Биоорганическая химия, 2022, T. 48, № 2, стр. 207-216

ВВЕДЕНИЕ

Питание ребенка первого года жизни оказывает огромное влияние на созревание его иммунной системы, обеспечивает гармоничное физическое и психическое развитие. Женское грудное молоко признано “золотым стандартом” питания детей грудного возраста [1, 2]. При невозможности грудного вскармливания используют искусственные заменители материнского молока [2]. Основа большинства молочных смесей – коровье молоко. Начиная с первого года и в течение всей жизни, коровье молоко и производимые из него продукты составляют весомую часть пищевого рациона человека [3]. Аллергия на коровье молоко – это наиболее распространенная форма пищевой аллергии в раннем возрасте [4].

Сообщается, что в настоящее время 0.6–3.0% детей в возрасте до 6 лет, 0.3% детей старшего возраста и подростков и менее 0.5% взрослых страдают аллергией на коровье молоко. Интересно, что большинство детей с аллергией на молоко справляются, “перерастают” ее и в дальнейшем могут без вреда для здоровья потреблять молоко и молочные продукты. Однако у 15% детей аллергия на молоко сохраняется и во взрослой жизни [5].

В женском грудном молоке содержание белка составляет ~9 г/л, в то время как в коровьем – 32 г/л [2, 6]. В коровьем молоке преобладает казеиновая фракция, она составляет 76–86%, а на фракцию сывороточных белков приходится 14–24% от общего содержания белка в молоке. Иное соотношение казеиновых и сывороточных белков выявлено в женском грудном молоке, оно составляет 40 и 60% соответственно [6, 7]. Кроме того, имеются различия в соотношениях и содержании подклассов белков в составе коровьего и женского грудного молока [2]. Фракция αS1 семейства α-казеинов составляет самую большую долю в коровьем молоке. В отличие от коровьего, в женском грудном молоке преобладают β-казеины [6, 7]. Полагают, что пять IgE-связывающих эпитопов казеинов: два у αs1-казеина, один у αs2-казеина и два у κ-казеина – играют важную роль в формировании персистирующей аллергии, в связи с чем их считают основными аллергенами коровьего молока у взрослых [7].

Цель данного обзора заключается в обобщении имеющихся данных о структуре и свойствах казеиновых белков молока и определении их роли в формировании сенсибилизации к молочным продуктам.

ХАРАКТЕРИСТИКА КАЗЕИНОВ

Казеины (от лат. caseus – сыр) – основная белковая фракция молока, они составляют ~80% от содержания всех белков молока. В созданную в последние годы информационную базу аллергенов включены аллергены коровьего молока. В официальном списке Всемирной организации здравоохранения и Подкомитета по номенклатуре аллергенов Союза иммунологических обществ аллергены коровьего молока обозначаются латинским названием источника аллергена – bos domesticus (корова домашняя) [8, 9]. Согласно официальному списку аллергенов, казеины классифицируются под общим обозначением Bos d 8 [9]. Однако, несмотря на это общее название, отдельные компоненты казеинов получили различные идентифицирующие названия. Наиболее важными являются αs1- (Bos d 9), αs2- (Bos d 10), β- (Bos d 11) и κ- (Bos d 12) казеины [8], составляющие 40, 12.5, 35 и 12.5% фракции казеина в молоке соответственно. Казеины кодируются различными генами, расположенными в одной хромосоме [5]. Аллельный полиморфизм генов, кодирующих казеины молока, обусловливает их разнообразие [7]. Варианты полиморфизма представлены точечной заменой аминокислот, делецией пептидных фрагментов различного размера или посттрансляционными модификациями, такими как гликозилирование, фосфорилирование или частичный гидролиз, которые могут влиять на их свойства и аллергенный потенциал [10–12].

Казеины – фосфопротеины [7], они содержат 1–11 остатков фосфорной кислоты (органический фосфор), которые образуют сложноэфирную связь, главным образом, с гидроксигруппой серина. Содержание остатков серинфосфата в полипептидных цепях белка определяет его чувствительность к ионам кальция [6, 12–14]. По своей функции αs1-, αs2- и β-казеины – кальций-связывающие белки, κ-казеин – стабилизирующий белок [5].

Изучены физико-химические свойства и расшифрована первичная структура всех фракций казеина [11, 15]. Показано, что все казеины имеют молекулярную массу 19.0–25.2 кДа, изоэлектрическая точка (рI) 4.7. Первичная структура αs1-, αs2-, β- и κ-казеинов не имеет высокой гомологии [6, 15, 16]. Полипептидная цепь содержит большое количество пролина (17 Pro в αs1; 10 Pro в αs2; 35 Pro в β-казеине и 20 Pro в κ-казеине) [12]. Вторичные структуры, такие как α-спирали и β-листы, встречаются нечасто, что делает казеины гибкими, развернутыми или случайными спиральными пептидами, способными создавать межмолекулярные взаимодействия, например, электростатические, водородные и гидрофобные. Третичная структура – рыхлая невыраженная глобула [7, 12, 17, 18]. Четвертичная структура казеина называется мицеллой [7, 16, 17]. Она характеризуются центральным гидрофобным ядром (чувствительные к кальцию αs1-, αs2- и β-казеины) и периферическим гидрофильным слоем (κ-казеин) [11, 17].

В молоке казеины имеют выраженные кислотные свойства. Свободные карбоксильные группы аминокислот и гидроксильные группы фосфорной кислоты легко взаимодействуют не только с ионами кальция, но и другими солями щелочных и щелочноземельных металлов (Na⁺, К⁺, Mg²⁺), образуя казеинаты [14].

α-Казеин – самая крупная фракция коровьего молока, включает в себя фосфопротеины, способные осаждаться при низких концентрациях кальция [12, 14, 19].

αs1-Казеин (Bos d 9) – основная фракция казеина с молекулярной массой 23.6 кДа, содержащая 199 а.о., из которых 8.4% представлены пролином [15]. Фрагмент белка, содержащий отрицательный заряд, расположен между 41 и 80 а.о. и содержит восемь кислых фосфосеринов. Три гидрофобные области молекулы располагаются между 1–40, 90–110 и 130–199 а.о. [16, 19] (рис. 1).

Рис. 1.

Принципиальная схема линейного распределения заряженных гидрофильных и гидрофобных областей при рН 6.6 в наиболее распространенных генетических типах казеинов коровьего молока (по данным Konrad Т., 2017 [19]).

αs1-Казеин встречается в четырех модификациях (A, B, C и D), из которых наиболее распространена модификация B. Молекула представляет собой неорганизованную структуру, описываемую как “случайный клубок”, в которой имеется небольшое количество α-спиралей и β-листов, главным образом, вокруг поворотов [12, 16].

В недавних исследованиях показано, что αs1-казеины обладают свойством молекулярного шаперона. Они участвуют в сохранении и восстановлении правильной конформации некоторых внутриклеточных макромолекул в стрессовых условиях. αs1-Казеины могут стабилизировать белковые молекулы молока, в частности β-казеин и сывороточные белки, такие как β-лактоглобулин и бычий сывороточный альбумин, предотвращая их денатурацию и выпадение в осадок [12].

αs2-Казеины (Bos d 10) имеют молекулярную массу 25.2–25.4 кДа и содержат 207 а.о. Этот белок самый гидрофильный и имеет 10–13 остатков серинфосфата [15, 19]. Гидрофобные области расположены в диапазоне 90–120 и 160–207 а.о. [19] (рис. 1). Вторичная структура имеет мало α-спиралей и β-листов [12].

β-Казеин (Bos d 11) имеет молекулярную массу 24 кДа и содержит 209 а.о. Он представляет неорганизованный “случайный клубок”, в нем присутствуют струтуры β-листа и β-поворотов [12, 19]. β-Казеин – наиболее гидрофобный из всех казеинов [19, 20]. Он встречается в пяти генетических вариантах: А (A1, A2 и A3), B, C, D и E [11, 12, 21]. Бычий β-казеин обычно присутствует в виде одной формы с пятью фосфатами на остатках серина: Ser15, Ser17, Ser18, Ser19 и Ser35. Из них первые четыре образуют центр фосфорилирования [14, 20]. Только два генетических варианта данного белка (С и D), по-видимому, имеют измененные профили фосфорилирования [20]. β-Казеин имеет отрицательно заряженную гидрофильную N-концевую область (1–40 а.о.). Гидрофобные свойства белка возрастают от N- к С-концу с 136 по 209 а.о. [15, 19, 20, 22]. Вышеперечисленные свойства β-казеина, в отличие от других неструктурированных и неупорядоченных белков, при физиологических условиях и даже в кислой среде обусловливают его способность к самосборке в мицеллы. При этом гидрофобная часть молекулы β-казеина находится внутри мицеллы, а гидрофильная, в которой находится центр фосфорилирования – снаружи [19, 20, 23] (рис. 1). β-Казеин, как и αs1-казеин, обладает шаперонной активностью [12].

Ранее в качестве отдельной фракции рассматривался γ-казеин, содержание которого составляет 3% от общего количества казеина. Позже было показано, что γ-казеин идентичен С-концевой части β-казеина [22, 24]. Рядом исследователей высказано предположение, что γ-казеин – продукт деградации β-казеина, образующийся в результате трипсиноподобного протеолиза последнего [5, 22]. Показано, что β-казеин гидролизуется протеиназами молока (плазмин) в трех участках, в результате чего образуются γ1-, γ2- и γ3-казеины, протеазы и пептоны (термостабильные, растворимые в кислоте фосфопротеины) [24].

В отличие от α- и β-казеинов, κ-казеин (Bos d 12) – гликопротеид, содержащий ~5% углеводов. Молекула κ-казеина имеет молекулярную массу 19 кДа и состоит из 169 а.о. (в том числе двух остатков цистеина) и единичной фосфатной группы, связанной с серином [19]. Фрагмент 1–105 а.о. этой цепи гидрофобен и назван пара-κ-казеином. Гидрофильный С-концевой участок молекулы (гликомакропептид), 106–169 а.о., имеет отрицательный заряд при pH 6.6 и может нести тетрасахаридные цепи [15, 25, 26]. Гликозилированию подвергаются аминокислотные остатки треонина (Thr121, Thr131, Thr133, Thr135, Thr142, Thr165) и серина (Ser141) [27]. Олигосахарид на С-конце имеет отрицательно заряженную N-ацетилнейраминовую кислоту, что повышает отрицательный заряд С-концевой части данного казеина [25] (рис. 1 и 2).

Рис. 2.

Аминокислотная последовательность κ-казеина коровьего молока [8]. Красным цветом выделен фосфорилированный остататок серина, зеленым – остатки цистеина, способные образовывать дисульфидные связи, желтым – гликозилированные остатки треонина, голубым – вариантные аминокислотные остатки. Стрелкой отмечено место отщепления сычужным ферментом гликомакропептида от пара-κ-казеина.

В зависимости от степени гликозилирования в молоке могут сосуществовать несколько изоформ κ-казеина. В зависимости от количества присоединенных олигосахаридов различают 11 вариантов κ-казеина. Количество сайтов гликозилирования может варьировать от 0 до 7, поэтому в молоке существуют как негликозилированные, так и гликозилированные изоформы [5]. Пара-κ-казеин встречается в двух основных вариантах А и В [11].

κ-Казеин содержит два остатка цистеина и может образовывать дисульфидные связи (Cys11 и Cys88) [25, 28, 29]. Показано, что κ-казеин, как и другие казеины, не имеет устойчивой трехмерной структуры, что позволяет ему при различных рН менять свою конформацию [30]. По сравнению с кальций-чувствительными αs- и β-казеинами, κ‑казеин нечувствителен к относительно высокому уровню кальция [26].

СТРОЕНИЕ КАЗЕИНОВОЙ МИЦЕЛЛЫ

Казеины формируют сложные агрегаты (мицеллы) [5, 12]. Фактическая внутренняя структура казеиновой мицеллы не до конца изучена, и для ее описания были построены различные модели [5, 16, 17]. Поскольку казеин является секретом эпителиальных клеток [14], структура мицеллы представляет собой результат эволюции и играет важную биологическую роль. Фосфат кальция связывается c казеиновыми молекулами, чтобы предотвратить образование амилоидных фибрилл в ткани молочных желез. Это позволяет женщине кормить новорожденного без негативных последствий [19].

В классической теории мицелла состоит из субмицелл [7, 31]. Электронно-микроскопические методы исследования доказывают субмицеллярное строение мицелл казеина [16, 27]. Показано, что тело мицеллы состоит из дискретных блоков и имеет не совсем сферическую форму. Образование мицелл протекает поэтапно в аппарате Гольджи [31, 32]. В зависимости от типа казеина образовавшаяся полипептидная цепочка подвергается гликозилированию (т.е. осуществляется присоединение углеводов к поверхности белковой глобулы) или/и фосфорилированию [26, 31, 32].

Диаметр субмицелл составляет 12–15 нм. Белки казеина в субмицеллах ориентированы гидрофобной частью в центр мицеллы, а гидрофильной – наружу. Связи между молекулами в субмицеллах – водородные, гидрофобные и электростатические [6, 17]. Молекулы казеинов, содержащие значительное количество фосфатных эфиров, несут большой отрицательный заряд. По мере насыщения субмицелл ионами Са²⁺ и фосфатов, субмицеллы начинают сливаться, образуя мицеллы [31, 32]. Субмицеллы соединяются коллоидным фосфатом кальция, последний имеет свободную связь и может образовывать кальциевый мостик между карбоксильными и серин-фосфатными группами молекул казеина [11, 32]. При присоединении кальция к гидроксильной группе остатка фосфорной кислоты образуется казеинат-кальций-фосфатный комплекс [14, 31, 32] (рис. 3).

Рис. 3.

Казеинат-кальций-фосфатный комплекс (по данным Рогожина В.В., 2014 [32]): (а) – связывание карбоксильных групп, (б) – связывание серинфосфатных групп.

Таким образом, мицеллы казеина представляют собой упорядоченные белковые структуры, в образовании которых принимают участие ионы кальция и остатки фосфорной кислоты. При соединении кальция с остатками фосфорной кислоты формируются кальций-фосфатные мостики, связывающие между собой молекулы казеина. В образовавшийся таким образом казеин-кальций-фосфатный комплекс могут входить и некоторые другие полярные соединения (лимонная и уксусная кислоты, витамины и др.) и ионы (Na⁺, К⁺, Mg²⁺, Cl^– и др.) [27, 32].

κ-Казеин находится преимущественно на внешней стороне мицелл, что подтверждается электронной микроскопией [31]. Гидрофильная, обладающая электроотрицательным зарядом С-концевая часть большинства молекул κ-казеина торчит из мицеллы в виде гибких “волосков” [12, 22, 27]. Гидродинамическая толщина волосистого слоя составляет ~7 нм [16]. Мицеллы образуются при наличии стабилизирующего фактора (κ-казеина) и представляют собой коллоидную суспензию [33].

Образование казеиновых мицелл объясняет нанокластерная теория. Согласно данной теории, мицелла представляет собой гомогенную матрицу казеинов [11]. На однородность распределения массы внутри мицеллы казеина указывают исследования с помощью нейтронного и рентгеновского рассеяния света [12, 34]. Внутри гомогенной матрицы казеинов располагаются коллоидные нанокластеры фосфата кальция [12, 17, 31], диспергированные на очень мелкие (~2 нм) “вишневые косточки”, расстояние между которыми в среднем составляет 18.6 нм. К поверхности нанокластеров прикреплены центры фосфорилирования (3–5 соседних фосфорилированных остатков) казеинов. Данные центры сшивают белки, что приводит к образованию сетевой структуры мицеллы или матрицы [34]. Мицелла стабилизируется κ-казеином [17, 31, 34]. Известно, что отношение κ-казеина к другим компонентам казеина выше в маленьких мицеллах и ниже в больших мицеллах [35]. Агрегация мицелл предотвращается электростатическим и стерическим отталкиванием за счет κ-казеинового слоя [34].

Таким образом, несмотря на то, что третичная структура одиночной молекулы казеина представляет собой неорганизованный клубок, несколько белковых молекул казеина при ионном и гибком межмолекулярном взаимодействии образуют жесткую структуру – мицеллу, равновесие которой поддерживается благодаря наружному κ‑казеиновому слою, который препятствует дальнейшему росту мицеллы, реакции с ионами кальция и, соответственно, выпадению в осадок.

Функциональные особенности казеинов зависят напрямую от их структурной видоспецифичности и количественных соотношений в молоке. Главная физиологическая функция мицеллы казеина состоит в поставке белков, фосфатов и кальция новорожденным [16]. Кроме того, во время переваривания β-казеина и быка, и человека происходит образование β-казоморфинов, которые могут выступать лигандами к опиоидным рецепторам. В экспериментах на животных показано, что пероральное применение β-казоморфинов влияет на моторику пищеварительного тракта и проявляет анальгетический эффект [5, 21, 23, 36].

КАЗЕИНЫ ЖЕНСКОГО ГРУДНОГО МОЛОКА

κ-Казеин человека по своей структуре сходен с κ-казеином быка и, подобно последнему, располагается на поверхности мицеллы и способствует ее стабилизации [36].

κ-Казеин женского грудного молока представляет собой полипептидную цепь, состоящую из 158 а.о. Гидрофобный участок 1–93 а.о. содержит один цистеин (Cys4), что обусловливает образование димера – пара-κ-казеина. Наличие в κ-казеине быка двух остатков цистеина свидетельствует о его способности образовывать полимеры [35, 37, 38]. В κ-казеине человека углеводный компонент составляет ~55% молекулы, а в κ-казеине быка –только 5% [35, 36, 39]. Гидрофильный фрагмент 94–158 а.о. κ-казеина человека представляет собой гликомакропептид, обладающий сильной антипатогенной и бифидогенной активностью [36, 40, 41]. Кроме того, показано, что κ-казеины способны ингибировать адгезию Helicobacter pylori к клеткам слизистой оболочки желудка [36, 41].

Функциональные и структурные особенности разных типов казеинов (α-, β-, κ-), их соотношение определяют основные отличия мицеллы женского грудного молока от коровьего [25]. Как и в коровьем молоке, казеины женского молока образуют с коллоидным фосфатом кальция устойчивый казеинат-кальций-фосфатный комплекс. В основе образования мицеллы лежат агрегационные свойства β-казеина [35]. Средний размер мицелл в коровьем молоке составляет 150–180 нм, в женском – 60–80 нм [24, 30, 41, 42]. Проводимые исследования доказали, что β-казеины женского молока, имеющие меньше сайтов фосфорилирования [43], в большинстве случаев образуют полимеры меньшего размера. При увеличении групп фосфорилирования β-казеины агрегируют. Показано, что крупные мицеллы содержат наименьшее количество углеводов (~25%) в κ-казеине. Таким образом, уровень гликозилирования κ‑казеина связан с размером мицелл [25, 35].

В женском грудном молоке также содержится множество специфических минорных белков, ассоциированных с мицеллой казеина. Методом жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии в мицелле казеина идентифицированы 82 белка, 18 из которых не присутствуют в их сывороточной фракции; 32 белка, специфически связанные с мицеллой казеина, ранее не были идентифицированы в женском грудном молоке или молозиве [44].

Полученные данные позволяют по-новому взглянуть на протеомный профиль мицеллы казеина грудного молока и его физиологическое значение.

АЛЛЕРГИЯ НА БЕЛКИ КОРОВЬЕГО МОЛОКА

В связи с тем, что казеины имеют гибкую некомпактную структуру, их относят к слабым аллергенам [5]. Кроме того, они эффективно расщепляются в пищеварительном тракте. Некоторые пептидные фрагменты казеинов, присутствующие в молоке и образующиеся в результате протеолиза, представляют собой консервативные участки молекулы казеина. Именно они обусловливают аллергенность нативных белков [6]. Отсутствие четкой третичной структуры казеинов предполагает наличие преимущественно линейных эпитопов [11]. На современном этапе выявлено 33 IgE-связывающих эпитопов у казеинов: шесть у αs1-казеина, десять у αs2-казеина, девять у β-казеина и восемь у κ-казеина [5].

Из восьми основных IgE-связывающих эпитопов, обнаруженных в κ-казеине, три распознаются в 93% образцах сывороток крови пациентов с аллергией на коровье молоко, а именно IgE-связывающие области между 9–26, 21–44 и 47–68 а.о. Таким образом, область между остатками в позициях 9–68 (на N-конце) может играть важную роль в аллергенности этого белка [5].

Белки казеина, присутствующие в молоке различных видов жвачных животных, обладают высокой гомологией (>80–90%) и имеют сходные структурные, функциональные и биологические свойства [7, 11]. Например, последовательности αs1-, αs2- и β-казеинов коровы, козы и овцы имеют 87–98% гомологии [5].

Консервативные области казеинов, ответственные за IgE-перекрестную реактивность, включают участки с сериновыми остатками, по которым происходит фосфорилирование [10]. IgE-связывающие эпитопы α-казеинов недоступны, т.к. локализованы в гидрофобной области молекулы. Поэтому антигенные свойства α-казеинов проявляются только у расщепленных или денатурированных молекул. У детей с аллергией на коровье молоко выявлена сенсибилизация (93–98%) к казеину овцы и козы [5–7].

β-Казеины человека и крупного рогатого скота имеют ~50%-ную гомологию [5, 11, 45]. Bernard et al. показали перекрестную IgE-реактивность β-казеина грудного и коровьего молока [7, 45]. В исследовании Han et al. продемонстрировано существование двух потенциальных перекрестно-реактивных IgE-связывающих эпитопов κ-казеинов человека и быка [46]. Данные факты позволяют предположить возможность формирования перекрестных видов пищевой аллергии даже к такому идеальному источнику питания, как женское молоко, особенно при использовании смешанного вида вскармливания или после начала введения прикорма.

В НИИВС им. И.И. Мечникова было проведено исследование 273 сывороток детей с IgE-опосредованными аллергическими реакциями на пищевые и респираторные аллергены. Диагностическая панель включала 20 основных респираторных и пищевых аллергенов, в том числе белки коровьего молока: α-лактальбумин, β-лактоглобулин, казеин и бычий сывороточный альбумин. Сенсибилизация к белкам коровьего молока обнаружена в сыворотках 156 обследуемых детей (57.1%) [3].

Для выявления особенностей сенсибилизации к коровьему молоку дети (n = 273) были распределены по возрастным группам: 1-я группа (от 5 месяцев до 3 лет, n = 143), 2-я группа (3–6 лет, n = = 88), 3-я группа (6–16 лет, n = 42). Обнаружено, что в отличие от большинства сывороточных фракций молока (β-лактоглобулина и бычьего сывороточного альбумина), сенсибилизация к которым существенно и достоверно уменьшается с возрастом, частота сенсибилизации к казеинам достоверно не изменяется в исследуемых возрастных группах пациентов (рис. 4) [3].

Рис. 4.

Сенсибилизация к белкам коровьего молока в возрастных группах детей (n = 273): 1-я группа (от 5 месяцев до 3 лет), 2-я группа (3–6 лет), 3-я группа (6–16 лет). По оси ординат представлена процентная доля пациентов с сенсибилизацией к белку коровьего молока от общего числа пациентов с IgE-опосредованной аллергией.

Для изучения особенностей сенсибилизации к белкам молока у детей исследовали сыворотки крови 156 детей (от 5 месяцев до 16 лет), у которых была обнаружена сенсибилизация к коровьему молоку. Необходимо отметить, что большинство обследованных пациентов имели полисенсибилизацию (множественную аллергию к двум и более белкам молока). Более чем у половины обследованных детей была выявлена сенсибилизация к сывороточным белкам молока – 89 детей (57%). Одна треть пациентов проявляла повышенную чувствительность как к сывороточным, так и к казеиновым фракциям белков (53 ребенка, 34%), и лишь 14 детей (9%) – только к казеинам.

Сравнительный анализ частоты встречаемости сенсибилизации к протеиновым фракциям молока (n = 156) показал, что основная часть детей имела специфические IgE к сывороточным белкам: α-лактальбумину – 96 детей (62%) и β-лактоглобулину – 70 детей (45%). Количество сывороток со специфическими IgE к α-лактальбумину статистически значимо превышало количество сывороток со специфическими IgE к β-лактоглобулину. Сенсибилизация к казеину была обнаружена у 67 пациентов (43%) и встречалась достоверно чаще, чем к БСА – у 33 пациентов (21%), р < 0.05. Достоверной разницы в частоте выявления аллергочувствительности между β-лактоглобулином и казеином выявлено не было (р > > 0.05) [3].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящее время не существует лечения аллергии на молоко. Как только диагноз поставлен, профилактика аллергической реакции зависит в основном от элиминационных мероприятий. Тем не менее полное избегание потребления молока может вызвать снижение нутритивного статуса и повлиять на рост младенцев и детей. Преодолеть эту проблему можно с помощью оптимизации новых стратегий переработки молока с целью разрушения или модификации структуры аллергенных протеинов и, следовательно, снижения или устранения их аллергенности, а также разработки методов аллерген-специфической иммунотерапии данными аллергенами. Обнадеживает, что в пероральной иммунотерапии белками коровьего молока достигнуты определенные успехи [47, 48].