Журнал физической химии, 2020, T. 94, № 2, стр. 213-219

Кинетика окисления протокатеховой и галловой кислот кислородом воздуха в присутствии лакказы t. Versicolor

Г. А. Гамов^a, *, М. Н. Завалишин^a, А. Ю. Хохлова^a, А. В. Гашникова^a, А. Н. Киселев^b, А. В. Завьялов^a, В. В. Александрийский^a, b

^a Ивановский государственный химико-технологический университет
Иваново, Россия

^b Российская академия наук,Институт химии растворов им. Г.А. Крестова
Иваново, Россия

^* E-mail: oxt705@isuct.ru

Поступила в редакцию 19.03.2019
После доработки 19.03.2019
Принята к публикации 09.04.2019

DOI: 10.31857/S0044453720020119

Полный текст (PDF)

Аннотация

Методом электронной спектроскопии поглощения исследовано окисление 3,4‑дигидроксибензойной и 3,4,5-тригидроксибензойной кислот кислородом воздуха в присутствии лакказы T. versicolor. Молярные коэффициенты светопоглощения промежуточных и конечных продуктов, константы скорости и начальные скорости окисления определены с использованием принципа максимального правдоподобия. Рассчитаны параметры уравнения Михаэлиса−Ментен. Выделены полимерные продукты окисления, их состав исследован методами масс- и ¹³C ЯМР-спектроскопии.

Ключевые слова: лакказа T. versicolor, протокатеховая кислота, галловая кислота, окисление, уравнение Михаэлиса–Ментен

Лакказа (EC 1.10.3.2) является представителем большого семейства медь-зависимых оксидаз с низкой субстратной специфичностью. Грибки и бактерии используют этот фермент для разрушения лигнина [1–3]. С другой стороны, лакказа необходима растениям для биосинтеза лигнина из монолигнолов [4].

Способность лакказ катализировать окисление различных органических соединений (полифенолов, полиаминов и др. [2]) позволяет использовать их для очистки сточных вод от производных фенола [5, 6].

Гидроксибензойные кислоты, в том числе 3,4-дигидробензойная (протокатеховая кислота, PCA) и 3,4,5-тригидроксибензойная (галловая кислота, GA) кислоты:

являются типичными загрязнителями сточных вод пищевой промышленности [7] и производства пробковых изделий [8–10]. Для очистки вод от гидроксибензойных кислот применяются УФ-облучение с обработкой реактивом Фентона (смесь H₂O₂ и солей Fe(II) [9, 11]), некоторые микроорганизмы [8] и биокатализаторы [7]. Использование относительно дешевого фермента для окисления гидроксибензойных кислот представляется рациональным.

Продукты реакции окисления, протекающей под действием лакказы, могут представлять самостоятельный интерес. Так, в результате реакции 8-гидроксихинолина, катализируемой лакказой T. pubescens, был синтезирован ароматический полимер с антиоксидантной активностью [12]. Из галловой кислоты под действием лакказы T. versicolor был получен материал со свойствами полупроводника [13].

Кинетика окисления галловой кислоты в водных растворах лакказ была описана немногими авторами [13, 14]. Целью настоящей работы является определение констант скорости реакций окисления галловой и протокатеховой кислот (см. схему) в присутствии лакказы T. versicolor (TvL), определение параметров уравнения Михаэлиса−Ментен, синтез продуктов окисления.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Реактивы. TvL активностью >0.5 ед/мг (Германия), моногидрат GA ≥98.0% (КНР), PCA ≥97% (КНР), 2,6-диметоксифенол (DMP) ≥99.0% (Индия) использовались без дополнительной очистки. Точная концентрация гидроксибензойных кислот устанавливалась путем титрования предварительно стандартизованным свежеприготовленным раствором NaOH. Буферный раствор с pH 5.9 был приготовлен с использованием Na₂HPO₄ ⋅ 12H₂O и NaH₂PO₄ ⋅ 2H₂O (Россия). Кислотность буфера контролировалась потенциометрически. Значение pH 5.9 было выбрано, основываясь на результатах работы [15], в которой изучалась зависимость устойчивости TvL от pH и температуры. Буферные растворы насыщались воздухом перед экспериментами.

Растворы готовились на бидистиллированной воде (κ = 3.6 мкСм/см, pH 6.6). Ионная сила I = = 0.25 моль/л создавалась за счет компонентов буферного раствора.

Приборы. Спектрофотометрическое определение активности TvL по отношению к DMP, GA и PCA проводилось с помощью двухлучевого спектрофотометра Shimadzu UV1800 (США) в диапазоне длин волн 200–600 нм и оптических плотностей 0–4. Буферный раствор использовался в качестве образца сравнения. Погрешность измерения длины волны не превышала 0.5 нм, наибольшая погрешность измерения оптической плотности составляла ±0.006 ед. Температура поддерживалась на уровне 298.2 ± 0.1 K с использованием внешнего термостата. Применялись кварцевые кюветы с толщиной поглощающего слоя 1 см.

Масс-спектры (MALDI TOF) регистрировались на спектрометре Shimadzu Biotech Axima Confidence (США). В качестве матрицы для полимеризованных продуктов окисления использовался 1,8-дигидроксиантрацен-9(10H)-он. Измерения спектров ¹³C ЯМР растворов полимеризованных продуктов в D₂O (pD ~ 12) проводились с помощью спектрометра Bruker Avance III 500 NMR с рабочей частотой 125.77 МГц на ядрах ¹³C. Погрешность определения химических сдвигов при 298.0 ± 0.3 K по отношению к внешнему стандарту ГМДСО (Sigma Aldrich) оценивалась на уровне ±0.01 млн.д. Спектры регистрировались в течение 17 ч каждый.

Для отнесения сигналов PCA был зарегистрирован спектр ¹H, ¹³C HSQC.

Определение активности TvL. Спектофотометрическое определение активности лакказы было проведено аналогично описанному [13, 15, 16], однако, в качестве субстрата использовался диметоксифенол вместо ABTS. К 2.9 мл буферного раствора, содержащего DMP концентрацией 5 × × 10^–4 моль/л, добавлялось 10 мкл раствора лакказы концентрацией 10 мг/мл. После перемешивания, измерялась оптическая плотность при 470 нм (ε = 35 645 для продукта окисления DMP) [16] в течение 10 мин с шагом 10 с. Активность U (мкмоль/мин) рассчитывалась по уравнению:

(1)

$U = \frac{{\Delta A}}{{\varepsilon \tau }}.$

Рассчитанная активность лакказы во всех случаях составляла примерно 2 мкмоль/мин. Растворы TvL хранили при 5°C, поскольку лакказа наиболее устойчива при этой температуре [15]. Ее активность проверялась каждый день перед другими экспериментами с использованием свежеприготовленных растворов DMP.

Исследование окисления GA и PCA проводилось двумя способами. При низких концентрациях субстрата регистрировалось 20 электронных спектров поглощения в диапазоне длин волн 200–600 нм с задержкой между спектрами 2 мин. Это позволило идентифицировать отдельные полосы поглощения, относящиеся к продуктам, и выбрать оптимальные длины волн для второго способа. В случаях, когда концентрация субстрата была слишком высокой для записи спектра во всем диапазоне длин волн, в течение 40 мин каждые 2 мин измерялась оптическая плотность при длине волны, соответствующей максимальному светопоглощению продукта. Исследовались растворы, содержащие 50 мкл TvL активностью U в 2 ед. (см. уравнение 1), 50–2000 мкл раствора субстрата и буферный раствор, который добавлялся до общего объема смеси 2.9 мл. Конечные общие концентрации в кювете спектрофотометра составляли 10 ед. лакказы, 27–817 мкмоль/л GA и 53−1047 мкмоль/л PCA.

Полимеризация GA и PCA. Эксперимент проводился по аналогии с [12, 13]. Субстрат (GA или PCA, 0.25 г) растворяли в 5 мл ацетатного буфера (pH 5.0), а лакказу (10 ед.) растворяли в 1 мл ацетатного буфера. Растворы помещали в круглодонную колбу объемом 50 мл и добавляли 2.5 мл ацетона и 22.5 мл ацетатного буфера. Итоговый раствор перемешивали (180 об./мин) при комнатной температуре (~20°C) в течение 48 ч, пропуская через него воздух. При этом прозрачная реакционная смесь становилась темно-коричневой. Полнота протекания реакции контролировалась спектрофотометрически. После завершения реакции, воду частично отогнали и добавили в колбу ~30 мл 95% этилового спирта. После охлаждения при 5°C в течение 20 мин продукт, выпавший в осадок, был отфильтрован на стеклянном фильтре (размер пор 40 мкм), промыли 3x5 мл холодного этанола и высушили на воздухе до постоянного веса.

PCA, ¹³C ЯМР, млн.д.: 174.2 (C₇), 146.4 (C₃), 142.3 (C₄), 127.4 (C₁), 121.4 (C₆), 115.8 (C₂), 114.3 (C₅). Полимеризованный продукт окисления PCA, ¹³C ЯМР, млн.д.: 175.2, 172.5, 155.3, 146.2, 143.3, 122.3, 121.3, 114.9, 114.2, 106.2, 98.7. MS: 449 (100%), 673 (15.1%), 898 (5.9%). Полимеризованный продукт окисления GA, ¹³C ЯМР, млн.д.: 180.6, 172.5. MS: 495 (14.7%), 673 (0.2%).

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Примеры электронных спектров поглощения растворов PCA и GA во время окисления, катализируемого TvL, приведены на рис. 1а,б.

Рис. 1.

Изменения в электронных спектрах поглощения a) PCA (1.055 × 10^–4 моль/л); б) GA (1.341 × 10^–4 моль/л) в присутствии лакказы T. versicolor. Задержка между двумя спектрами составляет 2 мин. Спектры, снятые спустя сутки после начала эксперимента, показаны пунктиром. Символы $ \uparrow \downarrow $ означают, что оптическая плотность при данной длине волны сначала увеличивалась, потом уменьшалась со временем, символы $ \downarrow \uparrow $ относятся к противоположной ситуации.

Спектры исследуемых кислот при pH 5.9 удовлетворительно согласуются с литературными данными для PCA при pH 6.0 [17] и GA при pH 5.5 [18]. Максимум поглощения галловой кислоты при 260 нм был отмечен [14]. Пик продукта окисления при 455 нм (рис. 1б) также согласуется с результатами [13].

Из рис. 1 можно видеть, что окисление гидроксибензойных кислот, вероятно, является двухстадийным процессом. На первом этапе для PCA наблюдается уменьшение A₂₅₀, A₂₈₈ и увеличение A₃₉₉, в то время как светопоглощение раствора GA ослабевает при 259 нм и усиливается при 455 нм. В дальнейшем, оптическая плотность растворов PCA несколько увеличивается при 250 и 288 нм и уменьшается при 399 нм. Светопоглощение раствора галловой кислоты понижается при 300 и 455 нм. Вероятно, на первом этапе образуется хиноидная структура. Это предположение можно подтвердить тем, что образование хинонов характерно для полифенолов в присутствии лакказы [19–21]. Другим доводом является факт, что производные фенолов, не способные к образованию хиноидной структуры (например, салициловая кислота [22], метилсалицилат [22], 4-гидроксибензойная и 2,4-дигидроксибензойная кислота (наши экспериментальные данные)) не окисляются в присутствии TvL.

Для того, чтобы определить начальные скорости окисления GA и PCA, необходимо рассчитать эффективные константы скорости реакции образования интермедиата. Для этой цели целесообразно использовать метод максимального правдоподобия.

Если в растворе протекают реакции ${{A}_{1}}\xrightarrow{{k_{1}^{'}}}{{A}_{2}}\xrightarrow{{k_{2}^{'}}}{{A}_{3}}$, текущие концентрации соединений A₁–A₃ могут быть выражены следующим образом:

(2)

${{c}_{1}} = c_{1}^{0}{{e}^{{ - k_{1}^{'}\tau }}},$

(3)

${{c}_{2}} = c_{1}^{0}\frac{{k_{1}^{'}}}{{k_{2}^{'} - k_{1}^{'}}}({{e}^{{ - k_{1}^{'}\tau }}} - {{e}^{{ - k_{2}^{'}\tau }}}),$

(4)

${{c}_{3}} = c_{1}^{0}\left( {1 + \frac{{k_{1}^{'}}}{{k_{2}^{'} - k_{1}^{'}}}{{e}^{{ - k_{2}^{'}\tau }}} - \frac{{k_{2}^{'}}}{{k_{2}^{'} - k_{1}^{'}}}{{e}^{{ - k_{1}^{'}\tau }}}} \right).$

В любой момент времени и при любой выбранной длине волны, в соответствии с законом Ламберта–Бугера–Бера:

(5)

${{A}_{{{{\lambda }_{i}}}}} = ({{c}_{1}}{{\varepsilon }_{{1{{\lambda }_{i}}}}} + {{c}_{2}}{{\varepsilon }_{{2{{\lambda }_{i}}}}} + {{c}_{3}}{{\varepsilon }_{{3{{\lambda }_{i}}}}})l.$

Для совместного решения уравнений (2)–(5), т.е. нахождения величин $k_{1}^{'}$, $k_{2}^{'}$, необходимо минимизировать функцию:

(6)

$F = \sum\limits_{\tau = 0}^{\rm T} {\sum\limits_{i = 1}^\Lambda {({{A}_{{\tau {{\lambda }_{i}}}}}(\exp ) - } } {{A}_{{\tau {{\lambda }_{i}}}}}({\text{calc}}){{)}^{2}},$

где τ – время, Λ – количество длин волн.

Начальные приближенные значения $k_{1}^{'}$, $k_{2}^{'}$ подставляются в (2)–(4), что дает значения текущих концентраций. Из них, а также из экспериментально определенных значений оптической плотности при разных длинах волн, можно рассчитать величины молярных коэффициентов светопоглощения при помощи МНК. Расчетные текущие концентрации и величины ε позволяют рассчитать A_τλi(calc) по (5) и сумму квадратичных отклонений (6). Варьируя $k_{1}^{'}$, $k_{2}^{'}$, необходимо получить минимальное значение F (6).

Оптимизированные значения $k_{1}^{'}$, $k_{2}^{'}$ и ε_λi для процессов окисления PCA и GA, а также начальные скорости окисления r₁ сведены в таблицу 1. Коэффициенты поглощения PCA и GA были предварительно определены методом градуировочного графика.

Следует отметить, что молярные коэффициенты светопоглощения интермедиатов и продуктов, рассчитанные в рамках предлагаемой модели, находятся в соответствии с экспериментальными наблюдениями (рис. 1). Например, при 250 нм, значения ε для окисления PCA действительно отвечают условию ε_intermediate < ε_product < ε_reagent (рис. 1a).

Эффективные константы скорости $k_{1}^{'}$ уменьшаются с ростом общей концентрации субстрата. Произведение $k_{1}^{'}$ C⁰(substrate), представляющее собой начальную скорость окисления гидроксибензойной кислоты становится практически постоянным с увеличением C⁰(substrate), показывая, что к исследуемым системам применимо уравнение Михаэлиса–Ментен. Для нахождения его параметров могут применяться графические методы (Лайнуивера–Берка, Иди–Хофсти, Хейнса–Вульфа), а также метод максимального правдоподобия, аналогичный использованному при определении эффективных констант скорости.

В этом случае минимизационная функция имеет вид:

(7)

$F = \sum\limits_{i = 1}^M {{{{\left( {{{r}_{i}}(\exp ) - \frac{{{{V}_{{\max }}} \cdot {{C}_{i}}({\text{substrate}})}}{{{{K}_{M}} + {{C}_{i}}({\text{substrate}})}}} \right)}}^{2}}} {{w}_{i}},$

где M – число рассчитанных начальных скоростей реакции, r_i(exp) – начальная скорость реакции при i-той общей концентрации субстрата, и

(8)

${{w}_{i}} = \frac{1}{{s_{i}^{2}}}\left[ {\sum\limits_{i = 1}^M {s_{i}^{2}} {\text{/}}M} \right],$

где s_i – стандартное отклонение r_i, приведенное в таблице 1. Весовой коэффициент w_i позволяет учитывать неравноточность данных.

Таблица 1.

Параметры модели, описывающей двухстадийный процесс окисления протокатеховой (PCA) и галловой (GA) кислот в присутствии лакказы T. versicolor

C⁰ (субстрат), мкмоль/л	$k_{1}^{'}$, мин^–1	$k_{2}^{'}$, мин^–1	r₁, мкмоль/л мин	ε_reagent	ε_intermediate	ε_product
PCA
52.8	0.050 ± 0.003^a	n/d^d	2.64 ± 0.14	ε₂₅₀ = 8762 ± 126^b; ε₂₈₈ = 3942 ± ± 105^b; ε₃₉₈ = 0^b	ε₂₅₀ = 3143 ± 50^c; ε₂₈₈ = 1852 ± 16^c; ε₃₉₈ = 2129 ± 57^c	ε₂₅₀ = 6387 ± 84^c; ε₂₈₈ = 4406 ± 27^c; ε₃₉₈ = 1375 ± 95^c
105.6	0.046 ± 0.002^a	n/d^d	4.86 ± 0.22
158.4	0.040 ± 0.002^a	n/d^d	6.34 ± 0.30
261.7	0.034 ± 0.002^a	n/d^d	8.90 ± 0.60
392.6	0.024 ± 0.001^a	n/d^d	9.42 ± 0.39
523.4	0.0185 ± 0.0009^a	n/d^d	9.68 ± 0.47
785.2	0.0135 ± 0.0009^a	0.060 ± 0.003^a	10.60 ± 0.71
1046.9	0.0105 ± 0.0005^a	0.082 ± 0.005^a	10.99 ± 0.70
GA
27.2	0.070 ± 0.005^a	n/d^d	1.91 ± 0.13	ε₂₅₀ = 8831 ± 45^b; ε₄₅₅ = 0^b	ε₂₅₀ = 6926 ± 181^c; ε₄₅₅ = = 3660 ± 117^c	ε₂₅₀ = 6483 ± 106^c; ε₄₅₅ = 3220 ± 101^c
67.1	0.047 ± 0.004^a	n/d^d	3.15 ± 0.27
134.1	0.030 ± 0.002^a	n/d^d	4.02 ± 0.28
201.2	0.0235 ± 0.0025^a	n/d^d	4.73 ± 0.50
335.3	0.0145 ± 0.0005^a	n/d^d	4.86 ± 0.14
503.0	0.0095 ± 0.0005^a	0.008 ± 0.004^a	4.78 ± 0.24
670.7	0.0071 ± 0.0005^a	0.009 ± 0.005^a	4.76 ± 0.33
817.2	0.006 ± 0.0005	0.010 ± 0.008^a	4.90 ± 0.41

^a Стандартные отклонения уточненных величин;

^b Погрешности линейной регрессии (градуировочный график);

^c Погрешности линейной регрессии (МНК);

^d n/d означает, что функция (6) была нечувствительной к изменению $k_{2}^{'}$; таким образом величины $k_{2}^{'}$ было затруднительно определить.

Варьируя V_max и K_M, необходимо минимизировать функцию (7). Экспериментальные значения и расчетные кривые для разных методов приведены на рис. 2 а,б. Величины V_max и K_M, определенные по методу максимального правдоподобия, составляют 12.94 ± 0.95 мкмоль/л мин, 161.5 ± ± 24.9 мкмоль с коэффициентом парной корреляции 0.8979 для PCA; 5.28 ± 0.11 мкмоль/л мин, 42.8 ± 4.9 мкмоль с коэффициентом парной корреляции 0.7179 для GA соответственно.

Рис. 2.

Графики уравнения Михаэлиса–Ментен для реакции окисления в присутствии лакказы T. versicolor a) протокатеховой; б) галловой кислот; методы: 1 – эксперимент, 2 – Лайнуивера–Берка, 3 – Иди–Хофсти, 4 – Хейнса–Вульфа), 5 – метод максимального правдоподобия.

Галловая кислота окисляется существенно медленнее, чем PCA в тех же условиях (фосфатный буфер, pH 5.9, температура 25.0°C), несмотря на то, что эти соединения различаются одной гидроксогруппой. В настоящий момент затруднительно указать причину различия в скорости окисления. Однако, стоит отметить, что при высоких общих концентрациях GA в кювете образовывался мелкодисперсный черный осадок. Он мог адсорбировать молекулы лакказы, снижая ее активность.

Анализ масс-спектров продуктов окисления показал, что олигомер PCA состоит преимущественно из тримеров со значением m/z 449 (анионная форма). Менее интенсивные пики с величинами m/z 673 и 898, вероятно, относятся к частично разрушенным частицам (PCA)₅ и (PCA)₆.

Масс-спектр полимеризованной галловой кислоты содержит пики, относящиеся к тримеризованной форме (GA)₃ со значением m/z = 495, а также продуктам ее деструкции. Вероятно, присутствуют также следовые количества (GA)₄ с величиной m/z = 673.

Спектр ¹³C ЯМР мономера PCA обладает сходством со спектром полимеризованной формы. Резонансы олигомера, практически совпадающие с пиками PCA могут относиться к внешним ароматическим циклам, в то время как внутренние обладают несколькими новыми сигналами при 172.5, 155.3, 106.2, 98.7 м.д.

Нам не удалось обнаружить сигналы, относящиеся к карбонильной группе хиноидной структуры (~180–190 м.д.) PCA. Однако, в случае полимеризованной GA, был обнаружен сигнал δ = 180.6 м.д. Его можно отнести к фрагменту >C=O хинона.

Таким образом, в настоящей работе было исследовано окисление 3,4-дигидроксибензойной и 3,4,5-тригидроксибензойной кислот в водном растворе при pH 5.9 (фосфатный буфер) в присутствии лакказы T. versicolor. Оба соединения окисляются в две стадии. На первой, вероятно, образуются хиноидные структуры, которые в дальнейшем полимеризуются. При помощи метода максимального правдоподобия определены молярные коэффициенты светопоглощения интермедиатов и продуктов, а также константы скорости первой стадии. Рассчитаны параметры уравнения Михаэлиса–Ментен для ферментативного окисления гидроксибензойных кислот по зависимости начальной скорости реакции от концентрации субстрата. Значения V_max и K_m существенно больше в случае PCA, окисление протокатеховой кислоты протекает быстрее, чем галловой. Полимеризованнтый продукт окисления PCA состоит преимущественно из тримеров с примесями (PCA)₅ и (PCA)₆, в то время как полимеризованная галловая кислота содержит (GA)₃ со следовыми количествами (GA)₄. Спектры ¹³C ЯМР полимеризованных частиц подтверждают образование С-С-сшитых продуктов.

Работа выполнена в НИИ термодинамики и кинетики химических процессов Ивановского государственного химико-технологического университета в рамках государственного задания Министерства науки и высшего образования (проект 4.7305.2017/8.9) при поддержке Совета по грантам при Президенте Российской Федерации (проект 14.Z56.18.877-MK). Масс-спектры и спектры ¹³С ЯМР были зарегистрированы на установках, относящихся к центрам коллективного пользования ИГХТУ и ИХР РАН соответственно.

Список литературы

Abdel-Hamid A.M., Solbiati J.O., Cann I.K.O. / Insights into Lignin Degradation and its Potential Industrial Applications (в книге: Advances in Applied Microbiology / под ред. Sariaslani S., Gadd G.M.), 2013. V. 82. P. 1–28. https://doi.org/10.1016/B978-0-12-407679-2.00001-6
Chandra R.P., Ragauskas A.J. // Progr. Biotechn. 2002. V. 21. P. 165. https://doi.org/10.1016/S0921-0423(02)80018-1
Youn H.-D., Hah Y.C., Kang S.-O. // FEMS Microbiol. Let. 1995. V. 132 (3). P. 183. https://doi.org/10.1016/0378-1097(95)00315-V
Tobimatsu Y., Schuetz M. // Curr. Opin. Biotechn. 2019. V. 56. P. 75. https://doi.org/10.1016/j.copbio.2018.10.001
Arca-Ramos A., Ammann E.M., Gasser C.A. et al. // Environ. Sci. Pollut. Res. 2016. V. 23 (4). P. 3217. https://doi.org/10.1007/s11356-015-5564-6
Durán N., Esposito E. // Appl. Cat. B: Environ. 2000. V. 28 (2). P. 83. https://doi.org/10.1016/S0926-3373(00)00168-5
Das R., Hamid S.B.A., Annuar M.S.M. // Sci. Rep. 2016. V. 6. article ID 33572. https://doi.org/10.1038/srep33572
Guo D., Zhang Z., Liu D. et al. // Water Sci. Techn. 2014. V. 70 (1). P. 175. https://doi.org/10.2166/wst.2014.213
Benitez F.J., Real F.J., Acero J.L. et al. // J. Hazard. Mater. 2005. V. 126 (1–3). P. 31. https://doi.org/10.1016/j.jhazmat.2005.04.040
Martinez-Haya R., Barecka M.H., Miro P. et al. // Appl. Cat. B: Environ. 2015. V. 179. P. 433. https://doi.org/10.1016/j.apcatb.2015.05.039
Haddou M., Benoit-Marquie F., Maurette M.-T., Oliveros E. // Helv. Chim. Acta 2010. V. 93 (6). P. 1067. https://doi.org/10.1002/hlca.200900380
Ncanana S., Burton S. // J. Mol. Cat. B.: Enz. 2007. V. 44. P. 66. https://doi.org/10.1016/j.molcatb.2006.09.005
Lopez J., Hernandez-Alcantara J.M., Roquero P. et al. // J. Mol. Cat. B.: Enz. 2013. V. 97. P. 100. https://doi.org/10.1016/j.molcatb.2013.07.020
Juarez-Gomez J., Rosas-Tate E.-S., Roa-Morales G. et al. // Hindawi J. Chem. 2018. article ID 7462697. https://doi.org/10.1155/2018/7462697
Kurniawati S., Nicell J.A. // Biores. Technol. 2008. V. 99. P. 7825. https://doi.org/10.1016/j.biortech.2008.01.084
Lorenzo M., Moldes D., Rodriguez Couto S., Sanroman M.A. // Chemosph. 2005. V. 60. P. 1124. https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.2004.12.051
Borah J.M., Sarma J., Mahiuddin S. // Colloids Surf. A: Physicochem. Eng. Asp. 2011. V. 387. P. 50. https://doi.org/10.1016/j.colsurfa.2011.07.024
Martínez-Alonso A., Losada-Barreiro S., Bravo-Diaz C. // J. Mol. Liq. 2015. V. 210. P. 143. https://doi.org/10.1016/j.molliq.2014.12.016
Goncalves I., Silva C., Cavaco-Paulo A. // Green Chem. 2015. V. 17. P. 1362. https://doi.org/10.1039/c4gc02221a
Sun X., Bai R., Zhang Y. et al. // Appl. Biochem. Biotechnol. 2013. V. 171. P. 1673. https://doi.org/10.1007/s12010-013-0463-0
Cannatelli M.D., Ragauskas A.J. // J. Mol. Cat. B.: Enz. 2015. V. 119. P. 85. https://doi.org/10.1016/j.molcatb.2015.05.016
Ciecholewski S., Hammer E., Manda K. et al. // Tetrahedron 2005. V. 61. P. 4615. https://doi.org/10.1016/j.tet.2005.03.007

Дополнительные материалы отсутствуют.

Инструменты

следующая статья выпуска предыдущая статья выпуска содержание выпуска

Журнал физической химии

Архивы выпусков Информация о журнале Отправить рукопись в журнал