Растительные ресурсы, 2019, T. 55, № 2, стр. 279-283

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Материалы для исследования (соцветия и корни) заготовлены нами на стадии полного цветения растения (в начале июля 2016 г.) ниже с. Будуг Губинского р-на Азербайджанской Республики.

Работа была выполнена в научно-исследовательской и учебной лаборатории по фармации Азербайджанского медицинского университета.

Около 1.0 кг корней экстрагировали 80%-ным этанолом, упаривали до водного остатка, последовательно извлекали гексаном, хлороформом и бутанолом. Из гексанового извлечения получили вещество 1 (0.450 г), а из хлороформного – вещество 2 (0.600 г). Бутанольное извлечение упаривали, остаток подвергли кислотному гидролизу (5%-ная H₂SO₄, 5 ч) и с помощью колоночной хроматографии на силикагеле получили вещества 3 (0.300 г) и 4 (0.404 г).

Около 0.8 кг воздушно-сухих соцветий экстрагировали 80%-ным этанолом трижды, упаривали до водного остатка и последовательно обрабатывали гексаном, хлороформом и смесью гексан-этилацетатом, этилацетатом и бутанолом.

Общеизвестным методом (хлороформом) из 0.5 кг корней получили сумму алкалоидов, состоящих из четырех веществ. Одно из них составляет около 80–85% от суммы (0.306 г), которое и легко кристаллизуется из петролейного эфира (основание А).

Из гексанового извлечения выделили вещество 5 (0.207 г), из хлороформного – вещество 6 (0.510 г), из смеси гексан-этилацетатного – вещества 7 (0.210 г) и 8 (0.300 г), из этилацетатного – вещества 9 (0.401 г), 10 (0.506 г) и 11 (0.410 г). Бутанольное извлечение упаривали, остаток подвергли кислотному гидролизу (5%-ная H₂SO₄, 5 ч) и с помощью колоночной хроматографии на силикагеле элюированием хлороформом получили вещество 12 (0.620 г), а этилацетатом вещество 13 (0.707 г).

Тритерпеновые кислоты детектировали 25%-ным спиртовым раствором фосфорно-вольфрамовой кислоты на ТСХ, а моносахариды – на бумажной хроматограмме с анилинфталатным реактивом с последующим нагреванием. Ацетилирование проводили уксусным ангидридом в свежеперегнанном пиридине.

УФ-спектры снимали на приборе марки Cary 60 UV-Vis Agilent Technologies, ИК‑спектры снимали на приборе марки Agilent Cary 6000 (США). Температуру плавления определяли на приборе Stuart SMP 20, а удельное вращение на поляриметре марки Rudolf Research Analytical Autopal. Для тонкослойной хроматографии использовали готовые пластинки Merck 60 F254 и Sorbfil. Для бумажной хроматографии использовали бумагу Filtrak FN5; в качестве системы растворителей применяли БУВ 4 : 1 : 5, хлороформ–этанол 20 : 1, гексан–ацетон 4 : 1. Упаривание было проведено на роторном испарителе марки IKA RV 8.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Основание А – С₁₀Н₉NО₂, т. пл. 80–80.5 °С (петролейный эфир). На основании физико-химических свойств, хроматографических и ИК-спектроскопических данных идентифицировали как генцианин (рис. 1). Последний ранее нами был выделен из C. gigantea, C. kotschyi и C. nachiczevanica из флоры Азербайджана [6].

Рис. 1.

Генцианин.

Вещество 1 – С₂₉Н₅₀О, т. пл. 139–140 °С (этанол), –40° (с 0.25; хлороформ), т. пл. ацетата 128–130 °С (водный этанол). Реакции Либермана–Бурхарда и Салковского положительны. ИК-спектр идентичен с β-ситостерином. Вещество 1 идентифицировали как β-ситостерин.

Вещество 2 – С₃₀Н₄₈О₃, т. пл. 300–303 °С (этанол), +78° (с 1.2; пиридин), т. пл. ацетата 265–267 °С. Реакции Либермана–Бурхарда и Салковского положительны. Вещество 2 идентично с олеаноловой кислотой.

Вещество 3 – идентично с веществом 2 (олеаноловой кислотой).

Вещество 4 – С₃₀Н₄₈О₄, т. пл. 325–327 °С (этанол), +80° ± 2° (с 2.0; пиридин), т. пл. ацетата 169–170 °С. С 25%-ной фосфорно-вольфрамовой кислотой образует розовое окрашивание. ИК-спектры вещества 4 идентичны со спектрами хедерагенина (рис. 2).

Рис. 2.

Хедерагенин.

Вещество 5 – идентично веществу 1 (β-ситостерином).

Вещество 6 – идентично веществу 2 (олеаноловой кислотой).

Вещество 7 – С₁₅Н₁₀О₆, т. пл. 328–330 °С (этанол), т. пл. ацетата 224–226 °С. УФ спектр (МеОН, λ_мах, нм): 353, 265; (CH₃COONa, λ_мах, нм): 373, 270. Вещество 7 идентифицировано как лютеолин [6].

Вещество 8 – С₁₅Н₁₀О₇, т. пл. >300 °С, желтые игольчатые кристаллы, растворимы в этаноле, этилацетате и эфире, не растворимы в хлороформе и воде. УФ спектры (МеОН, λ_мах, нм): 370, 256; (CH₃COONa, λ_мах, нм): 380, 258. Вещество 8 идентифицировано как кверцетин [6].

Вещество 9 – С₂₁Н₂₀О₁₁, т. пл. 256–258 °С (этанол), –52° (с 0.5; пиридин-метанол, 4 : 2). Желтые кристаллы; растворимы в этаноле, диметилформамиде и воде; не растворимы в хлороформе. УФ спектры (МеОН, λ_мах, нм): 352, 257 (264); (CH₃COONa, λ_мах, нм): 380, 258. При кислотном гидролизе образуется лютеолин и D-глюкоза. Вещество 9 идентифицировано как цинарозид [6].

Вещество 10 – С₂₁Н₂₀О₁₂, т. пл. 254–256 °С (этанол), –5.6° (с 0.25; пиридин-метанол, 4 : 2). УФ спектры (МеОН, λ_мах, нм): 372, 256; (CH₃COONa, λ_мах, нм): 350, 256. Продукты кислотного гидролиза – кверцетин 66% и D-глюкоза. Вещество 10 идентифицировано как кверцимеритрин [7].

Вещество 11 – С₂₈Н₂₆О₁₆ ⋅ Н₂О, т. пл. 222–224 °С (этанол), –45.2° (с 0.52; диметилформамид). УФ спектры (МеОН, λ_мах, нм): 360, 260; (CH₃COONa + H₃BO₃, λ_мах, нм): 388, 266. При кислотном гидролизе (4%-ная H₂SO₄, 4 ч) образуется кверцетин (48%), L-арабиноза и D-глюкоза. Вещество 11 отождествлено как гигантозид А (кверцетин-7-О-[α-L-арабопиранозил (1 → 6)]-β-D-глюкопиранозид) [7].

Вещество 12 – С₃₀Н₄₈О₃, т. пл. 300–303 °С (этанол), +78° (с 1.2; пиридин), т. пл. ацетата 265–267 ºС. ИК-спектры вещества 12 и стандартного образца олеаноловой кислоты идентичны.

Вещество 13 – С₃₀Н₄₈О₄, т. пл. 325–327 °С (этанол), +80° (с 2.0; пиридин), т. пл. ацетата 169–170 °С. ИК-спектры вещества 13 и стандартного образца олеаноловой кислоты идентичны.

Идентификация выделенных веществ была проведена на основании спектральных, хроматографических данных, физико-химических свойств, продуктов кислотного гидролиза и литературных сведений.

ВЫВОДЫ

Таким образом, впервые из корней C. velutina Bobr., произрастающей в Азербайджане, выделен алкалоид генцианин, β-ситостерин; в свободном виде – олеаноловая кислота, после гидролиза олеаноловой кислоты и хедарегенина; из цветков – лютеолин, кверцетин, цинарозид, кверцимеритрин, гигантозид А, β-ситостерин, в свободном виде – олеаноловая кислота, после гидролиза олеаноловой кислоты и хедарегенина.