1. На главную
  2. Электронные версии
  3. Биоорганическая химия
  4. T. 45, № 6, 2019

Биоорганическая химия, 2019, T. 45, № 6, стр. 658-663

Синтез и цитотоксичность C3- и C28-модифицированных тритерпеновых кислот

Э. Ф. Хуснутдинова 1, *, А. В. Петрова 1, О. Б. Казакова 1, А. Е. Бармашов 2

1 Уфимский Институт химии Уфимского федерального исследовательского центра Российской академии наук
450054 Уфа, просп. Октября, 71, Россия

2 ФГБУ “Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина” Минздрава России
115478 Москва, Каширское шоссе, 24, Россия

* E-mail: ElmaH@inbox.ru

Поступила в редакцию 10.04.2019
После доработки 22.04.2019
Принята к публикации 08.05.2019

Полный текст (PDF)

Аннотация

Осуществлен синтез и скрининг противоопухолевой активности in vitro (цитотоксичности) серии N-, S- и Br-производных бетулиновой, олеаноловой и урсоловой кислот. Значимую цитотоксическую активность проявили N-метилпиперазиниламид 2-(3-пиридинилидено)урсоновой кислоты в отношении раковых клеток PC3 (IC50 = 8 мкМ) и метил-2-метилиденуреидобетулонат в отношении линии HCT-116 (IC50 = 5.7 мкМ).

Ключевые слова: тритерпеноиды, олеаноловая кислота, урсоловая кислота, бетулиновая кислота, синтез, цитотоксичность

ВВЕДЕНИЕ

Разработка новых фармакологических агентов на основе доступных тритерпеноидов, активных по отношению к широкому спектру опухолевых клеточных линий, является актуальным направлением. За последнее время получены полусинтетические тритерпеноиды, модифицированные по положениям остова С2, С3, С20 и С28, проявляющие высокую цитотоксическую активность в отношении раковых клеток [1, 2]. Так, для 2,3-секолупановых β-кетоэфиров значения IC50 в отношении линий HCT 116, MS, RD и TE32 раковых клеток составляли от 3.07 до 3.61 мкM [3], значения цитотоксичности для карбоксамидов урсоловой кислоты с фрагментами N-замещенных этиламинов составили меньше 1 мкM [4], выявлена высокая селективная цитотоксичность в отношении Т-лимфобластной лейкемии С30-гидразонов бетулиновой кислоты [5]. В недавних работах нами обнаружена цитотоксичность у производных тритерпеноидов с индоло- [6, 7], аминопропокси- [8], 1,2,3-триоксалановым [9] и пропаргиламиноалкильным [10, 11] фрагментами. Продолжая исследования в этой области, в настоящей работе изучена цитотоксичность группы N-, S- и Br-содержащих производных тритерпеновых кислот ряда лупана, олеанана и урсана.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Для скрининга использовали новые ((III) и (IV), схема 1) и синтезированные ранее ((I), (II), (V)‒(XIII), рис. 1) модифицированные тритерпеноиды. Учитывая, что введение аминокислотных остатков в молекулу тритерпеноидов может увеличивать их биодоступность [12], хлорангидридным методом из 2,3-индолобетулиновой кислоты (I) взаимодействием с метиловым эфиром L-фенилаланина и последующим деблокированием метоксильной защитной группы синтезирован С28-конъюгат (II) c выходом 75%. Учитывая актуальность введения фрагмента N-метилпиперазина, а также повышение противоопухолевой активности с введением ароматических фрагментов в положение С2 [13], мы осуществили модификацию урсоновой кислоты (схема 1). По реакции Кляйзена-Шмидта взаимодействием N-метилпиперазиниламида урсоновой кислоты (III) с 3-пиридинкарбальдегидом синтезировали N-метилпиперазиниламид 2-(3-пиридинилидено)урсоновой кислоты (IV) с выходом 80%.

Схема 1. Условия: i − a) (COCl)2, Et3N, CH2Cl2, 20°C, 2 ч; b) PheOMe · HCl, Et3N, CH2Cl2, ∆, 3 ч; c) 4 М NaOH, CH3OH-THF (1 : 1), 20°C, 6 ч. ii − a) C5H4N-m-CHO, 40% KOH, EtOH, rt, 8 ч.

Строение соединений (II) и (IV) установлено с использованием физико-химических методов анализа. Для соединения (II) наблюдались характерные сигналы атомов углерода и протонов амидной группы при δ 176 м.д. (13С-ЯМР) и δ 5.92 м.д. (1Н-ЯМР), атомов углерода и протонов ароматического фрагмента в области δ 110.3‒128.3 м.д. (13С-ЯМР) и δ 7.04–7.38 м.д. (1Н ЯМР). В спектрах 13С-ЯМР соединения (IV) наблюдался сдвиг сигнала карбонильной группы С3 в область сильного поля до δ 207 м.д., а в спектрах 1Н-ЯМР сигнал винильного протона проявляется при δ 7.35 в виде синглета. Сигналы фрагмента N-метилпиперазина обнаруживались в виде синглета протонов метильной группы в области δ 2.21–2.27 м.д. и метиленовых групп – в виде мультиплета в области δ 2.38–2.71 м.д.

На рис. 1 представлены структуры соединений, которые были синтезированы ранее: 2,3-индоло-производные ряда лупана (I) и (V), урсана (VI) и олеанана (VII), С2-метилиденуреиды метилбетулоната (VIII) и (IX), С28-йодофенилгидразидогидразон бетулоновой кислоты (X), бисфталилоксибетулин (XI) и фталилоксибетулиновая кислота (XII), 20-оксо-30-бром-29-нор-3,28-диацетоксибетулин (XIII).

Экспериментальное исследование противоопухолевой активности in vitro, или цитотоксичности, производных тритерпеноидов (I), (II), (IV)–(XIII) проведено с использованием МТТ-теста на клетках Т-клеточного лимфобластного лейкоза Jurkat, карциномы простаты РС-3, карциномы легкого А549, карциномы толстой кишки HCT-116, аденокарциномы молочной железы MCF-7, нейробластомы SH-SY5Y и меланомы человека линии MeWo [14].

Первоначально была определена доля погибших клеток (C, %), характеризующая цитотоксичность, при концентрации 100 мкМ (табл. 1). Соединение считали цитотоксичным, если оно вызывало гибель 50% клеток или выше хотя бы на одной клеточной линии при концентрации 100 мкМ [15]. В результате обнаружена цитотоксическая активность у десяти соединений: (I), (II), (IV), (VI)‒(IX), (XI)–(XIII). Для данных соединений изучили цитотоксичность при концентрациях 100, 10 и 1 мкМ для определения IC50 (концентрация вещества, вызывающая гибель 50% клеток).

Таблица 1.  

Противоопухолевая активность in vitro* соединений (I), (II), (IV)–(XIII)

Соеди-нение Тип клеточной линии
A549 PC3 Jurkat HCT-116 MCF-7
C, % IС50 C, % IС50 C, % IС50 C, % IС50 C, % IС50
I 88 31.5 85 25 91 26 84 46.1 89 35
II 90 60 91 43.1 92 19.5 92 32.5 91 16
IV 92 8.7 91 8 93 22.5 88 36.5 92 17.8
V 21 – 21 – 38 – 26 – 43 –
VI 70 68 58 72.2 83 36.8 69 36.5 60 75.6
VII 89 56.6 87 53.6 90 30.8 85 53.8 56 84
VIII 91 47.2 90 42.9 93 28.2 89 60.5 92 52.8
IX 92 52.8 89 18.2 92 48.1 91 5.7 89 46.8
X 5 – 25 – 48 – 8 – 31 –
XI 81 65.5 86 62.3 90 58.5 87 61.2 87 53
XII 84 56.2 85 50.9 92 49 84 19.5 85 59
XIII 75 70 68 76 68 9.8 71 73.4 74 69

*  C – цитотоксическая активность исследуемых соединений в концентрации 100 мкМ (доля погибших клеток, %); IC50 – цитотоксическая концентрация вещества, вызывающая гибель 50% клеток (при концентрации ≤100 мкМ).

Наиболее выраженную цитотоксичность проявили соединения (IV) (IC50 < 10 на двух клеточных линиях) и (IX) (IC50 < 10 на одной клеточной линии), что говорит о самой высокой среди изученного ряда соединений противоопухолевой активности. Хотя значение IC50 для соединения (II) составляет 9.8 мкМ на клеточной линии Jurkat, но при максимальной концентрации его действие приводит к гибели опухолевых клеток меньше чем на 75%, что не позволяет отнести его к соединениям с высокой противоопухолевой активностью.

С помощью компьютерной системы PASS [16–18] для соединений (IV) и (IX) проведено прогнозирование противоопухолевой активности и ее механизмов, наличие которых имеет значение для отнесения химических соединений к потенциальным противоопухолевым препаратам. В табл. 2 представлены результаты прогнозирования биологической активности соединений (IV) и (IX) в виде высокой вероятности соединения проявлять определенную биологическую активность (Pa > 0.7) и вероятности не проявлять эту активность (Pi).

Таблица 2.

Результаты прогнозирования биологической активности* соединений (IV) и (IX)

Cоединение (IV) Cоединение (IX)
Pa > 0.7 Pi Тип активности Pa > 0.7 Pi Тип активности
0.829 0.006 Агонист апоптоза 0.915 0.001 Активатор транскрипционного фактора NF-κB
0.820 0.009 Антинеопластическая 0.915 0.001 Активатор транскрипционного фактора
0.779 0.003 Активатор транскрипционного фактора NF-κB 0.866 0.005 Антинеопластическая
0.779 0.003 Активатор транскрипционного фактора 0.826 0.004 Антипротозойная активность (лейшманиоз)
0.783 0.008 Противовоспалительная активность 0.798 0.003 Антинеопластическая (меланома)
0.764 0.003 Антогонист NO-оксида 0.721 0.013 Агонист апоптоза

*  Pa – вероятность проявления активности; Pi − вероятность отсутствия активности, в соответствии с программой PASS [16–18].

Выбраны результаты прогнозирования, при которых Pa > 0.7.

Результаты компьютерного прогнозирования указывают на значительную вероятность проявления соединениями (IV) и (IX) противоопухолевой и антиметастатической активности, механизмами которых могут быть проапоптотическая активность, способность повышать активность транскрипционного фактора NF-κ В.

Таким образом, в ходе скрининга серии N-, S- и Br-производных бетулиновой, олеаноловой и урсоловой кислот выявлено два соединения, обладающих значимой цитотоксической активностью: N-метилпиперазиниламид 2-(3-пиридинилидено)урсоновой кислоты (линия клеток PC3, IC50 = 8 мкМ) и метил-2-метилиденуреидобетулонат (линия клеток HCT-116, IC50 = 5.7 мкМ).

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Температуры плавления определяли на микростолике “Boetius”. Оптическое поглощение измеряли на поляриметре “Perkin-Elmer 241 MC” (Германия) в трубке длиной 1 дм. ТСХ-анализ проводили на пластинках Сорбфил (ЗАО Сорбполимер, Россия), используя систему растворителей хлороформ–этилацетат, 40 : 1. Вещества обнаруживали 10% раствором серной кислоты с последующим нагреванием при 100–120°С в течение 2–3 мин. Элементный анализ осуществляли на СHNS-анализаторе Eurо EA-3000, основной стандарт ацетанилид. Колоночную хроматографию проводили на Al2O3, Silica 60 (Macherey-Nagel). Спектры 1Н- и 13С-ЯМР (δ, м.д.; J, Гц) зарегистрированы на импульсном спектрометре “Bruker” Avance III с рабочей частотой 500.13 (1H) и 125.47 МГц (13C) с использованием 5-мм датчика с Z-градиентом PABBO при постоянной температуре образца 298 K в CDCl3. Химические сдвиги в спектрах 1Н- и 13С-ЯМР измерены относительно сигнала внутреннего стандарта тетраметилсилана). Спектры ЯМР 1H, 13C описанных соединений получены с использованием оборудования Центра коллективного пользования “Химия” УфИХ УФИЦ РАН.

Cоединения (I) и (VII) [7], (III) [19], (V) и (VI) [6], (VIII) и (IX) [20], (X) [21], (XI) [22], (XII) [23], (XIII) [24] получали как описано ранее.

N-(Индоло[3,2-b]луп-20(29)-ен-28-оил)-L-фенилаланин (II). К раствору 1 ммоль (0.53 г) соединения (I) в 20 мл осушенного CH2Cl2 прибавляли по каплям 3 ммоль (0.26 мл) (COCl)2 и перемешивали при комнатной температуре 2 ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме водоструйного насоса, полученный хлорангидрид растворяли в 20 мл CH2Cl2 и добавляли 1.2 ммоль (0.26 г) метилового эфира L-фенилаланина гидрохлорида, 3 капли Et3N и кипятили с обратным холодильником 3 ч, промывали 5% HCl (2 × 50 мл), водой (50 мл), сушили над CaCl2. Удаление метоксильной группы осуществляли путем обработки неочищенного продукта реакции 4 М раствором NaOH в CH3OH-THF (1 : 1, v/v, 20 мл) при перемешивании при 20°C в течении 6 ч. Далее реакционную смесь выливали в 100 мл 5% раствора НСl (10 мл), выпавший осадок отфильтровывали, промывали до нейтральной реакции промывных вод, сушили на воздухе. Выход 0.50 г (75%). Т. пл. 134–135°С. Спектр 1H-ЯМР: 0.85, 0.90, 0.97, 1.19, 1.28, 1.68 (18 H, 6с, 6CH3), 1.06–3.16 (26 H, м, CH и CH2), 4.60 и 4.73 (2 Н, оба д, J 2.5, H29), 4.85 (1 H, м, H37), 5.92 (1 Н, уш. с, NH), 7.04−7.38 (8Н, м, Harom), 7.84 (1Н, уш. с, NH). Спектр 13С-ЯМР : 14.6, 15.9, 16.3, 19.3, 19.4, 21.4, 23.1, 25.7, 29.3, 30.7, 30.8, 33. 5, 33.6, 34.1, 37.3, 37.8, 38.0, 38.1, 38.3, 40.8, 42.5, 46.6, 49.4, 49.9, 52.8, 53.3, 55.8, 106.9 (C2), 109.5 (C29), 110.3, 117.9, 118.8, 120.8, 128.3 (все Carom), 128.7 (C41), 128.7 (C43), 129.0 (C40), 129.0 (C44), 136.2 (Carom), 136.4 (C41), 140.9 (C3), 150.8 (C20), 178.6 (C45), 176.0 (C28). Найдено, %: C 80.07; H 8.65; N 4.14. С45Н58N2O3. Вычислено, %: C 80.08; H 8.66; N 4.15. (Mr 673.01).

N-Метилпиперазиниламид 2-[3-пиридилидено]-3-оксо-12-ен-урсан-28-овой кислоты (IV). К раствору 1 ммоль (0.54 г) соединения (III) в 20 мл EtOH добавляли 1.5 ммоль (0.14 мл) 3-пиридилкарбальдегида и 2.5 мл 40% KOH/EtOH, реакционную массу перемешивали при 20°C в течение 4 ч, выливали в 50 мл 5% раствора НСl, осадок отфильтровывали, сушили на воздухе, продукт хроматографировали на колонке, элюенты – петролейный эфир и петролейный эфир- хлороформ (2 : 1). Выход 0.50 г (80%). Т. пл. 142–143°С. Спектр 1H-ЯМР : 0.80, 0.90, 1.01, 1.11, 1.19, 1.35, 1.40 (21H, 7с, 7CH3), 1.39−2.19 (19 H, м, CH и CH2), 2.30 (3 H, с, NCH3), 2.31−2.41 (4 H, м, 2CH2), 2.89‒2.98 (2 H, м, H1), 3.41−3.71 (4 H, м, 2CH2), 5.21 (1 H, с, H12), 7.35 (1 H, м, Ar-CH), 7.41 (1H, с, Hvinilic), 7.73 (1 H, д, J 8), 8.52 (1H, д, J 4.0 , Ar-CH), 8.73 (1H, c, Ar-CH). Спектр 13С-ЯМР: 15.5, 16.7, 17.5, 17.7, 18.5, 20.3, 21.3, 22.3, 22.7, 23.6, 24.5, 28.2, 29.7, 29.9, 30.6, 32.2, 34.2, 36.3, 38.7, 39.3, 39.6, 42.4, 44.2, 45.2, 45.3, 45.3, 46.0, 53.1, 55.1, 55.1, 123.4, 124.8 (C12), 128.3, 131.8, 133.6, 135.9 (C13), 137.1 (C2), 149.1, 151.0, 175.1 (CON), 207.4 (C3). Найдено, %: C 78.54; H 9.36; N 6.69. С41Н59N3O2. Вычислено, %: C 78.67; H 9.50; N 6.71. (Mr 625.93).

Цитотоксическую активность соединений (I), (II), (IV)–(XIII) изучали с помощью стандартного МТТ-теста [14]. Исследование проводили на клеточных линиях опухолей человека, полученных из Банка клеточных линий ФГБУ “НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина” Минздрава России. Клеточные линии культивировали в среде RPMI-1640, содержащей 10% телячьей эмбриональной сыворотки, 10 мМ HEPES (Sigma, США), 2 мМ L-глутамин (Sigma, США), 40 нг/мл гентамицина (ICN, США), аминокислоты, пируват натрия и раствор витаминов (ПанЭко, Россия), при 37°С в атмосфере 5% СО2. Клетки поддерживали в логарифмической фазе роста постоянным пересевом культуры через 3–4 сут. Для открепления адгезионных клеток с пластиковой поверхности культурального флакона использовали раствор Версена.

Для постановки MTT-теста клетки раскапывали в 198 мкл полной среды RPMI-1640 в 96-луночные плоскодонные планшеты (Costar, USA). Через 1 сут в каждую лунку добавляли исследуемые соединения в концентрации от 1 до 100 мкМ и инкубировали с клетками в течение 72 ч в 5% СО2 при 37°C. Каждое соединение ставили в триплете (в трех лунках планшета). Каждый эксперимент повторяли трижды. Соединения растворяли в DMSO так, чтобы концентрация DMSO в лунке не превышала 1%. Водорастворимые соединения растворяли в воде. В качестве контроля для соединений, растворимых в DMSO, использовали лунки с клетками с 1% DMSO в полной ростовой среде.

Через 72 ч в каждую лунку вносили по 20 мкл раствора МТТ [бромид 3-(4,5-диметилтиазолин-2)-2,5 дифенилтетразолия] (маточный раствор 5мг/мл, конечная концентрация 1мг/мл), и инкубировали 4 ч при 37°С в 5% CO2.

После образования формазана н жидкость над осадком удаляли, осадок растворяли в 150 мкл DMSO. Далее планшеты помещали на 10 мин в термостат при температуре 37°С и затем 10 мин встряхивали на шейкере для равномерного растворения кристаллов формазана, после чего интенсивность окрашивания среды (D) измеряли на фотометрическом анализаторе иммуноферментных реакций MultiskanEX ThermoLabSystems при λ 540 нм. Величина поглощения прямо пропорциональна числу живых клеток.

Рис. 1.

Структуры соединений (I), (V)–(XIII).

Определяли долю погибших клеток, характеризующую цитотоксичность (С, %) по формуле:

$С = ({\text{1}} - (D{\text{о/}}D{\text{к}})) \times {\text{1}}00,{\text{ }}\% ,$
где Dк и Dо – оптическая плотность в контрольных и опытных лунках.

Концентрацию вещества, вызывающую гибель 50% клеток в концентрации ≤100 мкМ (IC50), определяли согласно [15].

Прогнозирование противоопухолевой активности и ее механизмов, наличие которых имеет значение для отнесения химических соединений к потенциальным противоопухолевым препаратам, проводили с использованием компьютерной системы PASS [16–18].

Список литературы

  1. Chudzik M., Korzonek-Szlacheta I., Król W. // Molecules. 2015. V. 20. P. 1610–1625.

  2. Hussain H., Green I.R., Shamraiz U., Saleem M., Badshah A., Abbas G., Rehman N.U., Irs M. // Expert. Opin. Ther. Pat. 2018. V. 28. № 5. P. 383–398.

  3. Eroshenko D.V., Krainova G.F., Konysheva A.V., Dmitriev M.V., Grishko V.V. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2018. V. 28. Is. 23–24. P. 3752–3760.

  4. Kahnt M.H., Al-Harrasi L.F.N., Csuk R. // Molecules. 2018. V. 23. Is. 10. 2558.

  5. Pokorny J., Krajcovicova S., Hajduch M., Holoubek M., Gurska S., Dzubak P., Volna T., Popa I., Urban M. // Future Med. Chem. 2018. V. 10. Is. 5. P. 483–491.

  6. Хуснутдинова Э.Ф., Петрова А.В., Апрышко Г.Н., Куковинец О.С., Казакова О.Б. // Биоорган. химия. 2018. Т. 44. № 3. С. 316−324. (Khusnutdinova E.F., Petrova A.V., Apryshko G.N., Kukovinets O.S., Kazakova O.B. // Russ. J. Bioorg. Chem. 2018. V. 44. № 3. P. 322−329).

  7. Khusnutdinova E.F., Petrova A.V., Kukovinets O.S., Kazakova O.B. // Nat. Prod. Comm. 2018. V. 13. Is. 6. P. 665−668.

  8. Giniyatyllina G.V., Smirnova I.E., Kazakova O.B., Yavorskaya N.P., Golubeva I.S., Zhukova O.S., Pugacheva R.B., Apryshko G.N., Poroikov V.V. // Med. Chem. Res. 2015. V. 24. P. 3423–3436.

  9. Казакова О.Б., Смирнова И.Е., Хуснутдинова Э.Ф., Жукова О.С., Фетисова Л.В., Апрышко Г.Н., Медведева Н.И., Ямансаров Э.Ю., Байкова И.П., Тханх Тра Нгуен, Х. До Тхи Тху // Биоорган. химия. 2014. Т. 40. № 5. С. 608–617. (Kazakova O.B., Smirnova I.E., Khusnutdinova E.F., Zhukova O.S., Fetisova L.V., Apryshko G.N., Medvedeva N.I., Yamansarov E.Y., Baikova I.P., Nguyen T.T., Thu H.D.T. // Russ. J. Bioorg. Chem. 2014. V. 40. № 5. P. 558 −567).

  10. Хуснутдинова Э.Ф., Апрышко Г.Н., Петрова А.В., Куковинец О.С., Казакова О.Б. // Биоорган. химия. 2018. Т. 44. № 1. С. 104−109. (Khusnutdinova E.F., Apryshko G.N., Petrova A.V., Kukovinets O.S., Kazakova O.B. // Russ. J. Bioorg. Chem. 2018. V. 1. № 1. P. 123−127).

  11. Хуснутдинова Э.Ф., Лопатина Т.В., Казакова О.Б., Ахматшина Г.Ф., Куковинец О.С. // Химия природн. соедин. 2014. Т. 50. № 5. С. 739–742. (Khusnutdinova E.F., Lopatina T.V., Kazakova O.B., Akhmatshina G.F., Kukovinets O.S. // Chem. Nat. Comp. 2014. V. 50. Is. 5. P. 853−856).

  12. Zhou M., Zhang R.-H., Wang M., Xu G.-B., Liao S.-G. // Europ J. Med. Chem. 2017. V. 131. P. 222–236.

  13. Gupta N., Rath S.K., Singh J., Qayum A., Singh S., Sangwan P.L. // Europ J. Med. Chem. 2017. V. 135. P. 517−530.

  14. Mosmann T. // J. Immunol. Methods. 1983. V. 65. № 1. P. 55–63.

  15. Миронов А.Н. // Методические рекомендации по доклиническому изучению противоопухолевой активности лекарственных средств. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. М.: Гриф и К, 2012. С. 642–656.

  16. Филимонов Д.А., Поройков В.В. // Рос. хим. журн. 2006. Т. 50. С. 66–75.

  17. Filimonov D.A., Poroikov V.V. // Chemoinformatics Approaches to Virtual Screening. / Eds. Varnek A., Tropsha A. RSC Publishing, 2008. P. 182–216.

  18. Филимонов Д.А., Лагунин А.А., Глориозова Т.А., Рудик А.В., Дружиловский Д.С., Погодин П.В., Поройков В.В. // Химия гетероциклич. соедин. 2014. T. 3. C. 483–499.

  19. Казакова О.Б., Гиниятуллина Г.В., Толстиков Г.А., Медведева Н.И., Уткина Т.М., Карташова О.Л. // Биоорган. химия. 2010. Т. 36. № 3. С. 416–422. (Kazakova O.B., Giniyatullina G.V., Tolstikov G.A., Medvedeva N.I., Utkina T.M., Kartashova O.L. // Russ. J. Bioorg. Chem. 2010. V. 36. № 3. P. 383–389).

  20. Флехтер О.Б., Бореко Е.И., Нигматуллина Л.Р., Павлова Н.И., Медведева Н.И., Николаева С.Н., Ашавина О.Ю., Савинова О.В., Балтина Л.А., Галин Ф.З., Толстиков Г.А. // Хим.-фарм. журн. 2004. Т. 38. № 7. С. 10–13. (Flekhter O.B., Boreko E.I., Nigmatullina L.R., Pavlova N.I., Medvedeva N.I., Nikolaeva S.N., Ashavina O.A., Savinova O.V., Baltina L.A., Galin F.Z., Tolstikov G.A. // Pharm. Chem. J. 2004. V. 38. Is. 7. P. 355–358).

  21. Флехтер О.Б., Бореко Е.И., Нигматуллина Л.Р., Павлова Н.И., Николаева С.Н., Савинова О.В., Еремин В.Ф., Балтина Л.А., Галин Ф.З., Толстиков Г.А. // Биоорган. химия. 2003. Т. 29. № 3. С. 326–332. (Flekhter O.B., Boreko E.I., Pavlova N.I., Nikolaeva S.N., Savinova O.V., Eremin V.F., Baltina L.A., Galin F.Z., Tolstikov G.A. // Russ. J. Bioorg. Chem. 2003. V. 29. Is. 3. P. 296–302).

  22. Флехтер О.Б., Карачурина Л.Т., Поройков В.В., Нигматуллина Л.Р., Балтина Л.А., Зарудий Ф.С., Давыдова В.А., Спирихин Л.В., Байкова И.П., Галин Ф.З., Толстиков Г.А. // Биоорган. химия. 2000. Т. 26. № 3. С. 215–223. (Flekhter O.B., Karachurina L.T., Poroikov V.V., Nigmatullina L.P., Baltina L.A., Zarudii F.S., Davydova D.A., Spirikhin L.V., Baikova I.P., Galin F.Z., Tolstikov G.A. // Russ. J. Bioorg. Chem. 2000. V. 26. Is. 3. P. 192–200).

  23. Boreko E.I., Pavlova N.I., Savinova O.V., Nikolaeva S.N., Flekhter O.B., Phyzhova N.S., Nikandrov V.N. // News Biomed. Sci. 2002. № 3. P. 86–91.

  24. Флехтер О.Б., Гиниятуллина Г.В., Галин Ф.З., Басщенко Н.Ж., Макара Н.С., Зарудий Ф.С., Бореко Е.И., Савинова О.В., Павлова Н.И., Cтарикова З.А., Толстиков Г.А. // Химия природн. соедин. 2005. V. 41. №. 6. С. 582–584. (Flekhter O.B., Giniyatullina G.V., Galin F.Z., Baschenko N.Zh., Makara N.S., Zarudii F.S., Boreko E.I., Savinova O.V., Pavlova N.I., Starikova Z.A., Tolstikov G.A. // Chem. Nat. Comp. 2005. V. 41. № 6. P. 706–709).

Дополнительные материалы отсутствуют.

Инструменты

следующая статья выпуска предыдущая статья выпуска содержание выпуска

Биоорганическая химия

Архивы выпусков Информация о журнале Отправить рукопись в журнал