1. На главную
  2. Электронные версии
  3. Биоорганическая химия
  4. T. 45, № 4, 2019

Биоорганическая химия, 2019, T. 45, № 4, стр. 419-429

Синтез и цитотоксичность О- и N-ацильных производных азепанобетулина

Т. В. Лопатина 1, Н. И. Медведева 1, И. П. Байкова 1, А. С. Исхаков 1, 2, О. Б. Казакова 1, *

1 Уфимский Институт химии Уфимского федерального исследовательского центра Российской академии наук
450054 Уфа, проспект Октября, 71, Россия

2 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования “Башкирский государственный университет”
450076 Уфа, ул. Заки Валиди, 32, Россия

* E-mail: obf@anrb.ru

Поступила в редакцию 24.01.2019
После доработки 08.02.2019
Принята к публикации 22.02.2019

Полный текст (PDF)

Аннотация

Осуществлен пятистадийный синтез азепанобетулина из бетулина с общим выходом 47%. В результате ацилирования азепанобетулина ангидридами или хлорангидридами кислот (уксусной, фталевой, никотиновой), тозилирования синтезированы О- и N-производные азепанобетулина. Противоопухолевую активность в отношении большой панели раковых клеток показали азепанобетулин, его 28-тозилат, 3а-N,28-О-диникотиноат и 3-N,28-О-диацетат, в то время как моно-С28-ацилаты оказались неактивными. В отличии от азепанобетулина, его азепаноновый аналог не обладал цитотоксичностью. Наиболее чувствительными к действию азепанобетулина и его бисацилатов оказались лейкемийные клетки и опухолевые клетки толстой кишки. Азепанобетулин был высокоактивен в отношении линии клеток меланомы. 28-О-пара-Тозилазепанобетулин проявил противоопухолевую активность в отношении девяти типов опухолей, обладая цитоцидным действием в отношении 31 линии клеток.

Ключевые слова: тритерпеноиды, бетулин, азепаны, ацилаты, противоопухолевая активность

ВВЕДЕНИЕ

Тритерпеноиды и их производные обладают широким спектром биологических активностей, включая противоопухолевую [1, 2], стимулируют иммунную систему организма [3]. Механизм антиракового действия лупановых тритерпеноидов состоит в апоптозе митохондрий за счет индуцирования выработки активного кислорода и уменьшения мембранного потенциала в митохондриях опухолевой клетки [4]. Например, лупеол индуцирует апоптоз клеток лейкемии HL-60 при концентрации 75–150 мкM, не затрагивая здоровые лимфоциты [5]. Cообщалось об отсутствии действия или слабой активности бетулина по отношению к злокачественным клеткам меланомы (MEL-2) и эпидермоидного рака (KB) [6], лейкозов (HL-60, U937, K-562) и нейробластом (GOTO, NB-1) [7], в то же время бетулин способен индуцировать зависимый от каспаз апоптоз доброкачественных кератиноцитов иммортализованной линии HaCaT [8], что является одним из механизмов цитотоксической активности. В работе [9] показана связанная с апоптозом цитостатическая активность бетулина в концентрации 20 мкМ по отношению к клеткам рака легкого человека A549. Бетулиновая кислота находится во II фазе клинических испытаний лечения невусной дисплазии [10].

Ранее мы показали, что тритерпеновые семичленные циклические амины представляют собой перспективную платформаму для синтеза новых противоопухолевых и противотуберкулезных агентов [11, 12]. Настоящая работа является продолжением этих исследований и в ней сообщается о синтезе и цитотоксичности азепанобетулина и его ацильных производных.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Ранее [12] мы синтезировали азепанобетулин в пять стадий (окисление бетулина до бетулоновой кислоты, защита карбоксильной группы, оксиминирование, перегруппировка Бекмана, восстановление) с общим выходом 33%. Для того чтобы определить вклад азепанонового (лактамного) и азепанового фрагментов в структуре бетулина в его цитотоксичность, мы провели синтез этих двух соединений по схеме 1 .

Схема 1 . Условия: i NH2OH ⋅ HCl, EtOH, 3 ч, кипячение; ii SOCl2, диоксан, 30 мин, 25°C; iii LiAlН4, THF, 3 ч, кипячение; iv 10% KOH/EtOH, 5 ч, кипячение.

3-Оксо-28-ацетилбетулин (I) получали в соответствии с литературными методиками [13–15] ацилированием бетулина до 28-моноацетата с его последующим окислением. Оксиминированием соединения (I) получили оксим (II), который в результате перегруппировки Бекмана I рода превращали в лактам (III) и восстанавливали далее LiAlH4 до азепанобетулина (IV) с общим выходом 47% в перерасчете на бетулин. Лактам бетулина (V) получили после деблокирования ацетильной защиты в соединении (III). Представленная в настоящей работе методика получения азепанобетулина (IV) альтернативная синтезу, описанному в работе [12], по общему выходу (увеличение на 14%) при сохранении количества стадий.

Синтез ацильных производных азепанобетулина (IV) осуществляли с использованием ангидридного и хлорангидридного методов (схема 2 ). Ацилирование азепанобетулина (IV) привело к 28-О-ацетату (VI) и 28-О-фталату (VIII), тозилирование в стандартных условиях дало 28-О-тозилат (IX). Взаимодействием с Вос2О синтезировали 3а-N-трет-бутоксикарбонильное производное (X). В результате ацилирования азепанобетулина (IV) хлористым ацетилом образовался N,O-бисацетат (XI). Взаимодействие с трехкратным избытком хлорангидрида никотиновой кислоты провело к смеси продуктов моно- (VII) и бисацилирования (XII) примерно в равном соотношении, которые разделяли хроматографически. Варьирование условий реакции (количество хлорангидрида никотиновой кислоты, температура, растворитель) приводило только к изменению соотношения ацилатов (VII) и (XII) в смеси или неполной конверсии азепанобетулина.

Схема 2 . Условия: i АсОН, 5 ч, кипячение; ii хлорангидрид никотиновой кислоты, пиридин, DMAP, 6 ч, кипячение; iii фталевый ангидрид, пиридин, DMAP, 15 ч, кипячение; iv p-TsCl, пиридин, DMAP, 48 ч, 22 °C; v Boc2О, CH2Cl2, 24 ч, 22 °C; vi AcCl, CHCl3, DMAP, 6 ч, кипячение.

Структура полученных соединений подтверждена спектрально. Так, в спектрах ЯМР 13С 28-О-моноацилатов (VI)–(X) сигналы атомов С28 наблюдались при δ 62–64 м.д., при этом химический сдвиг сигнала атома С3 (δ 63 м.д.) оставался неизменным, таким же как в спектре азепанобетулина. В то же время в спектрах N,O-бисацилатов (XI) и (XII) наблюдался слабопольный сдвиг сигнала атома С3 на 3–4 м.д. (ЯМР 13С) и двойной набор сигналов ацетильной или никотиноильной групп (ЯМР 1Н).

В Национальном институте рака США в соответствии с соглашением между NCI и УфИХ УфИЦ РАН проведено экспериментальное исследование противоопухолевой активности соединений (VI), (VII), (IX)–(XII) in vitro, или цитотоксичности, по отношению к клеткам 60 линий 9 различных опухолей человека (легкого, толстой кишки, центральной нервной системы, яичника, почки, простаты, головного мозга, лейкоза, меланомы) по системе скрининга противоопухолевых веществ, описанной в работах [16, 17].

При первичном тестировании клетки культивировали в присутствии 10–5 М испытуемых соединений в течение 48 ч. После этого оценивали рост обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными клетками колориметрическим методом, окрашивая жизнеспособные клетки сульфородамином В. В соответствии с критерием, принятым в Национальном институте рака, вещества считаются активными в случае, если они ингибируют рост клеток до 32% от контроля или вызывают их гибель. Для соединений, проявивших цитотоксическую активность при первичном тестировании, проводили углубленное исследование в пяти различных концентрациях (10–4–10–8 М).

В соответствии с результатами первичного тестирования соединений (IV), (V), (VII)–(XII) (табл. 1) наиболее активными оказались соединения (IV), (IX), (XI) и (XII), для которых интервал ингибирования составил от 98.01 до 31.81%, а наиболее чувствительными к их действию оказались клеточные линии лейкемии и рака толстой кишки. Соединение (IX) проявило противоопухолевую активность в отношении всех 9 типов раковых клеток. Из 59 тестированных линий опухолевых клеток в отношении 31 линии соединение (IX) обладало цитоцидным действием. Характерной особенностью соединения (IX) была высокая активность в отношении линий немелкоклеточного рака легкого и рака яичника. Отличительной чертой азепанобетулина (IV) оказалась высокая активность в отношении линии меланомы. Спектр цитотоксической активности соединения (VII) при первичном тестировании был более узким. К нему были чувствительны клетки 8 опухолей человека. Соединения (V), (VII) и (X) при первичном тестировании цитотоксической активности не проявили.

Таблица 1.

Результаты предварительного тестирования цитотоксической активности соединений (IV), (V), (VII)–(XII) в концентрации 100 мкM по отношению к клеткам рака человека 60 линий*

Линия клеток Соединение
(IV) (V) (VII) (VIII) (IX) (X) (XI) (XII)
Лейкемия
CCRF-CEM 12.43 – 105.72 28.79 1.15 73.06 59.95 24.89
K-562 –26.59 76.13 – – –33.39 85.03 0.97 13.68
MOLT-4 –4.40 86.14 90.18 –7.13 –11.10 67.12 –9.90 23.58
RPMI-8226 –36.88 84.73 63.09 23.33 –14.81 53.68 –6.50 14.02
SR –40.44 91.11 87.99 6.59 –46.14 64.66 –35.60 11.27
HL-60(TB) –51.88 95.03 94.35 6.45 –34.96 71.14 –29.22 11.58
Немелкоклеточный рак легкого
A549/ATCC 44.88 84.16 96.89 61.44 12.00 97.52 33.83 29.32
EKVX 63.26 89.48 87.57 78.63 9.77 98.07 90.02 49.60
HOP-62 78.96 96.24 107.82 – 69.02 102.48 82.58 60.96
HOP-92 81.99 39.11 69.78 86.08 19.03 64.03 69.34 32.86
NCI-H226 84.36 90.29 90.52 66.33 82.14 93.08 45.20 42.07
NCI-H23 62.57 100.40 98.49 80.73 25.70 100.66 89.15 42.63
NCI-H322M 69.84 79.50 79.31 93.32 39.70 99.62 61.26 65.59
NCI-H460 –54.44 97.30 94.33 55.91 –49.08 98.00 0.02 17.69
NCI-H522 64.19 84.54 93.91 78.27 –40.98 90.76 59.58 34.30
Рак толстой кишки
COLO 205 –63.45 97.28 89.25 – –86.09 104.70 –76.47 27.87
HCC-2998 –5.02 103.54 92.10 72.08 –75.78 98.41 –28.80 50.15
HCT-116 –78.86 87.00 80.38 32.17 –82.77 93.52 –35.71 28.06
HCT-15 –3.28 97.69 80.28 57.95 –61.50 91.67 0.47 24.85
HT29 2.58 87.17 88.30 26.57 –50.82 95.87 –7.38 32.32
KM-12 23.20 103.31 87.99 51.93 –25.19 101.94 5.81 31.23
SW-620 –66.45 95.89 95.86 70.46 –69.40 99.03 –53.88 32.22
Рак центральной нервной системы
SF-268 61.21 99.38 85.96 73.19 48.23 87.48 90.88 45.48
SF-295 40.41 101.91 101.94 66.62 –11.53 99.36 103.65 40.87
SF-539 34.26 96.22 96.23 75.68 71.90 98.22 80.97 46.43
SNB-19 49.62 94.33 96.87 70.95 38.96 89.76 84.60 47.09
SNB-75 77.06 93.52 86.02 74.96 81.57 90.96 107.52 53.35
U251 7.49 97.59 99.04 44.76 –82.13 94.51 6.47 25.58
Меланома
LOX IMVI –57.73 98.06 98.29 48.27 –86.54 100.13 –98.01 21.34
MALME-3M –65.40 98.25 110.68 68.21 4.10 127.96 50.97 69.10
M14 –49.76 93.87 93.29 61.71 –20.64 100.69 –65.88 41.46
MDA-MB-435 13.55 93.83 91.03 60.91 –25.35 90.41 4.85 38.29
SK-MEL-2 78.76 96.10 90.28 94.45 83.12 108.17 60.30 65.32
SK-MEL-28 –65.40 102.62 97.91 74.41 68.35 93.12 96.57 51.27
SK-MEL-5 –82.49 93.81 81.84 46.22 92.12 86.45 84.59 2.50
UACC-257 –8.72 100.32 101.00 81.71 58.52 110.87 59.95 9.95
UACC-62 43.16 75.50 79.03 75.59 87.68 74.53 –2.48 28.36
Рак яичника
IGROV1 36.30 119.91 96.91 54.55 –87.10 86.73 57.55 42.80
OVCAR-3 44.42 97.80 89.54 68.00 –87.72 105.13 88.26 32.85
OVCAR-4 31.81 92.51 87.60 57.26 –64.39 98.07 50.70 37.56
OVCAR-5 74.96 94.93 101.88 90.05 63.30 120.26 59.15 53.91
OVCAR-8 23.54 94.88 103.77 70.53 –77.60 102.03 48.63 26.90
NCI/ADR-RES 44.82 94.78 99.50 89.69 –3.42 99.67 66.93 42.73
SK-OV-3 92.20 95.00 107.01 54.55 98.73 102.06 110.54 53.15
Рак почки
786-0 30.17 104.75 89.31 84.37 –77.52 103.93 8.13 45.12
A498 – – 97.24 112.93 81.33 77.14 107.82 46.67
ACHN 50.20 95.41 92.87 65.02 44.63 99.92 27.95 29.46
CAKI-1 38.39 91.80 62.65 91.73 –68.31 78.16 24.35 32.62
RXF 393 48.36 99.26 80.09 – –79.87 107.35 64.12 56.07
SN12C 45.93 93.90 91.60 59.28 –94.44 93.12 67.46 38.09
TK-10 80.77 101.91 112.19 65.58 43.18 113.24 90.31 51.78
UO-31 53.76 94.29 67.38 72.68 60.97 76.79 76.95 35.92
Рак простаты
PC-3 25.61 77.28 57.69 20.79 10.45 42.80 65.63 14.62
DU-145 49.53 106.50 92.89 65.85 0.90 104.36 59.93 44.01
Рак молочной железы
MCF7 –12.60 91.24 82.62 26.32 –32.58 85.60 19.65 25.62
MDA-MB-231/ATCC 46.85 96.37 94.89 94.30 –10.26 90.01 45.23 52.66
HS 578T 46.76 101.70 96.04 78.51 61.41 94.75 73.33 58.97
ВТ-549 77.10 98.99 97.26 72.55 83.72 99.69 88.62 51.90
T-47D 36.46 77.34 85.06 – 59.60 87.13 0.90 31.29
MDA-MB-468 11.74 94.76 82.60 51.97 –78.23 81.41 –49.46 23.32

* Приведены значения выживаемости клеток, культивированных в присутствии 100 мкМ изученных соединений, в процентах по сравнению с контрольными клетками (без добавления испытуемых соединений в среду культивирования). Отрицательные значения соответствуют гибели клеток. Знак “–” означает отсутствие данных.

На основании выявленной при первичном изучении значимой цитотоксической активности, соединения (IV), (IX) и (XI) протестировали в пяти различных концентрациях (табл. 2). По результатам этого тестирования рассчитаны значения логарифмов молярных концентраций, вызывающих 50% снижения роста клеток (lgGI50), полное торможение роста клеток (lgTGI), гибель 50% клеток (lgLC50). Меньшие значения lgGI50, lgTGI и lgLC50 указывают на способность соединения оказывать цитотоксическое действие в меньших концентрациях, то есть на его более высокую цитотоксическую активность.

Таблица 2.  

Цитотоксическая активность соединений (IV), (IX) и (XI) в пяти концентрациях в среде культивирования клеток

Линия клеток (IV) (IX) (XI)
lgGI50 lgTGI50 lgLC50 lgGI50 lgTGI50 lgLC50 lgGI50 lgTGI50 lgLC50
Лейкемия
CCRF-CEM –5.68 –5.31 >–4.00 –5.64 – >–4.00 –5.73 –5.31 >–4.00
K-562 –5.97 –5.42 >–4.00 –5.80 – >–4.00 –5.80 –5.38 –4.37
MOLT-4 –5.75 –5.35 >–4.00 –5.79 –5.45 – –5.74 –5.38 –5.02
RPMI-8226 –5.71 –5.35 >–4.00 –5.73 –5.34 >–4.00 –5.70 –5.38 –5.05
SR –5.80 –5.42 – – – – –6.44 – >–4.00
Hl-60(TB) – – – – – – –5.72 –5.42 –5.12
Немелкоклеточный рак легкого
A549/ATCC –5.76 –5.49 –5.22 –5.73 –5.46 – –5.77 –5.49 –5.21
EKVX –5.81 –5.52 –5.23 –5.79 –5.51 – –5.80 –5.50 –5.19
HOP-62 –5.74 –5.47 –5.19 –5.78 –5.50 – –5.77 –5.50 –5.23
HOP-92 –5.76 –5.48 –5.19 –5.81 –5.52 – –5.88 –5.57 –5.25
NCI-H226 –5.70 –5.39 –5.07 –5.74 –5.44 – –5.66 –5.30 –4.57
NCI-H23 –5.77 –5.47 –5.17 –5.76 – – –5.72 –5.45 –5.18
NCI-H322M –5.79 –5.52 –5.25 –5.75 –5.50 – –5.79 –5.52 –5.26
NCI-H460 –5.79 –5.49 –5.20 –5.77 – – –5.72 –5.43 –5.14
NCI-H522 –5.78 –5.47 – –5.77 –5.49 – –5.78 –5.49 –5.20
Рак толстой кишки
COLO 205 –5.81 –5.49 –5.17 –5.49 – – –5.92 –5.59 –5.26
HCC-2998 –5.82 –5.53 –5.25 – – – –5.78 –5.50 –5.22
HCT-116 –5.89 –5.58 –5.27 –5.48 – – –5.75 –5.48 –5.21
HCT-15 –5.86 –5.56 –5.26 – – – –5.78 –5.52 –5.25
HT29 –5.90 –5.55 – –5.46 – – –5.82 –5.53 –5.24
KM-12 –5.76 –5.49 –5.22 –5.47 – – –5.74 –5.47 –5.19
SW-620 –5.74 –5.47 –5.19 – – – –5.76 –5.46 –5.16
Рак центральной нервной системы
SF-268 –5.76 –5.45 –5.14 –5.42 – – –5.47 –4.87 –4.27
SF-295 –5.78 –5.50 –5.23 –5.52 – – –5.77 –5.51 –5.24
SF-539 –5.80 –5.52 –5.24 – – – –5.78 –5.51 –5.25
SNB-19 –5.76 –5.49 –5.23 –5.43 – – –5.74 –5.49 –5.23
SNB-75 –5.81 –5.54 –5.26 – – – –5.83 –5.54 –5.25
U251 –5.78 –5.51 –5.24 – – – –5.77 –5.50 –5.23
Меланома
LOX IMVI –5.82 –5.52 – –5.76 – – –5.84 –5.56 –5.28
MALME-3M –5.82 –5.52 –5.21 –5.73 –5.42 – –5.80 –5.52 –5.23
M14 –5.80 –5.50 –5.21 –5.74 –5.48 – –5.72 –5.41 –5.09
MDA-MB-435 –5.81 –5.53 – –5.76 –5.50 – –5.83 –5.54 –5.26
SK-MEL-2 –5.73 –5.43 – –5.74 –5.48 – –5.73 –5.45 –5.18
SK-MEL-28 –5.79 –5.50 –5.21 –5.67 – – –5.74 –5.48 –5.22
SK-MEL-5 –5.86 –5.57 –5.28 –5.78 –5.51 – –5.75 –5.50 –5.24
UACC-257 –5.71 –5.43 –5.15 –5.71 –5.44 – –5.76 –5.48 –5.20
UACC-62 –5.74 –5.49 –5.24 –5.69 –5.44 – –5.75 –5.49 –5.23
Рак яичника
IGROV1 –5.78 –5.49 –5.19 –5.73 – – –5.74 –5.47 –5.20
OVCAR-3 –5.78 –5.50 –5.23 –5.78 – – –5.72 –5.43 –5.14
OVCAR-4 –5.84 –5.55 – –5.73 –5.47 – –5.80 –5.51 –5.21
OVCAR-5 –5.82 –5.54 –5.26 –5.79 –5.50 – –5.78 –5.50 –5.21
OVCAR-8 –5.74 –5.46 –5.17 –5.72 –5.44 – –5.74 –5.47 –5.20
NCI/ADR-RES –5.79 –5.50 –5.21 –5.76 – – –5.72 –5.43 –5.15
SK-OV-3 –5.74 –5.46 –5.18 –5.73 –5.48 –5.23 –5.70 –5.38 –5.05
Рак почки
786-0 –5.79 –5.50 –5.21 –5.72 –5.44 – –5.76 –5.49 –5.23
A498 –5.66 –5.25 –4.48 –5.79 –5.50 –5.22 –5.01 –4.63 –4.26
ACHN –5.77 –5.51 –5.25 –5.70 –5.46 – –5.77 –5.51 –5.26
CAKI-1 –5.81 –5.54 –5.27 –5.76 –5.50 –5.24 –5.80 –5.53 –5.26
RXF 393 –5.78 –5.50 –5.22 –5.79 –5.50 – –5.80 –5.52 –5.24
SN12C –5.79 –5.52 –5.25 –5.73 –5.47 – –5.76 –5.48 –5.20
TK-10 –5.75 –5.46 –5.16 –5.78 –5.49 – –5.77 –5.50 –5.23
UO-31 –5.81 –5.52 –5.24 –5.79 –5.52 – –5.86 –5.57 –5.26
Рак простаты
PC-3 –5.82 –5.53 –5.24 –5.80 –5.52 – –5.80 –5.49 –5.18
DU-145 –5.79 –5.52 –5.25 –5.75 –5.48 – –5.76 –5.48 –5.21
Рак молочной железы
MCF7 –5.89 –5.56 –5.23 –5.84 – – –5.84 –5.50 –5.17
MDA-MB-231/ATCC –5.75 –5.49 –5.24 –5.73 – – –5.76 –5.46 –5.16
HS 578T –5.70 –5.32 –4.51 –5.75 –5.40 – –5.73 –5.39 –5.05
ВТ-549 –5.75 –5.46 – –5.74 –5.45 – –5.62 –5.19 –4.50
T-47D –5.76 –5.43 –5.10 –5.81 –5.50 – –5.79 –5.49 –5.20
MDA-MB-468 –5.78 –5.47 –5.16 –5.76 –5.48 – –5.82 –5.52 –5.23
MID –5.78 –5.48 –5.09 –5.75 –5.47 –4.62 –5.76 –5.45 –5.09

* Приведены значения логарифмов молярных концентраций, вызывающих 50% снижения роста клеток (lgGI50), полное торможение роста клеток (lgTG50), гибель 50% клеток (lgLC50). В случае, если указанные концентрации соединений превышали 100 мкМ, их точные значения не рассчитывались, в таблице указано “>–4.00”. Знак “–” означает отсутствие данных.

Расширенное изучение соединений (IV), (IX) и (XI) подтвердило их значимую цитотоксическую активность по отношению к широкому спектру линий клеток опухолей человека. Цитотоксическая активность соединения (IV) была в основном ниже активности соединения (XI). Схожий или несколько более высокий уровень цитотоксичности соединения (IV) в сравнении с соединением (XI) отмечен на 3 из 9 линий клеток рака легкого, 5 из 7 линий клеток рака толстой кишки, 3 из 6 клеток рака центральной нервной системы, 3 из 9 линий клеток меланомы, 4 из 7 линий клеток рака яичника, 3 из 8 линий клеток рака почки, 2 из 2 линий клеток предстательной железы, 2 из 6 линий клеток рака молочной железы. Средние значения цитотоксической активности (MID) lgLC50 соединений (IV) и (XI) оказались одинаковыми.

Высокую противоопухолевую активность in vitro и широкий спектр действия показал азепанобетулин (IV), модификация которого введением ацетатного, тозильного, фталильного, трет-бутоксикарбонильного или никотиноильного фрагментов (соединения (VII)–(XII)) привела в случае соединения (IX) к значительному увеличению, а в случае соединений (VII), (VIII) и (X) – к уменьшению или потере противоопухолевой активности. При этом N,O-бисацилаты азепанобетулина также обладают широким спектром противоопухолевой активности. На основании результатов тестирования можно сделать вывод о том, что именно азепановое, а не азепаноновое, кольцо в структуре бетулина необходимо для наличия активности; N,О-бисацилаты более активны, чем С3а или С28-моноацилаты за исключением высокоактивного 28-О-тозилата. Соединениями-лидерами стали азепанобетулин (IV) и его 3а-N,28-О-диацетат (XI).

Таким образом, предложена новая схема синтеза азепанобетулина из бетулина, проведены реакции его О- и N-ацилирования. Установлено, что наиболее чувствительными к действию ацилатов оказались все раковые клетки лейкоза и толстой кишки. Соединение (IX) проявило противоопухолевую активность в отношении всех 9 клеточных линий, в отношении 31 клетки (из 39 чувствительных) (IX) обладало цитоцидным действием. Соединение (IX) проявило противоопухолевую активность в отношении всех 9 типов раковых клеток. Из 59 тестированных линий опухолевых клеток в отношении 31 соединение (IX) обладало цитоцидным действием. Характерной особенностью соединения (IX) была высокая активность в отношении линий немелкоклеточного рака легкого и рака яичника. Отличительной чертой (IV) высокая активность в отношении линии меланомы.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Температуры плавления определяли на микростолике “Boetius”. Оптическое вращение измеряли на поляриметре “Perkin-Elmer 241 MC” (Германия) в трубке длиной 1 дм. ТСХ-анализ проводили на пластинках Сорбфил (ЗАО Сорбполимер, Россия), используя систему растворителей хлороформ–этилацетат, 40 : 1. Вещества обнаруживали 10% раствором серной кислоты с последующим нагреванием при 100–120°C в течение 2–3 мин. Элементный анализ осуществляли на СHNS-анализаторе Eurо EA-3000, основной стандарт ацетанилид. Колоночную хроматографию проводили на Al2O3, Silica 60 (Macherey-Nagel). Спектры ЯМР получены с использованием оборудования Центра коллективного пользования “Химия” УфИХ УФИЦ РАН. Спектры ЯМР 1Н, 13С (δ, м.д.; J, Гц) зарегистрированы для растворов в CDCl3 на ЯМР-спектрометре высокого разрешения “Bruker” Avance III (США) с рабочей частотой 500.13 МГц (1H), 125.47 МГц (13C) с использованием 5-мм датчика с Z-градиентом PABBO при постоянной температуре образца 298 K. Химические сдвиги приведены в миллионных долях относительно сигнала внутреннего стандарта тетраметилсилана.

Бетулин выделяли согласно [13]. 28-O-Ацетилбетулин [14], 28-О-ацетил-3-оксобетулин (I) [15] и хлорангидрид никотиновой кислоты [18] синтезировали, как описано ранее.

28-О-Ацетил-3-оксиминолуп-20(29)-ен (II). К раствору 1 ммоль (0.44 г) соединения (I) в 50 мл этанола добавляли 1.3 ммоль (0.1 г) NH2OH ⋅ HCl, кипятили 3 ч, выливали в 50 мл 5% раствора HCl, осадок отфильтровывали, промывали водой, сушили и хроматографировали на колонке с Al2O3, элюируя последовательно бензолом и хлороформом. Выход 0.43 г (95%). Т. пл. 223°С. $\left[ \alpha \right]_{D}^{{20}}$ + 75° (c 0.003, CHCl3). Спектр ЯМР 1H: 0.86, 0.92, 0.96, 1.04, 1.05 (15Н, 5с, 5СН3), 1.20–2.00 (21Н, м, СН2, СН), 1.69 (3Н, с, СН3), 2.10 (3H, с, OAc), 2.35–2.56 (3Н, м, Н13, Н16), 3.03–3.17 (1Н, м, Н19), 4.62 и 4.75 (оба уш. сигнала по 1Н, Н29), 9.21 (1Н, уш. сигнал, N-OH). Спектр ЯМР 13С: 15.1, 15.8, 16.1, 19.1, 19.2, 21.2, 21.5, 22.9, 25.5, 27.4, 29.4, 30.7, 33.3, 34.0, 37.4, 37.6, 38.1, 38.7, 40.2, 40.8, 42.3, 46.8, 50.0, 50.3, 55.0, 55.5, 62.8 (С28), 109.9 (С29), 149.7 (С20), 167.3 (С3). Найдено C 79.00; H 10.76; N 3.00. C30H49NO2. Вычислено С 79.07; Н 10.84; N 3.07. (Mr 455.72).

28-O-Ацетил-3-оксо-3а-гомо-3а-азалуп-20(29)-ен (III). К раствору 1 ммоль (0.45 г) соединения (II) в 40 мл 1,4-диоксана добавляли 5 ммоль (0.4 мл) SOCl2. Смесь перемешивали 30 мин, выливали в 100 мл воды, осадок отфильтровывали, промывали водой, сушили и хроматографировали на колонке с Al2O3, элюируя последовательно хлороформом и смесью хлороформ–этанол (50 : 1). Выход 0.38 г (78%). Т. пл. 146°C. $\left[ \alpha \right]_{D}^{{20}}$ + 33° (c 0.05, CHCl3). Спектр ЯМР 1H: 0.95, 1.03, 1.05, 1.20, 1.30 (15Н, 5с, 5СН3), 1.40–2.00 (23Н, м, СН2, СН), 1.60 (3Н, с, Н30), 2.10 (3Н, с, ОАс) 2.30–2.40 (1H, м, Н19), 2.45–2.55 (2Н, м, Н2), 3.30 (1Н, д, J 9.6, Н28а), 3.55 (1Н, д, J 9.5, Н28b), 4.55 (1Н, c, Н29а), 4.65 (1Н, c, Н29b). Спектр ЯМР 13С: 14.5, 15.8, 18.7, 19.0, 21.8, 22.4, 25.4, 26.9, 27.0, 29.0, 29.6, 30.9, 31.2, 33.2, 33.5, 33.9, 36.6, 37.4, 38.8, 40.2, 40.9, 42.8, 47.8, 48.5, 50.8, 53.1, 56.3, 62.7, 109.4 (С29), 150.7 (С20), 171.6 (ОC(O)CH3), 176.4 (С3). Найдено C 77.13; H 10.04; N 2.52. С32Н51NO3. Вычислено C 77.22; H 10.33; N 2.81. (Mr 497.39).

28-Гидрокси-3-дезокси-3а-гомо-3а-азалуп-20(29)-ен (IV). К раствору 1 ммоль (0.49 г) соединения (III) в 20 мл безводного THF добавляли 1.3 ммоль (0.046 г) LiAlH4, кипятили с обратным холодильником 3 ч, выливали в 50 мл 5% раствора HCl, осадок отфильтровывали, промывали водой, сушили и хроматографировали на колонке с Al2O3, элюируя последовательно бензолом, хлороформом и смесью хлороформ–этанол (50 : 1). Выход 0.34 г (77%). Т. пл. 175–177°С. $\left[ \alpha \right]_{D}^{{20}}$ + 1.7° (с 1.00, CHCl3). Спектр ЯМР 1H: 0.88, 0.96, 1.01, 1.29, 1.48 (15Н, 5с, 5СН3), 1.19–1.98 (24Н, м, СН2, СН), 1.58 (3Н, с, Н30), 2.24–2.38 (3Н, м.д, Н13, Н16), 2.95–3.05 (2Н, м.д, ОН, NH), 3.23–3.33 (1Н, м.д, Н28b), 3.70–3.80 (1Н, м.д, Н28а), 4.55 и 4.65 (2Н, уш.с, Н29). Спектр ЯМР 13С: 14.2, 15.8, 16.2, 18.9, 19.1, 21.8, 21.9, 22.7, 23.0, 23.3, 25.6, 26.6, 27.5, 28.8, 29.5, 31.9, 33.2, 33.7, 37.4, 40.2, 40.8, 42.7, 47.3, 47.5, 48.3, 53.8, 59.7 (С4), 62.4 (С28), 109.5 (С29), 150.2 (С20). Найдено С 81.55; Н 11.67; N 3.16. С30Н51NO. Вычислено С 81.57; Н 11.64; N 3.17. (Mr 441.739).

28-Гидрокси-3-оксо-3а-гомо-3а-азалуп-20(29)-ен (V). К раствору 1 ммоль (0.49 г) соединения (III) в 37 мл этанола добавляли 3.2 г КOН. Смесь кипятили 5 ч с обратным холодильником, выливали в 100 мл 5% раствора HCl, осадок отфильтровывали, промывали водой, сушили и хроматографировали на колонке с Al2O3, элюируя последовательно хлороформом и смесью хлороформ – этанол (50 : 1). Выход 0.40 г (89%). Т. пл. 237°C. $\left[ \alpha \right]_{D}^{{20}}$ + 43° (c 0.003, CHCl3). Спектр ЯМР 1H: 0.95, 1.03, 1.05, 1.20, 1.30 (15Н, 5с, 5СН3), 1.40–2.00 (24Н, м, СН2, СН), 1.60 (3Н, с, Н30), 2.30–2.40 (1H, м, Н19), 2.45-2.55 (2Н, м, Н2), 3.30 (1Н, д, J 9.6, Н28а), 3.55 (1Н, д, J 9.5, Н28b), 4.55 (1Н, c, Н29а), 4.65 (1Н, c, Н29b). Спектр ЯМР 13С: 14.5, 15.8, 18.7, 19.0, 21.8, 22.4, 25.4, 26.9, 27.0, 29.0, 29.6, 30.9, 31.2, 33.2, 33.5, 33.9, 37.4, 38.8, 40.2, 40.9, 42.8, 47.6, 48.5, 50.7, 53.0, 57.1, 60.4, 109.8 (С29), 150.2 (С20), 177.0 (С3). Найдено C 79.13; H 10.04; N 2.95. С30Н49NO2. Вычислено C 79.07; H 10.84; N 3.07. (Mr 455.72).

28-О-Ацетил-3-дезокси-3а-гомо-3а-азалуп-20(29)-ен (VI). Раствор 1 ммоль (0.44 г) соединения (IV) в 30 мл ледяной АсОН кипятили 5 ч с обратным холодильником, растворитель отгоняли до половины объема, реакционную массу выливали в 50 мл воды, осадок отфильтровывали, промывали водой, сушили и хроматографировали на колонке с Al2O3, элюируя бензолом. Выход 0.42 г (87%). Т. пл. 142°C. $\left[ \alpha \right]_{D}^{{20}}$ + 49° (c 0.003, CHCl3). Спектр ЯМР 1H: 0.96, 0.99, 1.01, 1.03, 1.48 (15Н, 5с, 5СН3), 1.10–1.60 (26Н, м, СН2, СН), 1.65 (3Н, с, Н30), 2.10 (3H, с, OAc), 2.35–2.45 (2H, м, H3), 3.80 (1Н, д, J 9.6, Н28а), 4.20 (1Н, д, J 9.5, Н28b), 4.55 (1Н, c, Н29а), 4.65 (1Н, c, Н29b). Спектр ЯМР 13С: 14.5, 14.7, 16.9, 18.2, 19.15, 19.9, 20.8, 20.9, 24.2, 25.1, 25.4, 26.9, 27.1, 29.5, 29.7, 33.9, 34.5, 34.7, 37.4, 41.3, 41.8, 42.3, 43.1, 46.3, 47.5, 48.7, 54.5, 62.7, 63.7, 109.8 (С29), 150.0 (С20), 171.5 (ОC(O)CH3). Найдено, %: C 79.19; H 10.93; N 2.78. С32Н53NO2. Вычислено: C 79.45; H 11.04; N 2.90. (Mr 483.77).

Методика получения соединений (VII), (XII). К раствору 1 ммоль (0.44 г) соединения (IV) в 30 мл безводного пиридина добавляли 3 ммоль хлорангидрида никотиновой кислоты, каталитическое количество диметиламинопиридина и кипятили 6 ч с обратным холодильником, выливали в 100 мл 5% раствора HCl, осадок отфильтровывали, промывали водой, сушили и хроматографировали на колонке с Al2O3, элюируя последовательно бензолом, хлороформом (соединение (VII)), и смесью хлороформ–этанол (50 : 1) (соединение (XII)).

28-О-Никотиноил-3-дезокси-3а-гомо-3а-азалуп-20(29)-ен (VII). Выход 0.20 г (35%). Т. пл. 205°C. $\left[ \alpha \right]_{D}^{{20}}$ +18° (c 0.003, CHCl3). Спектр ЯМР 1H: 0.99, 1.10, 1.20, 1.30, 1.55 (15H, 5c, 5CH3), 1.66 (3H, c, H30), 1.70–2.10 (25Н, м, СН2, СН) 2.47 (2Н, уш. cигнал, Н3), 4.10 (1Н, д, J 9.6, Н28а), 4.55 (1Н, д, J 9.5, Н28b), 4.65 (1Н, c, Н29а), 4.75 (1Н, c, Н29b), 7.40, 8.25, 8.80, 9.20 (5Н, четыре уш. cигналa, Наром). Спектр ЯМР 13С: 14.6, 14.9, 16.8, 17.4, 19.2, 19.7, 25.7, 26.9, 27.5, 28.1, 29.5, 29.7, 33.6, 34.6, 36.6, 38.0, 41.3, 43.0, 45.6, 45.1, 46.7, 47.5, 48.6, 52.6, 53.0, 55.4, 63.7 (C3), 64.2 (С28), 109.5(C29), 123.3, 126.2, 137.0, 150.6 (C20), 150.8, 153.4, 165.6 (O–C=O). Найдено C 79.00; H 9.83; N 5.03. С36Н54N2O2. Вычислено C 79.07; H 9.95; N 5.12. (Mr 546.83).

3а-N,28-O-Диникотиноил-3-дезокси-3а-гомо-3а-азалуп-20(29)-ен (XII). Выход 0.30 г (45%). Т. пл. 143°C. $\left[ \alpha \right]_{D}^{{20}}$ + 9° (c 0.003, CHCl3). Спектр ЯМР 1H: 0.99, 1.00, 1.10, 1.20, 1.45 (15H, 5c, 5CH3), 1.70 (3H, c, H30), 1.80–2.05 (25Н, м, СН, СН2) 3.30–3.40 (2Н, м, Н3), 4.10 (1Н, д, J 9.6, Н28а), 4.55 (1Н, д, J 9.5, Н28b), 4.63 (1Н, c, Н29а), 4.70 (1Н, c, Н29b), 7.30, 7.40, 7.70, 8.25, 8.60, 8.75, 9.20 (8Н, семь уш. cигналов, Наром.). Спектр ЯМР 13С: 14.7, 17.0, 19.1, 19.7, 20.6, 23.8, 25.3, 27.1, 29.5, 29.7, 29.8,32.6, 34.0, 34.6, 34.7, 37.5, 41.2, 41.7, 43.2, 44.0, 45.1, 45.6, 46.7, 47.6, 48.7, 50.5, 54.5, 63.7 (C3), 64.2 (C28), 110.1(C29), 123.3, 126.2, 128.3, 134.6, 135.4, 137.0, 147.2, 149.8, 150.2, 150.8 (C20), 153.4, 165.6 (O–C=O), 171.0 (NO–C=O). Найдено C 75.47; H 8.23; N 6.18. С42Н57N3O4. Вычислено C 75.53; H 8.60; N 6.29. (Mr 667.92).

28-О-Фталил-3-дезокси-3а-гомо-3а-азалуп-20(29)-ен (VIII). Смесь 1 ммоль (0.44 г) соединения (IV), 1.5 ммоль (0.22 г) фталевого ангидрида и каталитическое количество диметиламинопиридина в 30 мл безводного пиридина кипятили 15 ч с обратным холодильником, выливали в 100 мл 5% раствора HCl, осадок отфильтровывали, промывали водой, сушили и хроматографировали на колонке с Al2O3, элюируя последовательно хлороформом и смесью хлороформ–этанол (50 : 1). Выход 0.40 г (68%). Т. пл. 223°C. $\left[ \alpha \right]_{D}^{{20}}$ + 14° (c 0.003, CHCl3). Спектр ЯМР 1H: 0.90, 0.95, 1.01, 1.03, 1.10 (15H, 5c, 5CH3), 1.60 (3H, c, H30), 1.20–2.10 (27Н, м, СН, СН2) 2.50 (2Н, уш. сигнал, Н3), 3.95 (1Н, д, J 9.6, Н28а), 4.55 (1Н, д, J 9.5, Н28b), 4.60 (1Н, c, Н29a), и 4.70 (1Н, c, Н29b), 7.40, 7.55, 7.65 (4Н, три уш. cигнала, Наром.). Спектр ЯМР 13С: 18.2, 19.1, 22.1, 22.4, 22.8, 23.2, 23.5, 26.9, 28.2, 29.1, 29.6, 33.5, 34.0, 34.5, 37.6, 38.1, 39.1, 40.9, 41.1, 41.2, 42.9, 46.8, 47.4, 47.6, 47.7, 54.0, 54.6, 60.0, 62.5, 109.9 (C29), 127.3, 127.6, 128.5, 128.8, 131.3, 150.4 (C20), 167.9 (O–C=O), 175.0 (COOH). Найдено C 77.28; H 9.04; N 2.25. С38Н55NO4. Вычислено C 77.38; H 9.40; N 2.37. (Mr 589.85).

28-О-пара-Тозил-3-дезокси-3а-гомо-3а-азалуп-20(29)-ен (IX). Смесь 1 ммоль (0.44 г) соединения (IV), 1.5 ммоль (0.29 г) p-тозилхлорида и каталитическое количество диметиламинопиридина в 30 мл безводного пиридина перемешивали 48 ч при комнатной температуре, выливали в 100 мл 5% раствора HCl, осадок отфильтровывали, промывали водой, сушили и хроматографировали на колонке с Al2O3, элюируя хлороформом и смесью хлороформ–этанол (50 : 1, 40 : 1). Выход 0.56 г (95%). Т. пл. 182°C. $\left[ \alpha \right]_{D}^{{20}}$ + 15° (c 0.003, CHCl3). Спектр ЯМР 1H: 0.80, 0.85, 1.10, 1.50, 1.55 (15H, 5c, 5CH3), 1.60 (3H, c, H30), 1.70–2.10 (26Н, м, СН2, СН), 2.45 (3H, c, Hаром) 3.00 (1Н, уш. сигнал, Н3а), 3.25 (1Н, уш. сигнал, Н3b), 3.70 (1Н, д, J 9.6, Н28а), 4.05 (1Н, д, J 9.5, Н28b), 4.50 (1Н, c, Н29а), 4.60 (c, 1Н, Н29b), 7.40, 7.70 (4Н, два уш. сигналa, Наром). Спектр ЯМР 13С: 14.4, 16.2, 19.1, 21.1, 21.6, 21.8, 22.5, 22.9, 25.5, 26.3, 27.8, 28.9, 29.1, 29.7, 33.4, 34.0, 37.9, 39.1, 40.6, 40.9, 41.1, 42.8, 46.6, 47.1, 47.3, 48.4, 52.6, 53.0, 54.3, 63.1 (C3), 69.2 (С28), 110.2(C29), 128.0, 128.0, 129.8, 129.8, 132.7, 144.7, 149.4 (C20). Найдено C 74.45; H 9.57; N 2.15; S 5.24. С37Н57NO3S. Вычислено C 74.57; H 9.64; N 2.35, S 5.38. (Mr 589.85).

3а-N-трет-Бутоксикарбонил-3-дезокси-3а-гомо-3а-азалуп-20(29)-ен (X). Смесь 1 ммоль (0.44 г) соединения (IV), 1.1 ммоль (0.25 г) Boc2O в 30 мл CH2Cl2 перемешивали 24 ч при комнатной температуре, затем промывали водой (2 × 100 мл), сушили CaCl2, растворитель упаривали в вакууме, хроматографировали на колонке с Al2O3, элюируя хлороформом. Выход 0.47 г (87%). Т. пл. 160°C. $\left[ \alpha \right]_{D}^{{20}}$ + 30° (c 0.003, CHCl3). Спектр 1H-ЯМР: 0.80, 0.90, 0.95, 1.01, 1.03 (15H, 5c, 5CH3), 1.50 (9H, c, 3CH3), 1.60 (3H, c, H30), 1.70–2.20 (26Н, м, СН2, СН), 2.40 (2H, уш. сигнал, Н3), 3.45 (1Н, д, J 9.6, Н28а), 3.70 (1Н, д, J 9.5, Н28b), 4.55 (1Н, c, Н29а), 4.70 (c, 1Н, Н29b). Спектр 13С-ЯМР: 14.5, 16.2, 16.5, 16.9, 19.1, 20.5, 21.2, 22.9, 24.8, 25.5, 27.6, 27.8, 28.6, 29.1, 29.7, 31.2, 33.5, 34.7, 37.2, 37.6, 41.1, 41.3, 41.7, 42.9, 43.0, 47.4, 47.6, 47.8, 48.4, 48.6, 60.5, 78.7 (C(CH3)3), 109.7 (C29), 150.4 (C20), 174.3 (O–C=O). Найдено, %: C 77.42; H 10.01; N 2.31. С35Н59NO3. Вычислено, %: C 77.58; H 10.98; N 2.58. (Mr 541.85).

3а-N,28-О-Диацетил-3-дезокси-3а-гомо-3а-азалуп-20(29)-ен (XI). К раствору 1 ммоль (0.44 г) соединения (IV) в 30 мл безводного хлороформа добавляли 1.5 ммоль (0.1 мл) AcCl, каталитическое количество диметиламинопиридина и кипятили 6 ч с обратным холодильником, промывали водой (3 × 50 мл), сушили CaCl2, растворитель упаривали в вакууме, хроматографировали на колонке с Al2O3, элюируя последовательно хлороформом и смесью хлороформ–этанол (70 : 1, 40 : 1). Выход 0.42 г (80%). Т. пл. 276°C. $\left[ \alpha \right]_{D}^{{20}}$ + 16° (c 0.003, CHCl3). Спектр ЯМР 1H: 0.82, 1.00, 1.06, 1. 04, 1.08 (15Н, 5с, 5СН3), 1.10–1.80 (25Н, м, СН2, СН), 1.65 (3Н, с, Н30), 2.05 (3H, c, OAc), 2.07 (3H, c, OAc), 2.90–3.00 (2H, м, H3), 3.70 (1Н, д, J 9.6, Н28а), 4.20 (1Н, д, J 9.5, Н28b), 4.55 (1Н, c, Н29а), 4.65 (1Н, c, Н29b). Спектр ЯМР 13С: 14.4, 14.7, 16.4, 18.4, 18.7, 19.7, 19.8, 21.8, 21.9, 22.2, 22.9, 25.7, 26.8, 27.1, 27.5, 29.5, 33.5, 34.2, 34.5, 37.8, 41.1, 42.9, 43.3, 47.0, 47.2, 47.9, 48.5, 54.5, 62.1, 66.1, 109.9 (С29), 149.8 (С20), 171.3 (О–С(О)СН3), 171.5 (О–N(О)СН3). Найдено C 77.48; H 10.04; N 2.54. С34Н55NO3. Вычислено C 77.66; H 10.54; N 2.66. (Mr 525.81).

Тестирование противоопухолевой активности in vitro соединений (IV), (V), (VII)–(XII) подробно описано на сайте http://www.dtp.nci.nih.gov/branches/btb/ ivclsp.html.

БЛАГОДАРНОСТИ

Авторы благодарят National Cancer Institute за определение противоопухолевой активности соединений (IV), (V), (VII)–(XII).

ФОНДОВАЯ ПОДДЕРЖКА

Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (№ 18-33-00364) и Госзадания по теме № АААА-А17-117011910027-0.

СОБЛЮДЕНИЕ ЭТИЧЕСКИХ СТАНДАРТОВ

Настоящая статья не содержит каких-либо исследований с участием людей в качестве объектов исследований.

Все применимые международные, национальные и/или институциональные принципы ухода и использования животных были соблюдены.

КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Список литературы

  1. Zhou M., Zhang R.-H., Wang M., Xu G.-B., Liao Sh.-G. // Eur. J. Med. Chem. 2017. V. 131. P. 222–236.

  2. Salvador J.A.R., Leal A.S., Valdeira A.S., Gonçalves B.M.F., Alho D.P.S., Figueiredo S.A.C., Silvestre S.M., Mendes V.I.S. // Eur. J. Med. Chem. 2017. V. 142. P. 95–130.

  3. Hossain A., Radwan F.F., Doonan B.P., God J.M., Zhang L., Bell P.D., Haque A. // Apoptosis. 2012. V. 17. P. 1066–1078.

  4. Ye Y., Zhang T., Yuan H., Li D., Lou H., Fan P. // J. Med. Chem. 2017. V. 60. P. 6353−6363.

  5. Aratanechemuge Y., Hibasami H., Sanpin K., Katsuzaki H., Imai K., Komiya T. // Oncol. Rep. 2004. V. 11. P. 289–292.

  6. Kim D.S., Pezzuto J.M., Pisha E. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998. V. 8. P. 1707–1712.

  7. Hata K., Hori K., Ogasawara H., Takahashi S. // Toxicol. Lett. 2003. V. 143. P. 1–7.

  8. Laszczyk M., Jäger S., Simon-Haarhaus B., Scheffler A., Schempp C.M. // Planta Med. 2006. V. 72. P. 1389–1395.

  9. Pyo J.S., Roh S.H., Kim D.K., Lee J.G., Lee Y.Y. // Planta Med. 2009. V. 75. P. 127–131.

  10. Csuk R. // Expert Opin. Ther. Patents. 2014. V. 24. P. 913–923.

  11. Казакова О.Б., Гиниятуллина Г.В., Медведева Н.И., Лопатина Т.В., Байкова И.П., Толстиков Г.А., Апрышко Г.Н. // Биоорган. химия. 2014. С. 217–225. (Kazakova O.B., Giniyatullina G.V., Medvedeva N.I., Lopatina T.V., Baikova I.P., Tolstikov G.A., Apryshko G.N. // Russ. J. Bioorg. Chem. 2014. V. 40. № 2. P. 198–205.)

  12. Medvedeva, N.I., Kazakova, O.B., Lopatina, T.V., Smirnova, I.E., Giniyatullina, G.V., Baikova, I.P., Kataev V.E. // Eur. J. Med. Chem. 2018. V. 143. P. 464–472.

  13. Флехтер О.Б., Карачурина Л.Т., Нигматуллина Л.Р., Сапожникова Т.А., Балтина Л.А., Зарудий Ф.С., Галин Ф.З., Спирихин Л.В., Толстиков Г.А., Плясунова О.А., Покровский А.Г. // Биоорган. химия. 2002. Т. 28. С. 543–550. (Flekhter O.B., Karachurina L.T., Nigmatullina L.R., Sapozhnikova T.A., Baltina L.A., Zarudii F.S., Galin F.Z., Spirikhin L.V., Tolstikov G.A., Plyasunova O.A., Pokrrovskii A.G. // Russ. J. Bioorg. Chem. 2002. V. 28. Р. 494–500).

  14. Флехтер О.Б., Балтина Л.А., Спирихин Л.В., Байкова И.П., Толстиков Г.А. // Изв РАН Сер хим. 1998. Т. 47. С. 531–534. (Flekhter O.B., Baltina L.A., Spirikhin L.V., Baikova I.P., Tolstikov G.A. // Russ. Chem. Bull. 1998. V. 47. P. 513–516.)

  15. Pezzuto J.M., Kim D.S.H.L. US Patent 5804575 from Sep. 8, 1998.

  16. Alley M.C., Scudiero D.A., Monks P.A., Hursey M.L., Czerwinski M.J., Fine D.L., Abbott B.J., Mayo J.G., Shoemaker R.H., Boyd M.R. // Cancer Research. 1988. V. 48. P. 589–601.

  17. Grever M.R., Schepartz S.A., Chabner B.A. // Seminars in Oncology. 1992. V. 19. P. 622.

  18. Наумова Б.С., Чекмарева И.Б., Жданович Е.С., Преображенский Н.А. // Хим.-фарм. журн. 1969. Т. 3. С. 11–12.

Дополнительные материалы отсутствуют.

Инструменты

следующая статья выпуска предыдущая статья выпуска содержание выпуска

Биоорганическая химия

Архивы выпусков Информация о журнале Отправить рукопись в журнал