Журнал эволюционной биохимии и физиологии, 2020, T. 56, № 5, стр. 337-349

Компонентный состав и химическое строение половых феромонов Zygaenidae

Выделению и идентификации половых феромонов Zygaenidae предшествовал целый комплекс работ по изучению различных аспектов хемокоммуникации, а именно: брачного поведения самцов и самок, электрофизиологических ответных реакций на запахи, влияния возраста особей и времени суток на образование половых феромонов, механизмов восприятия химических сигналов, анатомии и физиологии секреторных желез.

Первые упоминания о привлечении Zygaenidae с помощью обонятельных сигналов можно найти в расширенном обзоре М. Джекобсона [29], где сообщается о факте массового прилета самцов Zygaena (Zygaena) filipendulae (Linnaeus, 1758) (Zygaeninae) к девственной самке Lasiocampa quercus (Linnaeus, 1758) (Lasiocampidae). Позже экспериментально была подтверждена возможность привлечения самцов некоторых видов подсемейства Procridinae на половые феромоны девственных самок другого рода или подрода [30]. Было отмечено полное отсутствие аттракции между представителями следующих родов: Theresimima Strand, 1917 и Adscita Retzius, 1783; Theresimima и Jordanita Verity, 1946; Rhagades Wallengren, 1863 и Adscita; Rhagades и Jordanita; Adscita и Jordanita. Отрицательный результат наблюдался даже между особями из разных подродов рода Jordanita, а именно: Roccia Alberti, 1954 и Tremewania Efetov & Tarmann, 1999. Однако в нескольких биотестах была отмечена положительная реакция. Так, самки Theresimima ampellophaga (Bayle-Barelle, 1808) вызывали половое возбуждение у самцов Rhagades (Rhagades) pruni ([Denis & Schiffermüller], 1775) и, наоборот, самки Rh. (Rh.) pruni привлекали самцов Th. аmpellophaga (оба вида обитают в Крыму, где и были собраны для экспериментов). Самец Jordanita (Rjabovia) horni (Alberti, 1937) (из Армении) даже спарился с самкой J. (Solaniterna) subsolana (Staudinger, 1862) (из Крыма). Но самое активное половое поведение наблюдалось между аллопатрическими видами: самец Rh. (Wiegelia) amasina (Herrich-Schӓffer, 1851) (из Турции) возбуждался в присутствии самки Rh. (Rh.) pruni (из Крыма). Эти факты свидетельствовали в пользу того, что разные виды могут иметь схожий качественный состав половых феромонов, вследствие чего возможно ошибочное восприятие сигналов другого вида.

Наличие у Zygaenidae внутривидовой хемокоммуникации, осуществляемой с помощью летучих половых феромонов, было впервые обнаружено у опасного вредителя виноградарства Th. ampellophaga. Г.В. Долидзе и соавт. [31] описали успешный способ отлова самцов с применением “секс-ловушек”, в которых были размещены девственные самки данного вида. В ловушках не было обнаружено ни одной особи другого вида Insecta, что говорило о высокой видоспецифичности феромонного сигнала. Использование самками Zygaenidae феромонов для привлечения особей противоположного пола в дальнейшем было подтверждено экспериментально у целого ряда видов из трех подсемейств: Procridinae [30, 32], Chalcosiinae [33] и Zygaeninae [34–36].

Химическая структура первого полового феромона Zygaenidae была расшифрована у североамериканского вредителя винограда Harrisina metallica Stretch, 1885 (синоним Harrisina brillians Barnes & McDunnough, 1910) из подсемейства Procridinae [37]. Среди летучих веществ, выделяемых самками этого вида, были идентифицированы 2-бутилдеканоат, 2-бутилдодеканоат, изопропил-(7Z)-тетрадеценоат и 2-бутил-(7Z)-тетрадеценоат. Экспериментальным путем было установлено, что именно последнее вещество – активный компонент полового феромона самок H. metallica. Абсолютная конфигурация спиртового радикала в сложном эфире 2-бутил-(7Z)-тетрадеценоате при этом не была определена. Последующие полевые испытания показали, что наибольшей привлекательностью для самцов обладал 2S-бутил-(7Z)-тетрадеценоат (2S-7Z-14), в то время как присутствие R-энантиомера данного эфира снижало активность полового феромона [38].

Позже была предпринята попытка установить химическую структуру феромона другого вида подсемейства Procridinae – Illiberis (Primilliberis) pruni Dyar, 1905 [39]. Авторам удалось обнаружить в экстрактах феромонных желез самок непредельный бутилдодеценоат. Но хиральность спиртового радикала, положение и изомерия двойной связи в углеводородном радикале жирной кислоты остались невыясненными.

Полный стереохимический анализ полового феромона был осуществлен для вида-вредителя винограда – Theresimima ampellophaga (Procridinae) [40], распространенного преимущественно в Средиземноморье [30]. Природный феромон был экстрагирован гексаном из желез девственных самок, выведенных в лабораторных условиях. Авторы не только определили половой феромон как (2R)-бутил-(7Z)-тетрадеценоат (2R-7Z-14), но и произвели многостадийный стереоселективный синтез этого сложного эфира.

Через десять лет половой феромон был выделен и идентифицирован у самок восточноазиатского вида-вредителя плодовых розоцветных Illiberis (Primilliberis) rotundata Jordan, 1907 (Procridinae) [41]. В экстрактах женских феромонных желез, проанализированных методом газовой хроматографии/масс-спектрометрии, были обнаружены: 2-бутил-(7Z)-додеценоат и 2-бутил-(9Z)-тетрадеценоат. Тестирование энантиомеров указанных эфиров: 2R-7Z-12 и 2S-7Z-12, 2R-9Z-14 и 2S-9Z-14 – в лаборатории (метод электроантеннографии) и природных биотопах (адгезивные ловушки с аттрактивными приманками) позволило определить, что смеси 2R-7Z-12+2R-9Z-14 в соотношении соответствующих компонентов 30:100 и 50:100 обладают наибольшей аттрактивностью для самцов [41, 42].

На основании биологического материала Jordanita (Solaniterna) subsolana из Крыма, собранного профессором К.А. Ефетовым (Симферополь, Россия) и переданного им для исследования профессору W. Francke (Гамбург, ФРГ), W. Francke выявил в половом феромоне самок этого вида наличие двух компонентов: 2-бутилдодеценоата и 2-бутилдодекадиеноата (последний – впервые обнаруженное у Procridinae вещество с двумя двойными связями). Однако W. Francke так и не опубликовал эти результаты, но сообщил о них профессору M. Subchev (София, Болгария), который включил вышеупомянутую информацию (как “W. Francke, personal communication”) в свою обзорную статью по половой феромонной коммуникации Zygaenidae [7].

В 2019 г. была опубликована работа группы китайских ученых [43], в которой сообщалось об успешной идентификации полового феромона самок Phauda flammans (Walker, 1854) – вида, принадлежащего (согласно современной классификации) к семейству Phaudidae [44] и ошибочно отнесенного авторами [43] к Zygaenidae.

Таким образом, на сегодняшний день в семействе Zygaenidae структура половых феромонов установлена у пяти видов подсемейства Procridinae: H. metallica, Th. ampellophaga, I. (P.) pruni, I. (P.) rotundata и J. (S.) subsolana. Во всех случаях это втор-бутиловые эфиры ненасыщенных высших карбоновых кислот (у H. metallica, Th. ampellophaga и I. (P.) rotundata определено, что это цис-изомеры). Описанная молекулярная структура половых феромонов, как и расположение желез (в центрально-дорсальной части брюшка самок), их секретирующих, являются, по всей видимости, характерными для трибы Procridini подсемейства Procridinae [2, 4, 7]. Химический состав природных половых феромонов у представителей подсемейств Inouelinae, Chalcosiinae, Callizygaeninae и Zygaeninae на данный момент неизвестен.

Алкенилацетаты – синтетические половые аттрактанты Zygaeninae

Химические и визуальные сигналы обеспечивают узнавание партнера и успешное спаривание у видов Zygaenidae [36, 45, 46]. И хотя большинство представителей подсемейства Zygaeninae имеют яркую, хорошо заметную, апосематическую окраску [47–49], самцы этой группы для дальнедистантного поиска особей противоположного пола используют именно обонятельные стимулы. Половые аттрактанты Zygaeninae были открыты во время полевых экспериментов, проводимых разными коллективами ученых с известными половыми феромонами видов из других семейств Lepidoptera (например, Tortricidae, Sesiidae). Так, в конце 1970-х – начале 1980-х годов обнаружение самцов рода Zygaena Fabricius, 1775 (Zygaeninae) в клеевых феромонных ловушках с непредельными эфирами уксусной кислоты [50–52] послужило толчком для организации целенаправленного изучения химической коммуникации у представителей этого рода [53]. Для шести видов Zygaena были подобраны оптимальные концентрации и композиции сложных эфиров уксусной кислоты, привлекающие максимальное количество самцов к аттрактивным приманкам в природных биотопах и вызывающие такую же поведенческую реакцию самцов, как и в присутствии “зовущей” самки. Кроме того, для 12 видов Zygaena, одного вида из рода Reissita Tremewan, 1959 и одного – из рода Epizygaenella Tremewan & Povolny, 1968 (Reissita и Epizygaenella филогенетически близки к роду Zygaena) с помощью электроантеннографии была определена специфическая чувствительность рецепторных клеток, расположенных в антеннах самцов, к сложным эфирам уксусной кислоты и семи высших моноеновых спиртов: (5Z)-додеценилацетату (5Z-12:Ac), (7Z)-додеценилацетату (7Z-12:Ac), (9Z)-додеценилацетату (9Z-12:Ac), (7Z)-тетрадеценилацетату (7Z-14:Ac), (9Z)-тетрадеценилацетату (9Z-14:Ac), (11Z)-тетрадеценилацетату (11Z-14:Ac) и (11Z)-гексадеценилацетату (11Z-16:Ac).

Впоследствии аттрактивность цис-алкенилацетатов для самцов рода Zygaena неоднократно подтверждалась в полевых экспериментах, выполненных разными авторами [54–56]. Обобщенные данные о половых аттрактантах, известных из литературных источников для представителей подсемейства Zygaeninae, приведены в табл. 1.

Как мы видим, основная масса компонентов синтетических половых аттрактантов Zygaeninae представлена сложными эфирами уксусной кислоты и непредельных алифатических длинноцепочечных спиртов с числом атомов углерода от 12 до 16. Абсолютное большинство из них является цис-изомерами, причем двойная связь расположена в нечетной позиции: у одиннадцатого, девятого, седьмого и реже пятого атома углерода. Перечисленные признаки являются отражением общих правил строения привлекающих молекул Lepidoptera [2, 4].

Сложные эфиры втор-бутилового спирта и высших непредельных кислот – половые аттрактанты Procridinae

После успешной идентификации компонентного состава и молекулярного строения половых феромонов Procridinae был осуществлен стереоселективный синтез их структурных копий: 2R-7-12, 2S-7-12, 2R-7-14, 2S-7-14, 2R-9-14, 2S-9-14 [40, 41]. Все они являются цис-изомерами. Самостоятельно и в различных сочетаниях эти сложные эфиры стали применяться в эколого-фаунистических исследованиях по всему миру, что привело к открытию половых аттрактантов для целого ряда видов Zygaenidae подсемейства Procridinae (табл. 2).

Таким образом, половые феромоны самок одного вида могут служить одновременно половыми аттрактантами для самцов других видов. Зная молекулярную структуру известных половых феромонов и половых аттрактантов Procridinae (принадлежность к классу сложных эфиров, образованных втор-бутиловым спиртом и высшей карбоновой кислотой с количеством атомов углерода 12 или 14), нами был осуществлен целенаправленный синтез следующих веществ:

1) втор-бутилового эфира додекановой (лауриновой) кислоты [71];

2) втор-бутилового эфира додеценовой кислоты [17, 18] и его R- и S-энантиомеров;

3) сложных эфиров втор-бутилового спирта и полиненасыщенных жирных кислот рыбьего жира (ClOil 135°) [19].

При этом мы также учитывали, что в известных половых феромонах Procridinae есть двойная связь в кислотном радикале и хиральный центр в спиртовом радикале.

Сравнительный полевой скрининг полученных соединений в природных биотопах и агробиоценозах показал, что R- и S-энантиомеры втор-бутилового эфира додеценовой кислоты (2R-2-12 и 2S-2-12 соответственно) по отдельности и/или в смеси (2R-2-12+2S-2-12) привлекают самцов почти двух десятков видов Procridinae (табл. 2). Высокая эффективность этих соединений как половых аттрактантов дала возможность обнаруживать виды с очень низкой плотностью популяций. В частности, были привлечены самцы Rhagades (Wiegelia) predotae (Naufock, 1930) в Испании [27], Rh. (Rh.) pruni в Испании и Турции [23, 27]. Кроме того, даже были открыты два новых для науки вида Jordanita (Praviela) rietzschi Keil, 2016 [69] и Goazrea lao Mollet, 2016 [24], обитающие в Иране и Лаосе, Таиланде. К сожалению, применение половых аттрактантов, привлекающих самцов, позволяет обнаружить только особей одного пола [27, 64, 72].

Анализ литературных данных и результатов наших собственных экспериментов показал, что для восприятия химической молекулы феромона/аттрактанта сенсорным аппаратом самцов Procridinae имеет значение наличие двойной связи в радикале жирной кислоты, хотя положение этой двойной связи может быть различно. Приведем несколько примеров.

1. 2R-2-12 и 2S-2-12 представляют собой сложные эфиры втор-бутилового спирта и моноеновой жирной кислоты с двенадцатью атомами углерода и двойной связью во втором положении. Похожие по строению сложные эфиры 2R-7-12 и 2S-7-12, но отличающиеся позицией двойной связи (у седьмого атома углерода), также являются половыми аттрактантами для некоторых видов Procridinae (табл. 2). В частности, и 2-12, и 7-12 привлекают самцов Illiberis (P.) pruni, Rhagades (Rh.) pruni, Adscita (Adscita) geryon (Hübner, 1813), Jordanita (Tremewania) notata (Zeller, 1847), Jordanita (Praviela) anatolica (Naufock, 1929). Вместе с тем проверка биологической активности сложного эфира втор-бутилового эфира и лауриновой (насыщенной) кислоты не выявила его аттрактивности в отношении представителей Procridinae, хотя это вещество привлекло самцов жука Tilloidea unifasciata (Fabricius, 1787) [71].

2. Половым феромоном самок Th. ampellophaga является 2R-7-14 с незначительными количествами 2S-7-14 [40]. Однако самцы этого вида демонстрируют характерное половое поведение и активно улавливаются адгезивными ловушками с искусственно синтезированными половыми аттрактантами: 2R-2-12+2S-2-12 [18, 28], 2R-2-12 [23], ClOil 135° [19]. Все сложные эфиры, как компоненты полового феромона, так и половых аттрактантов, имеют одинаковый спиртовой, но разные кислотные радикалы. Структурные вариации заключаются в длине углеводородного радикала кислоты, положении и количестве двойных связей в нем. Несмотря на это, все вышеперечисленные сложные эфиры обладают аттрактивными свойствами в отношении самцов Th. ampellophaga в отличие от втор-бутилдодеканоата.

Важно отметить, что обонятельные рецепторы самцов Procridinae проявляют разную чувствительность к оптическим изомерам аттрактивных молекул. Например, при одновременном тестировании в биотопе 2R-7-12 и 2S-7-12 самцы Adscita (Tarmannita) mannii (Lederer, 1853) преимущественно привлекаются к S-энантиомеру, тогда как самцы Jordanita (Tremewania) notata – к R-энантиомеру [67]. Более того, для самцов J. (T.) notatа присутствие 2S-7-12 в рацемической смеси 2R-7-12+2S-7-12, как и присутствие 2S-2-12 в рацемической смеси 2R-2-12+2S-2-12 не снижает аттрактивности соответствующих R-энантиомеров [21, 67]. Противоположная ситуация наблюдается у самцов Zygaenoprocris (Molletia) taftana (Alberti, 1939): 2R-7-12 активно привлекает самцов, а 2S-7-12 полностью подавляет привлекательность 2R-7-12 в равнокомпонентной смеси [65]. Частичное ингибирование действия полового  аттрактанта вследствие присутствия S‑энантиомера показано у видов Harrisina americana (Guérin-Méneville, 1844) и Acoloithus falsarius Clemens, 1861, самцы которых значительно эффективнее отлавливаются ловушками с 2R-7-14 по сравнению с таковыми с 2R-7-14+2S-7-14 [60]. Виды I. (Р.) pruni и J. (S.) subsolana привлекаются преимущественно на 2R-2-12 [23, 25, 26], в то время как виды рода Rhagades – на 2S-2-12 [26, 27].

Таким образом, к структурным особенностям, определяющим биологическую активность известных аттрактивных молекул Procridinae, можно отнести наличие двойной связи в кислотном радикале и хирального центра в спиртовом радикале сложного эфира.

Половые феромоны и аттрактанты Zygaenidae в эволюционном аспекте

В последние годы бурное развитие молекулярной биологии позволило уточнить эволюционные взаимоотношения в отряде Lepidoptera [73], которые ранее анализировались только на основе данных морфологии и биологии. Исследования большого количества ядерных и митохондриальных генов, а также строения РНК дали возможность реконструировать филогению Lepidoptera с высокой достоверностью, что было отражено и в таксономии. Мы предприняли попытку сопоставить возможный ход эволюции половых феромонов у представителей семейства Zygaenidae и некоторых филогенетически близких к нему групп на основе современных данных о систематике Lepidoptera. Как было уже сказано выше, в семействе Zygaenidae известные к настоящему времени половые феромоны и аттрактанты представлены двумя типами соединений: сложными эфирами втор-бутилового спирта и жирных кислот и сложными эфирами уксусной кислоты и жирных спиртов. Первые характерны для подсемейства Procridinae (триба Procri-dini), вторые – для подсемейства zygaeninae (триба Zygaenini). В то же время можно наблюдать структурное сходство аттрактивных молекул Zygaenidae и других Lepidoptera. Оно заключается в аналогичности строения длинноцепочечных углеводородных радикалов сложных эфиров с тем лишь отличием, что у Procridinae – это кислотный радикал, а у Zygaeninae (и многих Lepidoptera) – спиртовой. Ряд авторов объясняют химико-структурное “однообразие” сигнальных молекул Lepidoptera особенностями биосинтеза компонентов половых феромонов и работой ферментов десатураз, что в свою очередь является отражением генетически детерминированных закономерностей, связанных с общим филогенетическим происхождением [3, 74–78]. В частности, работа фермента ∆11-десатуразы в комбинации с каскадом реакций укорочения жирных кислот на два атома углерода в процессе β-окисления позволила видам производить из стеариновой (С₁₈) и пальмитиновой (С₁₆) насыщенных кислот-предшественников различные ненасыщенные жирные кислоты, альдегиды и спирты. Эти кислоты и спирты могут образовывать сложные эфиры с втор-бутиловым спиртом и уксусной кислотой соответственно. Таким образом, почти все известные сочетания компонентов половых феромонов и аттрактантов Zygaenidae легко определяются из каскада указанных превращений путем ограничения стадий укорочения цепи (рис. 1).

Рис. 1.

Возможные пути биосинтеза мононенасыщенных компонентов половых феромонов Lepidoptera. Красным цветом выделены варианты длинноцепочечных углеводородных радикалов, известных в аттрактивных молекулах Zygaenidae.

Fig. 1. Possible biosynthetic pathways of monounsaturated sex pheromone components in Lepidoptera. Long-chain hydrocarbon radicals in attractant molecules of Zygaenidae are marked by red color.

Мы проанализировали имеющиеся данные о строении половых феромонов и аттрактантов как у Zygaenoidea, так и у систематически близких надсемейств Sesioidea и Cossoidea и взятого в качестве сестринской группы надсемейства Tortricoidea. Оказалось, что сложные эфиры уксусной кислоты и жирных спиртов являются половыми феромонами и аттрактантами как у представителей семейств Sesiidae (Sesioidea) и Cossidae (Cossoidea), так и Tortricidae (Tortricoidea) (http://www.pherobase.com) [1]. Следовательно, указанная группа соединений – эволюционно более древняя, чем сложные эфиры втор-бутилового спирта и жирных кислот. Эти данные позволяют с высокой долей вероятности говорить о том, что появление сложных эфиров втор-бутилового спирта и жирных кислот в качестве половых феромонов является апоморфным признаком трибы Procridini подсемейства Procridinae (в настоящее время строение аттрактивных молекул у Procridinae известно только для представителей этой трибы [21, 25, 27, 37, 40, 65, 67]). С другой стороны, наличие сложных эфиров уксусной кислоты и жирных спиртов как половых аттрактантов – это плезиоморфный признак, который характерен для подсемейства zygaeninae (Zygaenidae), а также семейств Sesiidae, Cossidae и Tortricidae (рис. 2).

Рис. 2.

Схема, отражающая эволюцию строения половых феромонов у Zygaenidae и некоторых других семейств Lepidoptera. Красным цветом изображены кислоты, черным – спирты; длинноцепочечные углеводородные радикалы обозначены линией, короткоцепочечные – квадратом. Зеленая ветвь на дендрограмме показывает подсемейство Procridinae, у которого феромонами являются сложные эфиры втор-бутилового спирта и жирных кислот (но не уксусной кислоты и жирных спиртов, как у всех других приведенных таксонов).

Fig. 2. A scheme showing the evolution of the structure of sex pheromones in Zygaenidae and some other families of Lepidoptera. Acids are marked by red, alcohols – by black; long-chain hydrocarbon radicals are marked by lines, short-chain radicals – by squares. Green branch of the dendrogram shows the subfamily Procridinae in which pheromones represented by 2-butanol and fatty acid esters (but not acetic acid and fatty alcohol esters, as in all the above-mentioned taxa).

Внутри надсемейства Zygaenoidea в настоящее время половые феромоны и аттрактанты известны только для некоторых видов семейств Himantopteridae, Phaudidae и Limacodidae. Если у Himantopteridae это также сложные эфиры уксусной кислоты и жирных спиртов, то у Phaudidae и Limacodidae аттрактивные молекулы представлены жирными альдегидами и спиртами (http://www.pherobase.com) [1], которые по своей пространственной структуре напоминают сложные эфиры короткоцепочечных кислот и многоатомных спиртов. Иногда сходство конфигураций молекул альдегидных феромонов с длинным радикалом с эфирами жирных спиртов и, например, муравьиной кислоты, может приводить к ошибочному связыванию последних с обонятельными рецепторами самцов и вызывать у них даже более сильную физиологическую и поведенческую реакцию [79]. У некоторых видов рода Darna Walker, 1862 (Limacodidae) в качестве феромонов отмечены сложные эфиры метанола, бутанола и изобутанола (http://www.pherobase.com) [1], но производные втор-бутилового спирта отсутствуют.

Применение статистического анализа сходства и различия видов по компонентному составу половых феромонов показало таксономическую ценность этого признака для анализа филогенетических взаимоотношений и внутри семейств чешуекрылых [3, 5]. Например, было показано, что эволюция феромонных систем у видов семейства листоверток (Tortricidae) шла в направлении: 1) увеличения доли транс-изомеров веществ, 2) укорочения длины углеродной цепи с шестнадцати до двенадцати атомов [5]. У видов подсемейства Zygaeninae (семейство Zygaenidae) транс-изомеры 11E-14:Ac или 8E-12:Ac (табл. 1) появляются в качестве компонентов половых аттрактантов у видов из эволюционно более молодого подрода Zygaena (Zygaena) Fabricius, 1775. Эти виды образуют единый кластер, включающий близкие виды nevadensis-, transalpina- и filipendulae-групп [59]. В то же время самцы двух видов, принадлежащих к архаичным родам Reissita и Epizygaenella (табл. 1), чувствительны к сложным эфирам, содержащим 16-углеродный радикал с цис-изомерией (11Z-16:Ac). Хотя малая изученность феромонных/аттрактантных составов Zygaenidae осложняет анализ, тем не менее эти факты хорошо коррелируют с установленными ранее закономерностями в эволюции феромонных систем других семейств Lepidoptera.

Многие авторы склонны полагать, что химические сигналы могут играть значительную роль как в феромонной конкуренции внутри вида, так и в обеспечении репродуктивной изоляции между близкородственными таксонами и, как следствие, в видообразовании [51, 58, 80–84]. Гипотеза, подчеркивающая важность феромонной коммуникации в формировании предкопуляционных барьеров благодаря существованию видоспецифического запаха, находит подтверждение и среди Zygaenidae. Например, симпатрические популяции (в Японии, Китае, Корее) двух филогенетически близких видов одного рода и подрода Illiberis (Primilliberis) rotundata и I. (P.) pruni имеют перекрывающиеся периоды лёта. Особенности в строении гениталий этих видов не препятствуют межвидовому скрещиванию [85]. Более того, самцы обоих видов привлекаются смесью двух сложных эфиров 2R-7-12+2R-9-14 [42, 62]. Однако полевые испытания показали, что самцы I. (Р.) rotundata и I. (Р.) pruni неодинаково реагируют на разные количественные соотношения 2R-7-12 и 2R-9-14 в смесях. Определяющим является процентное содержание указанных эфиров в композиции: для самцов I. (Р.) rotundata – 30/50:100 соответственно, для самцов I. (Р.) pruni – 100:10. По нашим данным, самцы I. (Р.) pruni привлекались аттрактантом 2R‑2-12, в то время как самцы I. (Р.) rotundata не реагировали на это вещество [25]. Таким образом, видоспецифичность химического сигнала является важным изолирующим механизмом, препятствующим скрещиванию этих двух видов [86].

Все эти данные свидетельствуют о том, что молекулярная структура аттрактивных соединений может быть дополнительным признаком для анализа родственных отношений между таксонами и реконструкции эволюции Lepidoptera.