Растительные ресурсы, 2022, T. 58, № 2, стр. 176-178

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Объектами исследования явились корни двух видов из рода кермек: Limonium caspium и L. suffruticosum, имеющих значительные природные запасы в Азербайджане.

Заготовку сырья (корней) L. suffruticosum проводили в окрестностях г. Имишли в сентябре 2018 г., L. caspium – в окрестностях г. Сиязань в конце октября 2019 г.

Около 2.0 кг измельченных и высушенных корней L. suffruticosum экстрагировали этанолом, упаривали до 150–200 мл, смешивали с 200 мл воды, обработали последовательно хлороформом, смесью этилацетат–гексан (в соотношении 1 : 1.2–1.3), этилацетатом и н-бутанолом. Из извлечения смесью гексан–этилацетат получили вещество 1 (0.4 г), из этилацетатного извлечения – вещество 2 (0.44 г). Бутанольное извлечение после упаривания обрабатывали горячим ацетоном; после отделения ацетоновой части извлечения и удаления ацетона, с помощью кристаллизации из этанола получили вещество 3 (0.22 г) и смесь флавоноидов состоящих из двух веществ. Смесь флавоноидов подвергали гидролизу (5% H₂SO₄, 4 ч): в качестве продукта гидролиза выделили агликон (вещество 4), идентифицированный с кверцетином.

Около 1.0 кг воздушно-сухих и измельченных корней L. caspium экстрагировали с 80%-ным этанолом при комнатной температуре трижды, каждый раз применяли новую порцию экстрагента. Экстракты объединяли, упаривали до водного остатка (200 мл), последовательно извлекали хлороформом (600 мл) и смесью этилацетат–гексан (в соотношении 1 : 1.2–1.3) (3 л). Водный слой тщательно экстрагировали этилацетатом (1 л) и оставляли на двое суток. Образованные на стенке делительной воронке и на границе растворителей желтые кристаллы отделили, промыли водой и этанолом. При необходимости операцию повторяли. Из извлечения смесью этилацетат–гексан получили вещество 1 (1.63 г), из делительной воронки – вещество 2 (1.82 г).

ЯМР-спектры веществ регистрировали на приборе марки Bruker 600MHs (Германия), хромато-масс-спектральный анализ – на приборе UHPLC Dionex 3000 с Bruker Impact II (Германия), УФ-спектры – на приборе Agilent Cary 60 UV-Vis Agilent Technologies (США), ИК-спектры – на приборе Agilent Cary 600 FTIR (США), который позволяет использовать образцы в порошкообразном виде, без дополнительной подготовки проб. Температуру плавления определяли на приборе Stuart SMP 20, удельное вращение – Rudolf Research Analytical Autopal. Для бумажной хроматографии использовали бумагу Filtrak FN11, в качестве системы растворителей применяли бутанол–уксусная кислота–вода (4 : 1 : 5). Упаривание проводили на роторном испарителе марки IKA RV 8.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты исследования компонентного состава корней L. suffruticosum L. показали следующее.

Вещество 1 – C₁₅H₁₀O₈, т. пл. 340–352 °С (этанол), УФ-спектр ($\lambda _{{\max }}^{{C{{H}_{3}}OH}}$, нм): 255, 380. В УФ-свете на хроматограмме имеет желтую флуоресценцию. МСВР: экспер. m/z 317.0303 [M-H]^– (вычисл. для ${{{\text{C}}}_{{15}}}{{{\text{H}}}_{{10}}}{\text{O}}_{8}^{ - }$: 317.0292) и экспер. m/z 319.0451 [M + H]⁺ (вычисл. для ${{{\text{C}}}_{{15}}}{{{\text{H}}}_{{10}}}{\text{O}}_{8}^{ + }$: 319.0448). ИК-спектр (KBr, ν, см^–1): 3380–3300, 1640, 1560, 1516, 1377. Согласно данным УФ- и ИК-спектров вещество идентифицировано как мирицетин [7].

Вещество 2 – т. пл. 352–354 °С (этанол), $\left[ \alpha \right]_{D}^{{20}}$-124° (с 0.5; этанол), УФ-спектры ($\lambda _{{\max }}^{{C{{H}_{3}}OH}}$, нм): 257, 303, 355. При кислотном гидролизе (5% H₂SO₄, 3.5 ч) получили мирицетин (63%) и обнаружили L-рамнозу. Вещество 2 идентифицировано как мирицитрин [8].

Вещество 3 – C₁₅H₁₀O₁₁S, МСВР: экспер. m/z 396.9871 [M-H]^– (вычисл. для C₁₅H₁₀O₁₁S^–: 396.9860) и экспер. m/z 399.0004 [M + H]⁺ (вычисл. для C₁₅H₁₀O₁₁S⁺: 399.0017). Наилучшая фрагментация МС2 получена в отрицательном режиме при 40 эВ. Полученные фрагменты: m/z 151.0073 (100), 179.0026 (60), 137.0280 (54), 317.0354 (45). Фрагмент m/z 317.0354 соответствует потере сульфатной группы.

ЯМР ¹Н (600 МГц, DMSO-d6, δ, м.д., J/Гц): 6.19 (1H, д, J = 1.6, H-6), 6.41 (1H, д, J = 1.6, H-8), 7.51 (1H, д, J = 1.6, H-2'), 7.54 (1H, д, J = 1.6, H-6'), 9.42 (1H, с, 3-OH), 12.43 (1H, с, 5-OH), 10.80 (1H, с, 7-OH), 9.28 (1H, с, 4'-OH), 9.14 (1H, с, 5'-OH). ЯМР ¹³С (600 МГц, DMSO-d6, δ, м.д.): 146.2 (С-2), 136.1 (С-3), 175.9 (С-4), 160.7 (С-5), 98.3 (С-6), 164.0 (С-7), 93.4 (С-8), 156.1 (С-9), 103.1 (С-10), 121.1 (С-1'), 111.6 (С-2'), 146.6 (С-3'), 140.2 (С-4'), 141.3 (С-5'), 114.6 (С-6').

Данные ЯМР и МС спектров соответствуют мирицетин-3'-О-сульфату [6].

Вещество 4 – C₁₅H₁₀O₇, т.пл. 310–312 °С (этанол), УФ-спектры ($\lambda _{{\max }}^{{C{{H}_{3}}OH}}$, нм): 375, 256. В УФ-свете на хроматограмме имеет желтую флуоресценцию. Вещество 4 идентифицировали как кверцетин.

Флавоноидный состав L.caspium Willd: вещество 1 – идентифицировали как мирицетин, а вещество 2 – как мирицетин-3'-О-сульфат. При идентификации мирицетина и мирицетин-3'-О-сульфата использовали достоверные образцы. R_f 0.60 (мирицетин) и 0.30 (мирицетин-3'-О-сульфат).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Изучен флавоноидный состав корней двух видов растений рода Limonium: L. caspium (Willd.) P. Fourn. и L. suffruticosum (L.) Kuntze., произрастающих в Азербайджане. Исследование показало, что корни содержат флавоноиды мирицетин, мирицитрин, мирицетин-3'-О-сульфат, после гидролиза – кверцетин (в качестве агликона). Таким образом, сырье является перспективным источником биологически активных веществ. Из корней L. suffruticosum – мирицетин, мирицитрин, мирицетин-3'-О-сульфат, а из корней L. caspium – мирицетин и мирицетин-3'-О-сульфат выделены впервые.