilyas et al., 2022).

Хитозан, введенный in vivo, контактирует с кровью, взаимодействуя с ее компонентами, что имеет решающее значение для определения эффективности и безопасности полимера. Изучено влияние хитозана с различной молекулярной массой на структуру и функцию свертывающих белков. Показано, что хитозан и фибриноген могут образовывать комплексы главным образом за счет электростатического притяжения, в результате чего изменяется структура и конформация фибриногена (Луговской и др., 2013). Однако не выявлено значительного влияния хитозана на активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ). При этом изменения параметров тромбоэластограммы демонстрируют нарушение процесса свертывания крови. Эти результаты дают важное представление о молекулярной основе биологического ответа организма на хитозан и другие биополимеры (Zhang et al., 2013).

Олигосахарид хитозана (chitosan oligosaccharide, COS) известен своей уникальной биологической активностью: противоопухолевой, противовоспалительной, антиоксидантной, антибактериальной, иммуностимулирующей. Научный интерес к COS определяется возможностью его использования при производстве лекарств, продуктов питания, косметики, биоматериалов и в тканевой инженерии. По сравнению с соответствующим полимером, COS имеет гораздо более высокие профили абсорбции на кишечном уровне, что обусловливает быстрый доступ к кровотоку и потенциальный контакт с компонентами крови. Он в определенной мере понижает риск гемолиза в зависимости от дозы и молекулярной массы, а необратимая агрегация тромбоцитов наблюдается при его высокой концентрации (Guo et al., 2018). Однако детальное влияние хитозана на компоненты крови до сих пор остается недостаточно ясным.

Цель настоящей работы – получить наиболее эффективный по коагулянтным свойствам композит хитозана с аспарагиновой кислотой, изучить его всестороннее влияние на систему гемостаза, включая первичный и плазменный гемостаз, а также выявить его роль в балансе фибринолиза и полимеризации фибрина в условиях in vitro и in vivo при пероральном многократном введении животным (крысам).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В работе использован хитозан водорастворимый (сукцинил хитозана), полученный по запатентованной методике из панцирей красноногих крабов в соответствии с ТУ 9284-027-11734126-08 (“Биопрогресс”, Россия), и аспарагиновая кислота отечественного производства. В опытах in vitro готовили композиты, включающие исходно 5000 мкг хитозана (ХТЗ) и 100 мкг аспарагиновой кислоты (АК) (композит 1), а далее готовили различные разведения композитов, а именно: композит 2 включал 1000 мкг ХТЗ + 20 мкг АК/мл, композит 3 – 100 мкг ХТЗ + 2 мкг АК/мл. ХТЗ и АК инкубировали при 37°С в течение не менее 2 мин.

В экспериментах, проведенных с соблюдением этических правил, принятых Европейской конвенцией по защите позвоночных животных (Страсбург, 15.06.2006), использовано 50 крыс-самцов Wistar массой тела 250–280 г. Животных содержали в стандартных условиях вивария (искусственное освещение день/ночь – 12 ч/12 ч, принудительная вентиляция, температура 22–26°С, относительная влажность 50–70%). Для исследования использовали здоровых животных. Животные были разделены на четыре группы: в течение 14 сут первой группе (Композит) перорально вводили ХТЗ + АК в ежедневной дозе 102 мкг/кг, второй группе (ХТЗ) подобным образом вводили эквивалентную дозу ХТЗ (100 мкг/кг), третьей группе – АК (2 мкг/кг), четвертой группе (Контроль) – 0.85%-ный раствор NaCl (физиологический раствор) в объеме 0.5 мл на крысу.

Взятие крови производили у животных из яремной вены (venа jugularis) с использованием в качестве консерванта 3.8%-го цитрата натрия в соотношении 9 : 1 через 20 ч после 14-го введения исследуемых препаратов. Кровь центрифугировали дважды: сначала – в течение 5 мин при 1000 об./мин для получения богатой тромбоцитами плазмы, а затем – в течение 12 мин при 2500 об./мин для получения бедной тромбоцитами плазмы.

Исследовали суммарную фибринолитическую активность (СФА) и неферментативный фибринолиз (НФ), ферментативный фибринолиз (ФФ), степень полимеризации фибрина (фибринполимеризационную активность), АЧТВ, тромбиновое время (ТВ), протромбиновое время (ПВ), концентрацию фибриногена, активность фактора ХIIIа (ФXIIIа) в бедной тромбоцитами плазме крови, согласно стандартным методам. Свертываемость крови изучали по тесту АЧТВ, ТВ и ПВ на анализаторе свертывания крови АСКа 2-02-“Астра” (Россия). Агрегацию тромбоцитов в богатой тромбоцитами плазме крови определяли на агрегометре АЛАТ-2 220LА (“Биола”, Россия) по методу Борна с использованием в качестве индуктора агрегации АДФ в конечной концентрации 10–6 М (Баркаган, Момот, 2008; Ляпина и др., 2012).

Статистический анализ данных осуществляли, используя пакет статистических программ Statistica 8 (StatSoft Inc., USA). Эмпирические распределения проводили с использованием критерия Шапиро–Уилка. Для полярного сравнения независимых групп применяли непараметрический критерий Манна–Уитни. Полученные данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего (M ± m).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Эксперименты in vitro

Проведенное в условиях in vitro исследование влияния трех разных композитов ХТЗ-АС показало, что все три, а именно, композит 1 (5000 мкг ХТЗ + 100 мкг АС), композит 2 (1000 мкг ХТЗ + 20 мкг АК) и композит 3 (100 мкг ХТЗ + 2 мкг АК) обладали эффектом, активирующим свертывание крови, за счет снижения АЧТВ на 13–25%, ПВ – на 19–29% и параметров фибринолиза: СФА – на 30–35.5%, НФ – на 25–28%. Композит 3, где использовались малые концентрации составляющих компонентов, также оказывал значительное воздействие на параметры гемостаза, снижая АЧТВ на 25%, ПВ – на 19%, СФА – на 30%, НФ – на 28%. Из составных частей композитов: ХТЗ значительно снижал фибринолиз крови (на 14–28%), а АК подавляла АЧТВ (на 22–32%), не влияя на другие параметры гемостаза (табл. 1).

Таблица 1.  

Изменение показателей прокоагулянтной активности и фибринолиза при добавлении к нормальной плазме крови композита хитозан–аспарагиновая кислота или его составных частей

Условия опыта АЧТВ, % ТВ, % ПВ, % СФА, % НФ, %
Композит 1 86 ± 7.0* 100 ± 0.3 71 ± 5.2** 64.5 ± 3.8** 72 ±2.3**
Композит 2 87 ± 5.7* 100 ± 0.5 75 ± 4.4** 68 ± 3.0** 75 ± 3.2**
Композит 3 75 ± 2.7** 100 ± 0.5 81 ± 4.4* 70 ± 2.8** 72 ± 2.8**
АК 1 70 ± 3.6** 107 ± 0.5 86 ± 5.9 97 ± 4.1 81 ± 4.0**
АК 2 68 ± 3.0** 101 ± 0.5 93 ± 11.1 98 ± 4.0 91 ± 3.0
АК 3 78 ± 4.0* 100 ± 1.1 94 ± 6.7 98 ± 4.0 91 ± 3.5
ХТЗ 1 91 ± 4.2 94 ± 0.3 76 ± 2.7** 83 ± 4.0** 72 ± 3.7**
ХТЗ 2 90 ± 4.8 98 ± 0.3 77 ± 2.4** 81 ± 4.7** 72 ± 3.7**
ХТЗ 3 91 ± 5.0 95 ± 0.5 80 ± 2.9** 82 ± 5.9* 86 ± 4.1*
Контроль NaCl 100 ± 5.2 100 ± 0.3 100 ± 2.9 100 ± 3.1 100 ± 2.7

Примечание: * – p < 0.05, ** – p < 0.01; статистические показатели рассчитаны относительно соответствующих проб контроля с NaCl; здесь и в табл. 2, 3.

Нами также установлено, что in vitro композиты эффективно усиливали активность ФXIIIа на 66–72% и полимеризацию фибрина – 30–42%, практически не изменяя концентрацию фибриногена и агрегацию тромбоцитов, по сравнению с контролем. Из составных частей только эквивалентная концентрация ХТЗ в композите 2 достоверно повышала концентрацию фибриногена на 16.6%. При этом ХТЗ в композите 1 достоверно усиливал полимеризацию фибрина и агрегацию тромбоцитов на 17 и 20% соответственно, по сравнению с контролем. Кроме того, ХТЗ в эквивалентных по отношению к соответствующим композитам концентрациях повышал активность ФXIIIа.

На основании проведенных в условиях in vitro экспериментов выявлено, что композит, включающий минимальное количество ХТЗ и АК (композит 3), обладает способностью повышать свертывание крови по всем тестам, а именно: АЧТВ, ПВ, активность ФXIIIа, при одновременном снижении СФА и НФ и повышении полимеризации фибрина (табл. 2).

Таблица 2.  

Изменение показателей гемостаза при добавлении к нормальной плазме крови композита хитозан–аспарагиновая кислота или его составных частей

Условия опыта Степень полимеризации фибрина, % Агрегация тромбоцитов, % Концентрация фибриногена, % Активность ФXIIIа, %
Композит 1 135.5 ± 5.2** 113 ± 5.6* 116.6 ± 5.1* 172 ± 8.6**
Композит 2 142 ± 6.7** 93 ± 4.8 108 ± 2.8 166 ± 7.8**
Композит 3 130 ± 3.3** 93 ± 4.5 110 ± 3.0 166 ± 8.4**
АК 1 103 ± 1.9 80 ± 7.0 112.5 ± 3.1* 110 ± 6.5
АК 2 102 ± 1.9 87 ± 6.9 112.5 ± 2.8* 97 ± 4.8
АК 3 102 ± 1.8 87 ± 7.2 108 ± 3.3 103 ± 4.9
ХТЗ 1 117 ± 2.3** 120 ± 6.5** 100 ± 3.5 138 ± 7.4*
ХТЗ 2 109 ± 2.8 107 ± 5.7 116.6 ± 3.4** 131 ± 6.6*
ХТЗ 3 108 ± 2.8 93 ± 5.0 100 ± 4.2 110 ± 7.7*
Контроль NaCl 100 ± 3.0 100 ± 5.8 100 ± 4.5 100 ± 4.9

Эксперименты in vivo

С композитом 3 далее проводили эксперименты на здоровых крысах, которым длительное время (в течение 14 сут) его вводили безопасным способом (перорально).

В этих условиях через 20 ч после последнего 14-го введения композита 3 установлено блокирующее действие на фибринолитический процесс (СФА снизилась на 28%, НФ – на 16%, ФФ – на 49%). Кроме того, композит снижал ПВ и АЧТВ на 27 и 18% соответственно при одновременном повышении активности ФXIIIа и агрегации тромбоцитов на 60 и 23% соответственно, по сравнению с контролем, при практически неизменном ТВ. Обращает на себя внимания факт значительного снижения ФФ, что указывает на преимущественный вклад именно ФФ в подавление СФА, что требует дальнейшего детального исследования этого процесса. Следует отметить, что активность ФXIIIа резко усиливается, что свидетельствует о способности данного композита участвовать в активации полимеризации фибрина (табл. 3).

Таблица 3.

Изменение показателей гемостаза в плазме крови через 20 ч после 14-кратного перорального введения здоровым крысам композита хитозан–аспарагиновая кислота или его составных частей

Показатели Условия опыта
контроль
NaCl 		композит
102 мкг/кг 		ХТЗ
100 мкг/кг 		АК
2 мкг/кг
СФА, % 100 ± 3.8 72 ± 1.5** 88 ± 3.8* 91 ± 2.1
НФ, % 100 ± 5.5 84 ± 4.5* 88 ± 3.5* 93 ± 5.0
ФФ, % 100 ± 5.3 51 ± 3.8** 74 ± 7.6* 95 ± 3.8
ПВ, % 100 ± 6.5 73 ± 3.0** 80 ± 2.9** 98 ± 5.0
ТВ, % 100 ± 7.6 98 ± 0.8 92 ± 3.4 101 ± 3.5
АЧТВ, % 100 ± 6.4 82 ± 5.1* 76 ± 1.5** 85 ± 5.4*
АТ, % 100 ± 7.6 123 ± 6.7** 212 ± 7.5** 92 ± 7.2
ФXIIIa, % 100 ± 3.1 160 ± 7.3** 112 ± 3.5* 111 ± 3.2*

Из составных частей коагулянтного композита 3 только ХТЗ снижает АЧТВ на 24% и ПВ – на 20%, а также показатели фибринолиза: СФА и НФ – на 12%, ФФ – на 26%. При этом наблюдается достоверное повышение агрегации тромбоцитов в 2 раза.

АК в чистом виде имеет только тенденцию к повышению активности ФXIIIа на 11%.

Таким образом, анализируя полученные данные, необходимо отметить, что при исследовании гемостазиологических эффектов трех композитов, мы остановили свой выбор на композите 3, так как, во-первых, в нем содержались наименьшие концентрации веществ, вызывающих коагулянтные эффекты в кровотоке; во-вторых, он оказывал наиболее выраженное действие на АЧТВ, по сравнению с другими композитами. Механизм гемостатического действия композита обусловлен не только присутствием в нем коагулянта хитозана, но и способствующей свертыванию крови аспарагиновой кислоты. В то же время можно заключить, что обнаруженные нами прокоагулянтные эффекты обусловлены в основном действием самого композита, включающего хитозан и аспарагиновую кислоту в определенном соотношении. До сих пор остро стоит проблема борьбы с массивной кровопотерей, являющейся причиной многочисленной смертности от кровоизлияния, которое может произойти как в бытовых условиях, так и во время операции, а также в боевых условиях. Коммерчески доступных биоматериалов может быть недостаточно для борьбы с чрезмерным кровотечением, поэтому пытаются создать разработки новых высокоэффективных комплексных гемостатических агентов (Radwan-Pragłowska et al., 2019). Полученные в настоящем исследовании результаты по изучению созданных нами композитов хитозана с аспарагиновой кислотой показали наличие у них повышенных гемостатических свойств. Результаты ряда исследований (Chou et al., 2003) показали, что хитозан усиливает адгезию и агрегацию тромбоцитов: после начального (в течение 5 мин) и длительного (в течение 30 мин) контакта тромбоцитов с хитозаном адгезия тромбоцитов дозозависимо повышается. Аналогично, хитозан также дозозависимо увеличивает агрегацию тромбоцитов и количество внутриклеточного свободного Ca2+. Кроме того, хитозан значительно усиливает экспрессию комплекса гликопротеина IIb/IIIa тромбоцитов. По данным авторов, хитозан – эффективный индуктор адгезии и агрегации тромбоцитов. Механизмы его действия могут быть обусловлены как повышением уровня Ca2+, мобилизацией и усилением экспрессии комплекса гликопротеина IIb/IIIa на поверхностях мембран тромбоцитов (Кузник, 2010; Periayah et al., 2014), так и высвобождением факторов роста из активированных тромбоцитов (Shen et al., 2006). В настоящее время создаются перспективные композиционные материалы на основе хитозана для применения в качестве гемостатических и ранозаживляющих средств (Zhang et al., 2013; Hu et al., 2018).

В наших исследованиях в условиях in vitro повышение агрегации тромбоцитов установлено только при высоких концентрациях хитозана (более 5 мг/мл), то есть отмечается дозозависимость действия и самого хитозана, и включающих его композитов.

В условиях in vivo при многократном поступлении в организм хитозана и/или включающего его композита также показано усиление агрегационной активности крови в зависимости от используемых доз.

Впервые в нашей работе проведено комплексное исследование изменений показателей всех звеньев системы гемостаза, в том числе и плазменного, под влиянием не только хитозана, но и композитов хитозана с аспарагиновой кислотой. Установлено, что параметры плазменного гемостаза дозозависимо изменяются в сторону активации свертывания крови. Дополнительно к этому, преимуществом созданных нами композитов является то, что их можно применять атравматичным безопасным способом для получения выраженного коагулянтного эффекта, что и было продемонстрировано в настоящей работе. Хотя хитозан также относится к гемостатическим агентам, но, по сравнению с исследуемыми нами композитами (особенно композитом, содержащим минимальное количество хитозана и аспарагиновой кислоты) его эффекты значительно ниже.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Полученные результаты указывают на потенциальные возможности препаратов на основе коагулянта хитозана влиять на гемостазиологический статус организма, особенно в условиях пониженной свертываемости крови с признаками геморрагии. Созданные нами композиты хитозана с аспарагиновой кислотой обладают комплексным действием на первичный и плазменный гемостаз. При многократном пероральном поступлении композитов хитозан–аспарагиновая кислота в организм выявлены максимальные свертывающие эффекты у композита с минимальным включением хитозана и аспарагиновой кислоты (композит 3). При этом показано наличие у него свертывающих, фибринстабилизирующих, тромбоцитарных, антифибринолитических эффектов и способности к полимеризации фибрина. Композиционный материал хитозан–аспарагиновая кислота заслуживает особого внимания, так как он безопасен при атравматичном способе применения. Он также способен оказать мягкий антигеморрагический эффект в случаях снижения свертываемости крови, подавления агрегации тромбоцитов или интенсификации фибринолиза. Несомненно, композиты на основе хитозана могут быть отнесены к перспективным средствам для восстановления показателей гемостаза в условиях пониженной свертываемости крови.

Список литературы

  1. Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. М.: Ньюдиамед, 2008. 292 с.

  2. Кузник Б.И. Клеточные и молекулярные механизмы регуляции системы гемостаза в норме и патологии. Чита: Экспресс-издательство, 2010. 832 с.

  3. Луговской Э.В., Макогоненко Е.М., Комисаренко С.В. Молекулярные механизмы образования и разрушения фибрина. Киев: Наукова Думка, 2013. 230 с.

  4. Лысиков Ю.А. Аминокислоты в питании человека // Экспер. клин. гастроэнтерол. 2012. № 2. С. 88–105.

  5. Ляпина Л.А., Григорьева М.Е., Оберган Т.Ю., Шубина Т.А. Теоретические и практические вопросы изучения функционального состояния противосвертывающей системы крови. М.: Адвансед Солюшнз, 2012. 160 с.

  6. Стручкова И.В., Брилкина А.А. Аминокислоты. Учебно-методическое пособие. Н. Новгород: ННГУ, 2016. 32 с.

  7. Chen D., Liu X., Qi Y. et al. Poly(aspartic acid) based self-healing hydrogel with blood coagulation characteristic for rapid hemostasis and wound healing applications // Coll. Surf. B Biointerfaces. 2022. V. 214. P. 112430. https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2022.112430

  8. Chou Tz.-C., Fu E., Wu C.-J., Yeh J.-H. Chitosan enhances platelet adhesion and aggregation // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2003. V. 302. № 3. P. 480–483. https://doi.org/10.1016/s0006-291x(03)00173-6

  9. Delaney B., Shen Z.A., Powley C.R. et al. Acute and repeated dose oral toxicity of N-acetyl-l-aspartic acid in Sprague-Dawley rats // Food Chem. Toxicol. 2008. V. 46. № 6. P. 2023–2034. https://doi.org/10.1016/j.fct.2008.01.042

  10. Guo X., Sun T., Zhong R. et al. Effects of chitosan oligosaccharides on human blood components // Front. Pharmacol. 2018. V. 9. P. 1412. https://doi.org/10.3389/fphar.2018.01412

  11. Hu Z., Zhang D.Y., Lu S.T. et al. Chitosan-based composite materials for prospective hemostatic applications // Mar. Drugs. 2018. V. 16. № 8. P. 273. https://doi.org/10.3390/md16080273

  12. Ilyas R.A., Aisyah H.A., Nordin A.H. et al. Natural-fiber-reinforced chitosan, chitosan blends and their nanocomposites for various advanced applications // Polymers. 2022. V. 14. № 5. Iss. 874. P. 1–36. https://doi.org/10.3390/polym14050874

  13. Moeini A., Pedram P., Makvandi P. et al. Wound healing and antimicrobial effect of active secondary metabolites in chitosan-based wound dressings: a review // Carbohydr. Polym. 2020. V. 233. P. 115839. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2020.115839

  14. Periayah M.H., Halim A.S., Yaacob N.S. et al. Glycoprotein IIb/IIIa and P2Y12 induction by oligochitosan accelerates platelet aggregation // Biomed. Res. Int. 2014. V. 2014. P. 653149. https://doi.org/10.1155/2014/653149

  15. Radwan-Pragłowska J., Piątkowski M., Deineka V. et al. Chitosan-based bioactive hemostatic agents with antibacterial properties-synthesis and characterization // Molecules. 2019. V. 24. № 14. P. 2629. https://doi.org/10.3390/molecules24142629

  16. Shen E.C., Chou T.C., Gau C.H. et al. Releasing growth factors from activated human platelets after chitosan stimulation: a possible biomaterial for platelet-rich plasma preparation // Clin. Oral Implants Res. 2006. V. 17. № 5. P. 572–578. https://doi.org/10.1111/j.1600-0501. 2004. 01241.x

  17. Wang C.H., Cherng J.H., Liu C.C. et al. Procoagulant and antimicrobial effects of chitosan in wound healing // Int. J. Mol. Sci. 2021. V. 22. № 13. P. 7067. https://doi.org/0.3390/ijms22137067

  18. Zhang W., Zhong D., Liu Q. et al. Effect of chitosan and carboxymethyl chitosan on fibrinogen structure and blood coagulation // J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 2013. V. 24. № 13. P. 1549–1563. https://doi.org/10.1080/09205063.2013.777229

Дополнительные материалы отсутствуют.

Инструменты

следующая статья выпуска предыдущая статья выпуска содержание выпуска

Успехи современной биологии

Архивы выпусков Информация о журнале Отправить рукопись в журнал