Журнал аналитической химии, 2022, T. 77, № 4, стр. 354-365

Клиническая липидология – это академическая дисциплина, которая в первую очередь ориентирована на знание патофизиологии, диагностики и клинического лечения липидных и липопротеиновых нарушений при многих патологиях, включая сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ). Установлена роль глицерофосфолипидов и сфинголипидов как факторов риска развития ССЗ и сосудистых осложнений при многих других патологиях.

Сердечно-сосудистые заболевания остаются главной причиной смертности в индустриально развитых странах. В настоящее время, несмотря на внедрение высокотехнологичных методов диагностики и лечения атеросклероза и его осложнений, резко увеличились инвалидизация и смертность населения в трудоспособном возрасте, определяемые так называемой “ранней” ишемической болезнью сердца (ИБС). Одним из самых значимых факторов риска атеросклероза является гиперхолестеринемия. При гиперхолестеринемии основой скрининга является обычный анализ липидного спектра, включающий определение уровня общего холестерина, холестерина липопротеидов низкой и высокой плотности, триглицеридов. С другой стороны, во многих ведущих клиниках мира все чаще стали определять сфинголипиды в качестве дополнительных маркеров риска сердечно-сосудистых и многих других заболеваний [1–3]. На сегодняшний день имеются результаты исследований на животных моделях, культуре тканей и у людей [4–6], которые демонстрируют возможность участия сфинголипидов в патогенезе многих ССЗ и других патологиях. Опубликованы работы, демонстрирующие значение сфинголипидов как факторов риска развития сосудистых осложнений у больных сахарным диабетом и метаболическим синдромом [7], а также при дислипидемии и повышении уровня артериального давления [4, 8, 9].

Сфинголипиды – это группа липидов, в состав которых входит молекула алифатического спирта сфингозина. К ним относятся сфингомиелины, цереброзиды, церамиды, сфингозины и сфингозин-1-фосфат (рис. 1).

Рис. 1.

Cхема фрагментации церамидов, сфингомиелинов, сфингозина, сфинганина и галактозтлцерамидов, исследуемых методом масс-спектрометрии. Стрелками обозначены сайты фрагментаций.

Установлено, что катаболизм сфинголипидов связан с катаболизмом холестерина, однако точный механизм этой связи до сих пор неизвестен. Не исключено, что первопричина накопления холестерина в условиях гиперхолестеринемии может быть связана с нарушениями в метаболизме сфингомиелина. В связи с этим более адекватная коррекция уровня холестерина может определяться нормализацией метаболизма сфинголипидов [4].

Для функции клетки чрезвычайно важны не только холестерин и сфинголипиды как отдельные представители клеточного и мембранного липидома, но и их комплексы. Они представляют динамический дуэт, который образуется в ответ на воздействия, которым подвергается клетка. Однако они могут выступать и в качестве “недружелюбных” партнеров в случае их дисбаланса в результате различных патологий сердечно-сосудистой системы и мозга [10, 11].

Как правило, в виде комплекса холестерин и сфингомиелин существуют в структурах рафтов – специфических мембранных образований, на ко-торых расположены сигнальные комплексы [11, 12]. Тесное взаимодействие между стерольным кольцом холестерина и церамидной последовательностью сфингомиелина приводит к образованию специфического домена. В этих микродоменах холестерин выполняет стабилизирующую функцию, заполняя пустоты между большим объемом сфинголипидов. Холестерин-сфингомиелиновое взаимодействие определяет переход этих доменов в жидко-упорядоченную или желеобразную фазу, что определяет уникальную характеристику рафтов. Другие же домены клеточной мембраны существуют в более дезорганизованных жидких фазах из-за отсутствия холестерин-сфингомиелинового взаимодействия. Содержание холестерина в мембране четко коррелирует с содержанием сфинголипидов [13]. При снижении уровня сфингомиелина и церамида содержание холестерина также падает. Активация сфингомиелиназы ускоряет этерификацию холестерина без увеличения пула клеточного холестерина [14]. При этом сфингозин, который является продуктом ферментативной деградации церамида, ингибирует этерификацию холестерина [15]. Не исключено, что первопричиной накопления холестерина может быть увеличение уровня сфингомиелина.

Таким образом, тестирование уровня сфинголипидов при атеросклерозе может быть таким же значимым и информативным, как и определение уровня холестерина. Применение лекарственных средств, корректирующих патологические изменения в метаболизме сфинголипидов, могут быть более эффективными, чем, например, терапия с использованием статинов. Исследования роли сфинголипидов в развитии ССЗ непременно дадут возможность обнаружить новые мишени из числа ферментов сфинголипидного метаболизма (сфингомиелиназ и церамидаз) и создать новые лекарственные препараты для предупреждения и лечения сердечно-сосудистых заболеваний.

Измерение уровня липидов, в основном общего холестерина, общих триглицеридов, липопротеинов низкой плотности и холестерина липопротеинов высокой плотности, до настоящего времени являлось обычной клинической практикой сердечно-сосудистых заболеваний и гиполипидемической терапии. Более того, детальная оценка липидного состава, т.е. молекулярных видов, которые относятся к классам липидов, практически не используется из-за сложности их диагностики. Однако установлено, что липидом человека включает тысячи единиц молекулярных разновидностей с функциональным разнообразием. Молекулярные виды липидов внутри липидных классов имеет модульную структуру, определяемую большим разнообразием жирных кислот, прикрепленных к общей основной цепи, которая определяет класс липидов. Конъюгированные жирные кислоты могут различаться по длине углеродной цепи, количеству, положению и конфигурации (цис- или транс-) их двойных связей, а также по положению и типу (ацил-, алкил- или винил-) связи с основной цепью. Учитывая все это разнообразие сфинголипидов, метод анализа должен надежно дифференцировать все липиды в соответствии с типом сфингоидного основания, жирнокислотными остатками и типом гидрофобной головы. Современная масс-спектрометрия (МС) позволяет анализировать все это разнообразие липидома человека [16–18]. Она дает возможность достаточно легко получать информацию об элементном составе липида, природе жирных кислот, наличии двойных связей. Сложнее выявить положение двойных связей и кислотных остатков в молекуле липида, включая даже дифференцирование оптических изомеров у центрального атома глицеринового остатка. Поскольку полная характеристика молекулы липида требует продвинутых методов тандемной масс-спектрометрии, зачастую полная структурная идентификация не проводится, а анализ ограничивается установлением класса липида, его молекулярной массы и природы жирнокислотных групп [17].

Наиболее популярными методами ионизации в липидомике являются электрораспыление [19], химическая ионизация при атмосферном давлении [20] и матрично активированная лазерная десорбция/ионизация (МАЛДИ) [16, 21]. Интересные результаты о структуре липидов могут быть получены и методами ионизации на открытом воздухе [22, 23]. В качестве масс-анализаторов используют устройства практически любого типа: секторные [24], квадрупольные [25, 26], времяпролетные [27, 28], ионные ловушки [25, 29–31], а также масс-спектрометры ионного циклотронного резонанса [32].

Развитие методов жидкостной хроматографии ультравысокого разрешения в комбинации с масс-спектрометрией дало толчок к изучению самых разнообразных липидных маркеров, в том числе ассоциированных с ранним развитием атеросклероза [1–4]. Фактически методы жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС), благодаря своей информативности, селективности, чувствительности, широчайшему динамическому диапазону, являются на сегодняшний день наиболее эффективными для исследования липидов всех типов, включая минорные компоненты [17, 25, 29, 30].

В настоящее время в липидомике существует два основных подхода. Первый основан на предварительном хроматографическом разделении компонентов образца, как правило, методом ЖХ, и вводе элюата в масс-спектрометр в онлайн режиме, а второй – на прямом вводе всей пробы непосредственно в ионный источник (скорострельная липидомика) [17]. Основным достоинством второго подхода является возможность получения сигнала молекулярного иона конкретного липида с постоянной интенсивностью. Это позволяет проводить любые тандемные эксперименты, необходимые для установления структурных особенностей молекулы. Тем не менее следует учитывать, что при вводе сложных смесей в источник ионизации возможна дискриминация отдельных компонентов [17].

Наиболее информативными, безусловно, являются подходы с использованием тандемной масс-спектрометрии и масс-спектрометрии высокого разрешения. Для установления структуры липидов полезными оказываются все варианты МС/МС, включая спектры ионов-продуктов, ионов-предшественников, выбросов идентичных нейтральных частиц, а также мониторинг выбранных реакций [17]. Структурная близость липидов одного типа позволяет использовать для идентификации и определения методы вычислительной липидомики. В частности, предложен вариант одновременного полуколичественного определения более 800 фосфолипидов в клеточных экстрактах [33]. На основании интенсивностей пиков биомаркеров в экспериментальных образцах можно сравнивать однотипные образцы, выявлять тонкие различия, свидетельствующие о протекании каких-либо эндогенных или экзогенных процессов, осуществлять надежную диагностику заболеваний.

Для сфинголипидов, участие которых в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний в настоящее время интенсивно изучается, возможно полное установление структуры по масс-спектрам как положительных, так и отрицательных ионов. Сфинголипиды достаточно легко ионизируются, а фрагментация ионов дает исчерпывающую информацию об углеводородном составе молекул и о типе гидрофобной части молекулы. Например, все сфинголипиды легко протонируются, а сфингозин-1-фосфаты, сфингомиелины, сульфатиды и ганглиозиды образуют также депротонированные молекулы с удобной регистрацией соответствующих отрицательных ионов. Проведение фрагментации как простых, так и сложных сфинголипидов позволяет узнать тип гидрофильной части молекулы и жирнокислотный состав. Например, сфингомиелины можно легко отличить от других классов липидов по интенсивному пику с m/z 184 в спектрах ДАС (диссоциация, активированная соударениями) их протонированных молекул. Этот пик обусловлен протонированной головной фосфохолиновой группой [17]. На рис. 1 приведена схема фрагментации изученных нами сфинголипидов. Однако, поскольку при фрагментации заряд обычно остается на гидрофильной части молекулы (как, например, в случае сфингомиелинов), для подробного исследования структуры жирных кислот, присоединенных к сфингоидному основанию, необходимо использовать тандемную масс-спектрометрию с регистрацией нескольких поколений фрагментных ионов (метод MСⁿ) [17].

В силу сложности анализируемых молекул и, как следствие, большого количества возможных осколков, образующихся при фрагментации, разработана специальная номенклатура для описания этих осколочных ионов, позволяющая определить состав исходной молекулы по “отпечаткам пальцев” [34, 35].

При исследовании молекул со сфингоидным основанием, а также сфингозин-1-фосфатов методом анализа ионов-предшественников необходимо помнить, что молекулы, содержащие четыре и более двойных связей, образуют более интенсивные ионы-продукты, чем молекулы с меньшим количеством двойных связей. Это означает, что при проведении количественного анализа необходимо использовать стандарты как для молекул без двойных связей, так и для молекул с двойными связями. Кроме того, насыщенные молекулы (например, сфинганины) образуют в условиях популярных вариантов тандемной масс-спектрометрии ДАС с высокой энергией ионы-продукты с m/z 60, которые являются более специфичными, чем обычные продукты дегидратации. Оптимизация условий ионизации и ДАС для молекул со сфингоидными основаниями приводит к надежным результатам их анализа [17]. Однако определение молекул со сфингоидным основанием методом анализа ионов-предшественников сопряжено с определенными сложностями. Во-первых, ионизация может подавляться в присутствии большого количества других молекул в экстракте. Во-вторых, необходимо учитывать влияние эффективных размеров молекулы (т.е. длины цепи и количества двойных связей) на процесс фрагментации. Ионы с меньшим количеством атомов обладают меньшим количеством степеней свободы, поэтому на каждую из них приходится большая энергия, что может приводить к дополнительной фрагментации. При тех же условиях для больших молекул на каждую степень свободы приходится меньше энергии, поэтому фрагментация проходит менее эффективно, что снижает сигнал от этих ионов. Этот эффект хорошо заметен при исследовании С2-церамидов и природных длинноцепочечных церамидов [36]. Однако в природных церамидах с длиной цепи 16–26 атомов углерода этот эффект выражен меньше.

Для определения сфинголипидов широко используются оба варианта ВЭЖХ-анализа: с обращенной фазой (для отделения сфингозина от сфинганина) и с нормальной фазой (для отделения церамидов от сфингомиелинов). Использование хроматографии не всегда эффективно, поскольку, например, сфингозин и сфинганин можно разделить и в условиях прямого ввода образца. Однако если в биологическом образце содержится большое количество сфингозина, то он затрудняет количественное определение сфинганина и требует предварительного хроматографического разделения. Тем не менее есть работы, в которых сфинголипиды эффективно анализируются методом прямого ввода [34, 37]. Преимуществом такого подхода является значительное уменьшение продолжительности анализа одного образца.

Цель настоящего исследования – изучение особенности спектра сфинголипидов у больных, имеющих различную клиническую вероятность семейной гиперлипидемии. Для этого изучали полученные методом ЖХ-МС качественные и количественные характеристики сфинголипидов в образцах крови больных с рядом ССЗ, в частности, семейной гиперхолестеренемии (СГЛ). Следует подчеркнуть, что прогностическая значимость церамидов уже оценивалась в зарубежных исследованиях, однако уровень церамидов определялся у больных с острым коронарным синдромом [2]. В то же время особенности сфинголипидома у больных с наследственными дислипидемиями пока не изучены.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Состав пациентов с наследственными формами раннего атеросклероза. Изучали изменения в уровне ряда сфинголипидов, претендующих на роль маркеров ССЗ (молекулярных форм сфингомиелинов, церамидов, гексозиллцерамида, сфингозина и сфинганина), в плазме крови пациентов с наследственными формами раннего атеросклероза. Группа включала n = 52 человека. Данная группа состояла из пациентов с острой манифестацией атеросклероза, которая завершается инфарктом или инсультом (острый коронарный синдром (ОКС), n = 6); с острым нарушением мозгового кровообращения, атеротромботический вариант (ОНМК, n = 9); постинфарктного кардиосклероза (ПИКС, n = 8), а также из больных с дислипидемией, которая характеризуется либо повышением уровней холестерина и/или триглицеридов, либо снижением уровня холестерина липопротеидов высокой плотности (ЛВП) в плазме, что способствует развитию атеросклероза (n = 28), и одного пациента с периферическим атеросклерозом. Среди перечисленных больных особую группу составляли пациенты с различной клинической вероятностью семейной гиперлипидемии. В эту группу входило 35 больных (15 мужчин (42.9%) и 20 женщин (57.1%), средний возраст 49.8 ± ± 9.96 лет) с дислипидемией или ранними сердечно-сосудистыми заболеваниями, развившимися в возрасте до 55 лет у мужчин и до 60 лет у женщин. Клиническую вероятность семейной дислипидемии оценивали по критериям сети Голландских липидных клиник. Десять больных имели низкую вероятность СГЛ (1–2 балла), у 22 больных диагноз расценивался как вероятная СГЛ (3–5 баллов), у трех больных – возможная или определенная СГЛ (два больных 6 баллов и один больной 9 баллов).

Определяли параметры со следующими референсными значениями: общий холестерин (2.0–5.2 ммоль/л), холестерин липопротеинов низкой плотности (ЛНП) (до 3.3 ммоль/л), липопротеинов высокой плотности (0.91–1.56 ммоль/л), триглицеридов сыворотки крови (0.50–1.70 ммоль/л) на биохимическом анализаторе CLIMA MC-15 (RAL, Испания).

Методы определения сфинголипидов. Липиды из плазмы выделяли по методу Блайя–Дайера.

Масс-спектрометрия. Масс-спектрометрическую идентификацию и определение молекулярных видов сфингомиелинов, церамидов и сфингоидных оснований (сфингозина и сфинганина) проводили на масс-спектрометре TSQ Endura (Thermo Fisher Scientific, Германия) в режиме мониторинга множественных реакций (ММР). На рис. 1 представлена схема фрагментации сфинголипидов, исследуемых методом МС. Для церамидов фрагментацию исходных протонированных и дегидратированных молекул проводили при энергии 20 эВ с образованием фрагмента с m/z 264.2 Да, время измерения сигнала составляло 30 мс. Для сфингомиелинов при энергии 20 эВ в качестве иона продукта выбрали фрагментный ион с m/z 184.1 Да, время измерения сигнала составляло 30 мс. Для сфингозина фрагментацию протонированных молекул проводили при энергии 12.5 эВ с образованием ионов-продуктов с m/z 252.2 Да, время измерения сигнала составляло 30 мс. Для сфинганина при энергии 12.5 эВ с образованием иона-продукта с m/z 266.2 Да время измерения сигнала составляло 30 мс.

Концентрации сфингомиелинов, церамидов и сфингоидных оснований определяли методом внешнего стандарта. В качестве стандартов использовали сингозин d7, сфинганин, сфингомиелин d18:1/16:0, сфингомиелин d18:1/18:0, церамид d18:1/16:0, церамид d18:1/18:1, церамид d18:1/18:0, церамид d18:1/24:1, церамид d18:1/24:0 фирмы “Avanti” (США). Для определения церамидов использовали площади пиков ММР-переходов [М + Н–Н₂О]⁺· → 264.2 Да, для сфингомиелинов [M + H]⁺· → 184.1 Да, для сфингозина 300.2 → 252.2 Да, для сфинганина 302.2 → → 266.2 Да.

Хроматографическое разделение проводили с использованием системы Ultimate 3000 (Thermo Fisher Scientific, Германия) на колонке Eclipse Plus C8 3.0 × 150 мм (Agilent, США), размер частиц 3,5 мкм. При определении церамидов и сфингомиелинов колонку термостатировали при 35°C, поток – 500 мкл/мин; использовали следующие подвижные фазы: фаза А – 1 мМ раствор формиата аммония в воде + 0.1% (по объему) муравьиной кислоты, фаза Б – 1 мМ раствор формиата аммония в метаноле + 0.1% (по объему) муравьиной кислоты (с 0 до 14 мин градиент фазы Б от 75 до 100%, с 14 по 24 мин 100% фазы Б, с 24 до 26 мин градиент фазы Б от 100 до 75%, с 26 по 30 мин 75% фазы Б). Параметры источника ионизации и квадруполей: температура нагревателя 350°С, температура капилляра 300°С, поток распыляющего газа 50 arb (приборные единицы), поток вспомогательного газа 15 arb, поток обдувочного газа 2 arb, напряжение на капилляре 3.5 кВ, разрешение квадруполей Q1/Q3 1.2/1.2 Да, давление газа в ячейке соударений 2 мТорр.

При определении сфинганина и сфингозина колонку термостатировали при 50°C, поток – 400 мкл/мин; использовали следующие подвижные фазы: фаза А – вода + 0.1% (по объему) муравьиной кислоты, фаза Б – метанол + 0.1% (по объему) муравьиной кислоты (с 0 до 0.7 мин 55% фазы Б, с 0.7 до 6.7 мин градиент фазы Б от 55 до 100%, с 6.7 до 18 мин 100% фазы Б, с 18 до 20 мин градиент фазы Б от 100 до 55%, с 20 по 25 мин 55% фазы Б). Параметры источника ионизации и квадруполей: температура нагревателя 340°C, температура капилляра 300°C, поток распыляющего газа 45 arb, поток вспомогательного газа 13 arb, поток обдувочного газа 2 arb, напряжение на капилляре 3.5 кВ, разрешение квадруполей Q1/Q3 1.2/1.2 Да, давление газа в ячейке соударений 2 мТорр.

На рис. 2 приведены примеры масс-хроматограмм, полученных при определении сфингозина, сфинганина и молекулярных видов сфингомиелинов и церамидов.

Рис. 2.

Масс-хроматограммы сфингозина, сфинганина, сфингомиелина, церамида и соответствующих стандартов.

Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета программ SPSS версия 23.0. Количественные переменные представлены в виде SE ± SD. Для всех количественных переменных выполняли проверку на соответствие нормальному распределению с использованием теста Шапиро-Уилкса. Распределение всех количественных переменных отличалось от нормального. Достоверность различий оценивали для двух независимых выборок по критерию Манн-Уитни, для трех и более – по критерию Крускал–Уолли.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Измерение клинических параметров. У всех групп больных измеряли уровни холестерина и триглицеридов, которые в настоящее время рассматриваются в качестве основных маркеров атеросклероза. Наблюдали резкие колебания уровней этих липидов в крови индивидуальных пациентов с различными видами осложнений атеросклероза. Значения холестерина изменяются от 3.5 до ~20 единиц. Эти колебания могут отражаться на содержании отдельных классов сфинголипидов.

Определение молекулярных видов сфингомиелинов. Рис. 3 иллюстрирует различия в содержании молекулярных видов сфингомиелинов при разнообразных осложнениях ранней клинической манифестации атеросклероза, включая дислипидемию, острый коронарный синдром, острое нарушение мозгового кровообращения и периферический атеросклероз. Определили уровни содержаний сфингомиелинов с длинами цепей жирных кислот от С16 до С24 с насыщенными и одной двойной связью. Более высокие уровни сфингмиелинов с жирными кислотами С16:0, С18:0 и С20:0 зарегистрированы в плазме пациентов с диагнозами дислипидемия, ОКС и ОНМК. Во всех случаях сердечно-сосудистых патологий отмечено низкое содержание сфингомиелинов С24:0 и С24:1.

Рис. 3.

Различия в уровнях молекулярных видов сфингомиелинов при разнообразных осложнениях ранней клинической манифестации атеросклероза.

Определение молекулярных видов церамидов. В отличие от сфингомиелинов, длинноцепочечные церамиды (С24:0 и С24:1) в образцах плазмы пациентов присутствуют в значительно большем количестве по сравнению с короткоцепочечными церамидами (рис. 4). Можно предположить, что в случае развития атеросклероза проапоптотические церамиды генерируются именно из молекул cфинголипидов, содержащих длинные углеродные цепи. Известно [15], что окислительный стресс ассоциирован именно с увеличением уровня длинноцепочечных церамидов. Выявлены прямые корреляции уровня холестерина крови и церамидов С24:0 и С24:1. Уровни гексозилцерамидов практически одинаковы для всех типов ССЗ (рис. 5).

Рис. 4.

Различия в уровнях молекулярных видов церамидов при разнообразных осложнениях ранней клинической манифестации атеросклероза.

Рис. 5.

Различия в уровнях гексозилцерамидов при разнообразных осложнениях ранней клинической манифестации атеросклероза.

Установлено, что содержание общих сфинголипидов и церамидов в окисленных ЛНП существенно выше, что может служить подтверждением роли сфинголипидов в дестабилизации атеросклеротической бляшки и формировании обострения ИБС и других заболеваний [10].

Определение сфингозина и сфинганина. Наблюдаемая динамика сфингозина при разных осложнениях атеросклероза может свидетельствовать о его активном участии в течении этих заболеваний. Больные с отягощенным семейным анамнезом имели более высокий уровень сфингозина, однако уровень сфинганина при этом был очень низким и практически одинаковым при всех типах ССЗ. Вероятно, эти липиды не участвуют в исследуемом патологическом процессе (рис. 6). Установили связь накопления сфингозина со степенью клинической вероятности семейной гиперлипидемии, т.е. тяжестью заболевания. Как видно из табл. 1, уровень сфингозина у пациентов с отягощенным семейным анамнезом атеросклероза повышен. Участие сфингозина в патогенезе ССЗ установлено нами впервые; повышение его уровня в плазме пациентов с наследственными формами дислипидемии может быть использовано в качестве маркера риска развития ИБС у таких пациентов. Табл. 1 также демонстрирует корреляции между уровнем классических липидов и сфингозина у пациентов с отягощенными и неотягощенными семейными анамнезами. Обращает на себя внимание тот факт, что прямая корреляция между уровнем холестерина ЛНП и сфингозина, выявленная в целом по группе, сильнее проявляется у пациентов с отягощенным семейным анамнезом (r = 0.536, p = 0.022). Накопление сфингозина может отражать его способность активировать процессы пероксидного окисления [38] и агрегации Cu²⁺-пероксидных везикул, ускоряя процессы окисления ЛНП, делая их более атерогенными. Сфинганин также активирует процессы пероксидного окисления [38]. В нашем исследовании у пациентов с установленной семейной дислипидемией отмечали существенное повышение уровня сфингозина. Уровень сфинганина у пациентов с низкой и высокой вероятностью семейной гиперлипидемии достоверно не отличался. Таким образом, сфингозин может участвовать в патогенезе семейной дислипидемии и служить новым маркером сердечно-сосудистых заболеваний.

Рис. 6.

Различия в уровнях сфингоидных оснований (сфингозина и сфинганина) при разнообразных осложнениях ранней клинической манифестации атеросклероза.

Таблица 1.  

Уровень липидов и сфингоидных оснований у пациентов с различной клинической вероятностью семейной гиперлипидемии

Параметр	Низкая вероятность СГХС (n = 10)	Возможная вероятность СГХС (n = 22)	Вероятная/ определенная СГХС (n = 3)	p
ОХС, мМ	6.7 ± 0.6	8.0 ± 1.7	12.00 ± 5.3	0.006
ЛНП, мМ	4.3 ± 0.4	5.4 ± 1.0	7.2 ± 1.4	0.001
ЛВП, мМ	1.5 ± 0.4	1.4 ± 0.4	1.2 ± 0.6	0.713
ТГ, мМ	1.8 ± 1.1	2.4 ± 3.2	5.8 ± 6.1	0.240
Сфингозин, нг/мл	50.1 ± 62.4	83.6 ± 70.8	144.4 ± 107.9	0.051 0.010
Сфинганин, нг/мл	0.8 ± 0.4	0.9 ± 0.6	1.7 ± 1.4	0.142

Примечание: СГХС – семейная гиперхолестеринемия, ОХС – общий холестерин, ЛНП – липопротеиды низкой плотности, ЛВП – липопротеиды высокой плотности, ТГ – триглицериды.